六堡茶对小鼠免疫功能的影响

刘冠萍 黄宇声 张栩颜 饶伟源 邓聿胤 覃良

六堡茶是以地理名称命名的历史名茶，原产于广西梧州市苍梧县六堡乡，至今已有1500多年历史。六堡茶属于温性茶，除了具有其它茶类所共有的保健作用外，具有更强的分解油腻、降低人体类脂肪化合物、胆固醇、三酸甘油脂的功效，长期饮用可以有健胃养神、消滞除胀、清热化湿、醒酒、降脂等多种保健功效[1]，成人服用量是一次3 g，3次/d。目前关于六堡茶的研究甚少，本实验旨在探讨六堡茶对小鼠免疫功能的影响，为六堡茶的开发与应用提供基础实验依据。

1 材料与方法

1.1 动物 健康KM小鼠120只，体重18～22 g，雌雄兼用，广西医科大学实验动物中心提供（许可证号：SCXK桂2009-0002）。

1.2 药品与试剂 六堡茶水提物，由研究者自行提取，性状为棕褐色浸膏（每毫升相当于药材1.87 g）。临用时以蒸馏水配成相应浓度使用。小牛血清，由美国Hyclone公司生产；RPMI l640，由美国Gibco公司生产；刀豆蛋白A（ConA）、四甲基偶氮唑盐（MTT），由美国Sigma公司生产。其他试剂均为国产分析纯。

1.3 仪器 二氧化碳培养箱（美国Queue公司）；超净工作台（上海浦东跃欣科学仪器厂）；自动酶标仪（美国Bio-Rad公司）。

1.4 方法

1.4.1 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验 将小鼠随机分为四组：正常对照组、六堡茶低剂量组（3.75 g/kg）、六堡茶中剂量组（7.5 g/kg）、六堡茶高剂量组（15 g/kg），每组10只。除正常对照组外，各组每天灌胃六堡茶1次，给药体积20 ml/kg，正常对照组灌胃等体积的蒸馏水，连续30 d后，参照文献[2]方法进行实验。按下式计算吞噬率和吞噬指数。

吞噬率（%）=吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/巨噬细胞数×100%

吞噬指数=被吞噬的鸡红细胞总数/巨噬细胞数

1.4.2 血清溶血素测定 分组及给药同上。于灌胃第26天给小鼠腹腔注射2%SRBC 0.2 ml/只，于免疫后第4天摘眼球采血，分离血清并在微量血凝板上进行血清溶血素测定。37 ℃孵育3 h后，统计血球凝集度，计算相应抗体积数[3]。

1.4.3 小鼠淋巴细胞转化实验 分组及给药同上。参照文献[3]方法进行实验，末次给药后2 h，无菌取脾细胞，常规制备小鼠脾细胞悬液，采用MTT比色法测定脾淋巴细胞增殖能力。

1.5 统计学处理 采用SPSS 13.0软件对实验数据统计处理，计量资料以（±s）表示，进行单因素方差分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 六堡茶对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响 由表1可见，与正常对照组比较，六堡茶高剂量小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬率、吞噬指数明显高于正常对照组（P<0.05），中、低剂量组差异无统计学意义（与正常对照组比较，P>0.05）。见表1。

表1 六堡茶对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响（±s）

表1 六堡茶对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响（±s）

*与正常对照组比较，P<0.05

组别 剂量（g/kg）吞噬率（%） 吞噬指数正常对照组（n=10） - 23.9±4.2 0.41±0.05六堡茶低剂量组（n=10） 3.75 24.2±5.6 0.43±0.11六堡茶中剂量组（n=10） 7.5 27.1±3.7 0.45±0.06六堡茶高剂量组（n=10） 15 28.8±5.1* 0.52±0.13*

2.2 六堡茶对小鼠血清溶血素的影响 由表2可见，与正常对照组比较，六堡茶中、高剂量能明显增加小鼠的抗体积数（P<0.05），低剂量组差异无统计学意义（P>0.05），表明六堡茶具有提高小鼠血清溶血素水平的作用。

表2 六堡茶对小鼠血清溶血素的影响（±s）

表2 六堡茶对小鼠血清溶血素的影响（±s）

*与正常对照组比较，P<0.05

组别 剂量（g/kg） 抗体积数正常对照组（n=10） - 130.8±18.2六堡茶低剂量组（n=10） 3.75 137.6±13.9六堡茶中剂量组（n=10） 7.5 147.8±13.2*六堡茶高剂量组（n=10） 15 150.3±15.5*

2.3 六堡茶对小鼠脾淋巴细胞转化试验的影响 由表3可见，与正常对照组比较，六堡茶各剂量组的淋巴细胞增殖能力均无明显变化（P>0.05）。

表3 六堡茶对小鼠小鼠脾淋巴细胞转化试验的影响（±s）

表3 六堡茶对小鼠小鼠脾淋巴细胞转化试验的影响（±s）

淋巴细胞增殖能力（OD值）正常对照组（n=10） - 0.183±0.061六堡茶低剂量组（n=10） 3.75 0.192±0.055六堡茶中剂量组（n=10） 7.5 0.206±0.072六堡茶高剂量组（n=10） 15 0.210±0.057组别 剂量（g/kg）

3 讨论

本文选用了数个免疫测定指标观察和探讨六堡茶对小鼠免疫机能的调节作用。巨噬细胞的吞噬能力很强，其胞浆内富含溶酶体、酸性磷酸酶和过氧化物酶等物质，能非特异性地吞噬多种抗原，在机体的非特异性免疫反应中具有十分重要的作用。吞噬作用常作为反映巨噬细胞功能状况的指标[2]。实验结果表明，六堡茶高剂量能明显提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬指数和吞噬率，说明六堡茶能够增强机体的非特异性免疫能力。

血清溶血素是B淋巴细胞在接受各种抗原刺激后分泌的抗体，是衡量机体体液免疫水平的重要指标[4]。本实验结果显示，六堡茶能使正常小鼠血清溶血素的含量明显增高，提示其具有增强小鼠体液免疫功能的作用。

可见，六堡茶具有增强免疫力的功能，但其增强免疫功能的机制及对免疫分子的作用有待于进一步研究。

[1] 杨柳.六堡茶工艺的探讨[J].广西轻工业，2008，9（4）：13-15.

[2] 孙晶，徐俭.木脂素对小鼠免疫功能的影响[J].哈尔滨医科大学学报，2010，44（5）：467-470.

[3] 宋琳琳，陈立，陈五岭.食源性生物活性肽对小鼠免疫功能的影响[J].西北大学学报（自然科学版），2009，39（4）：612-616.

[4] 王丽叶，马利芹，徐倩倩，等.葱乙醇提取物对小鼠免疫功能的影响[J].中国农学通报，2010，26（20）：7-10.