国内不同厂家替米沙坦片与原研制剂的溶出曲线对比分析＊

贾孟良，谢守霞，杨红英，练宏新，王 玉

(广东省深圳市人民医院·暨南大学第二临床医学院，广东 深圳 518020)

替米沙坦为高选择性血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体拮抗剂，由德国勃林格殷格翰公司开发，1999年在美国首次上市，用于高血压治疗[1]。替米沙坦在水和pH=3～9范围内几乎不溶，口服生物利用度为50%[1]。为考察替米沙坦片的质量，按照2010年版《中国药典(二部)》附录ⅩC第二法，参照文献[2]用高效液相色谱法定量，比较了市售4个厂家间的替米沙坦片及与原研制剂的体外溶出曲线的相似性。现报道如下。

1 仪器与试药

RCZ－8B型溶出仪(天津天大天发科技有限公司);BP211D型十万分之一电子天平(德国赛多利斯);ZKT－7F型真空脱气机(天津天大天发科技有限公司);Waters2695型高效液相色谱仪－2487UV检测器(沃特世科技有限公司)。替米沙坦对照品(中国药品生物制品检定所，批号为 144701－48－4，含量98.9%);国外A企业替米沙坦原研制剂(勃林格殷格翰，商品名 Micardis，每片 80 mg)，国内B企业替米沙坦片(每片40mg)，国内C企业替米沙坦片(每片40 mg)，国内D企业替米沙坦片(每片40mg)，国内E企业替米沙坦片(每片40 mg);盐酸;试验所用试剂均为分析纯，水为超纯水。

图1 替米沙坦的高效液相色谱图

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:WatersSymmetry C18柱(250mm ×4.6mm，5μm);流动相:乙腈－水 －冰乙酸(500∶500 ∶1;)流速:1.0 mL/min;检测波长:210 nm;进样量:10μL;柱温:30℃[3]。色谱图见图1。

2.2 溶出度试验条件

按照2010年版《中国药典(二部)》附录ⅩC第二法(桨法)，以pH=7.4磷酸盐缓冲溶液1 000 mL为溶出介质，溶出温度(37±0.5)℃，转速50 r/min，依法操作，按拟订色谱条件测定。

2.3 溶液制备

精密称取替米沙坦对照品 0.025 68 g，以流动相稀释至50mL，混均得 513.6μg/mL对照品贮备液。溶出介质为 pH=7.4磷酸盐缓冲溶液，取磷酸二氢钾6.8 g和0.9 g氢氧化钠，加水1 000mL，摇均，调 pH 至 7.4。

2.4 方法学考察

波长选择与线性关系考察:精密称取替米沙坦对照品贮备液1mL，用流动相稀释至200mL，于200～400 nm波长范围内进行扫描，测定其最大吸收波长为210 nm。分别精密称取替米沙坦贮备液 1mL 置 10，25，50，100，200，500mL 容量瓶中，用溶出介质稀释至刻度，摇匀，以溶出介质为空白，用高效液相色谱法在210nm波长处测得峰面积，以峰面积(Y)对质量浓度(X)进行线性回归，得回归方程 Y=29.171 4X+0.003 9，R2=1.000 0(n=6)。结果表明，替米沙坦质量浓度在1～50mg/L范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验:精密称取替米沙坦对照品贮备液0.5，2，3.5mL，定容于 50 mL 容量瓶中，分别得 5.136，20.544，35.952 μg/mL的测定液，进行日内精密度测试，分别于 0，1，4，9，16，24 h 时进样测定。结果的 RSD=0.023%(n=3)，表明仪器精密度良好。

加样回收试验:精密称取替米沙坦细粉适量(相当于5mg替米沙坦)，置100mL容量瓶中，将对照品3，5，8mg分别加入，用溶出介质定容至刻度，摇匀，滤过，进样10μL，测定峰面积，计算回收率。结果见表1。

表1 不同企业产品的替米沙坦含量测定与加样回收试验结果

2.5 溶出曲线测定[3]

量取经脱气的溶出介质1 000mL于溶出杯中，加热使溶出介质保持在(37±0.5)℃范围内，调整转速使其稳定在75 r/min。取供试品6粒，分别置6个转篮中，将转篮降到烧杯内，立即计时，并定时在 5，10，15，20，30，45，60min 取样 10 mL(及时补液)，立即用0.8μm滤膜过滤后，用高效液相色谱法进行定量计算，得不同时间点的累积溶出率。

Q为各时间点校正后累积溶出量，Cn为各时间点取出后的样品质量浓度(稀释前);L为制剂标示量(L/V2单位需与 Cn一致);V1为各时间点固定取样体积;V2为溶出介质体积。

溶出曲线见图 2。根据 Weibull方程 InIn[1/(1－Ft)]=m in t+in A，求出不同厂家替米沙坦片的溶出参数 T50(药物溶出50%的时间)、TD(药物溶出 63.2%的时间)及 m(参数 m)，见表2。并对其进行国内厂家与进口制剂的两两 t检验，由表3可知，A 厂家与 B，C，D，E 4 个厂家的溶出参数 T50，TD，T80，m 值均无显著性差异(P ＞0.05，t=1.812，df=10)。

图2 5个厂家的替米沙坦片累积溶出曲线

表2 不同厂家替米沙坦片的释放参数

表3 对照片与国产替米沙坦片的 t值检验表

3 讨论

高效液相色谱法是常用的检验分离方法，具有定量准确、专属性强等优点，操作简单，适用于快速分析试验采用。在以溶出介质pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液中，比较A厂家与B，C，D，E厂家的溶出参数，经双单侧 t检验进行分析，B，C，D，E 4个厂家生产的替米沙坦片与A厂家生产的原研制剂均可在35min内溶出标示量的85%以上，溶出曲线基本一致。由表3可见，B，C，D，E 4个厂家的溶出参数与进口对照片均无显著性差异，质量可靠。溶出度是药品质量控制的指标之一，固体制剂的溶出度直接影响药品的体内生物利用度和临床疗效。因此，应严格按照药典的质量标准控制产品内在质量，保证用药的合理性和安全性。

[1]杨惠娣，徐 彬.降压型药替米沙坦[J].世界临床药物，2003，24(11):695－697.

[2]Kurade VP，Pai MG，Gude R.RP－HPLC Estimation of Ramipril and Telmisartan in Tablets[J].Indian JPharm Sci，2009 ，71(2):148 － 151.

[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京:中国医药科技出版社，2010:附录ⅤD.