中风芪红利水胶囊对急性脑缺血大鼠凝血与纤溶系统的影响*

关运祥

(河南中医学院第一附属医院脑病三区，河南郑州450000)

中风芪红利水胶囊为河南中医学院一附院博士生导师王新志教授在吸取前人治疗经验和教训，博览历代中医古籍，并根据多年临床的实践，结合现代医学研究成果研制出的针对缺血性中风气虚血瘀、水湿停滞的中药复方制剂，临床运用数十年，疗效明显。为探讨其治疗急性脑缺血损伤的发生机制，本实验观察了中风芪红利水胶囊对急性脑缺血大鼠凝血及纤溶系统的影响。

1 材料与方法

1.1 动 物

健康Wistar大鼠100只，普通级，雄性，体质量(310±20)g，由郑州大学医学院实验动物中心提供。

1.2 药品与试剂

中风芪红利水胶囊［郑药制剂(2002)BW－10208］，0.5 g/粒，由河南中医学院第一附属医院制剂室提供。将该药浸膏，加入由蒸馏水制成的5 g/L羧甲基纤维素钠溶液中，配制成浓度为375，125 g/L的混悬药液。按10 μL/g灌胃，相当于成人剂量的30，10倍，依次为高、低剂量组。步长脑心通胶囊，规格0.4 g/粒，陕西咸阳步长制药有限公司产品，批号Z050715。将胶囊内容物加入蒸馏水制成的5 g/L羧甲基纤维素钠溶液中，配成浓度为276 g/L的混悬药液。按10 μL/g灌胃，相当成人剂量的10倍。活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(FIB)试剂盒，由郑州世帝仪器公司提供，批号3400350；D－二聚体试剂盒北京捷门生物公司提供，批号20041062。

1.3 模型的建立、分组与给药

将100只Wistar大鼠根据体质量随机分成10组，每组10只；任取1组为假手术组，其余9组用于建立脑缺血模型。参照文献方法［1］制备Wistar大鼠大脑中动脉缺血模型。大鼠苏醒后，动物向左侧做转圈运动，即表示造模成功。假手术组分离颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉，仅结扎颈外动脉。根据Kulurz的神经缺损三级评分标准［2］，将符合神经缺损评分二级的造模成功大鼠40只，根据体质量随机分为步长脑心通组，中风芪红利水胶囊高、低剂量组，模型对照组4组，每组10只。步长脑心通组给予276 g/L步长脑心通混悬药液，中风芪红利水胶囊高、低剂量组依次给予375，125 g/L中风芪红利水胶囊混悬药液，模型对照组和假手术组给5 g/L CMC-Na；均按10 μL/g体质量灌胃给药，1 d 1次。各组术后第1天开始给药，第4天同时处死，最后1次给药在采集标本前1 h进行。

1.4 检测指标

检测大鼠血清中FIB、D－二聚体、PT和APTT。取大鼠的腹主动脉血1.8 mL，注入含有枸橼酸钠(0.109 mol/L)0.2 mL 硅化玻璃试管中，混匀，3 000 r/min离心10 min，分离血浆在2～8℃保存。各检测指标按测试盒说明书由专人操作，6 h之内测定完毕。

1.5 统计学方法

采用SPSS 14.0统计分析软件处理。实验数据以均数()±标准差(s)表示，组间对比采用 t检验。以P＜0.05为差别有统计学意义。

2 结果

2.1 各组大鼠PT、APPT对比

与假手术组对比，模型对照组大鼠的PT、APTT缩短，差别有统计学意义(P＜0.05)。与模型对照组对比，中风芪红利水胶囊高、低剂量组和步长脑心通组 PT、APTT延长，差别有统计学意义(P＜0.01)。与步长脑心通组对比，中风芪红利水胶囊高、低剂量组 PT、APTT延长，差别有统计学意义(P＜0.01)。中风芪红利水胶囊高、低剂量组之间两指标对比，差别无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

表1 各组大鼠PT、APTT对比 ±s

表1 各组大鼠PT、APTT对比 ±s

注：与假手术组对比，* P＜0.05；与模型对照组对比，##P＜0.01；与步长脑心通组对比，ΔΔ P ＜0.01。

PT/min APTT/min假手术组组 别 动物数10 12.02 ±0.26 32.47 ± O.25模型对照组 10 10.64±0.62* 30.17 ±0.20*步长脑心通组 10 12.84±0.38## 33.87 ±0.14##中风芪红利水高剂量组 10 14.47±0.24##ΔΔ 35.48±0.45##ΔΔ中风芪红利水低剂量组 10 14.39±0.32##ΔΔ 35.18±0.74##ΔΔ

2.2 各组大鼠FIB、D－二聚体含量对比

与假手术组对比，模型对照组大鼠血浆FIB含量升高，差别有统计学意义(P＜0.05)，而D－二聚体含量差别无统计学意义(P＞0.05)。与模型对照组对比，中风芪红利水胶囊高、低剂量组和步长脑心通组FIB含量降低，D－二聚体的含量明显升高，差别有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05)。与步长脑心通组对比，中风芪红利水胶囊高、低剂量组FIB含量降低，D－二聚体的含量明显升高，差别有统计学意义(P＜0.01)。中风芪红利水胶囊高、低剂量组间两指标对比，差别无统计学意义(P＞0.05)。见表2。

表2 各组大鼠FIB、D－二聚体含量对比 ±s

表2 各组大鼠FIB、D－二聚体含量对比 ±s

注：与假手术组对比，* P ＜0.05；与模型对照组对比，#P ＜0.05，##P ＜0.01；与步长脑心通组对比，ΔΔ P＜0.01。

组 别 动物数 FIB/(g·L－1) D－二聚体/(mg·L－1)10 3.16 ±1.52 0.19 ±2.17模型对照组 10 3.87 ±2.27* 0.81 ±1.44步长脑心通组 10 2.37 ±1.08# 2.96 ±2.73#芪红利水高剂量组 10 2.08±2.03##ΔΔ 4.94±0.17##ΔΔ芪红利水低剂量组 10 2.11±2.08##ΔΔ 4.67±0.13##假手术组ΔΔ

3 讨论

在长期的临床实践中，缺血性中风的病机被认为是在阴阳气血亏虚的基础上，在忧患恼怒、嗜食厚味、劳倦内伤等诱因作用下，脏腑功能失调，气虚益甚，气血逆乱于脑，致脑脉痹阻。津血同源，互相存用，瘀血内阻，血不利则为水，营津不行致水浊内生，壅塞气机，而加重瘀血产生，形成瘀水互结脑脉痹阻的病理变化。缺血性中风的病位在脑窍，病性是本虚标实。中风芪红利水胶囊由黄芪、红花、水蛭、益母草、丹参等药物组成。方中重用黄芪，大补脾胃之气，使气旺促进血行，祛瘀而不伤正，并有利水之效，为君药；红花、益母草、水蛭、丹参均为臣药。诸药合用，共奏利水通络、益气活血之效。凝血酶原时间用以检测外源性凝血功能，部分活化凝血活酶时间用以检测内源性凝血功能。纤维蛋白原是影响全血及血浆黏度的重要指标。D－二聚体是纤维蛋白被纤溶酶水解后产生的一种特异性的降解产物，是反映体内血栓形成和纤溶系统活化的分子标志物。目前许多资料［3］研究显示：纤维蛋白原、D － 二聚体、PT、APTT是监测凝血与纤溶系统的非常有意义的实验指标，并对血栓性疾病的明确诊断、疗效观察具有重要的意义。急性脑梗死患者的体内凝血系统与纤溶系统失衡，血液呈现高凝状态。急性期治疗的目标在于阻止凝血状态进一步恶化发展，促进纤溶系统激活，加速血栓溶解［4］。本研究显示：中风芪红利水胶囊可使模型大鼠PT、APTT时间明显延长，纤维蛋白原含量下降，D－二聚体含量增加。表明：中风芪红利水胶囊可增强凝血功能，降低全血及血浆黏度，激发纤溶系统活性，促进血栓溶解和血管再通。此为中风芪红利水胶囊的临床使用提供了实验依据。

［1］张学辉，张嘉眉.补阳还五汤对大鼠脑梗死 ET、SOD、MDA 的影响［J］.中医药学刊，2002，20(4)：462.

［2］Kuluz JW，Prado RJ.The effect of nitric oxide synthasein fract volume after reverible focal ischemia in conscious rats［J］.Stoke，1993，24(12)：2023 －2029.

［3］黄兴汉.缺血性脑血管病的凝血纤溶变化及溶栓治疗［J］.卒中与神经疾病，2006，3(2)：101.

［4］黄五军.缺血性脑血管病凝血纤溶变化和溶栓治疗［J］.卒中与神经疾病，2003，3(2)：101.