五麦党黄口服液对辐射损伤小鼠防护作用的初步研究
2013-09-15徐春红卢海波胡正波
徐春红,李 鹏,谢 梅,卢海波,胡正波,徐 力
(中国人民解放军第452医院,四川 成都 610021)
五麦党黄口服液(WMDH)具有益气养阴、运脾健胃之功效,用于部队官兵大运动量训练后抗疲劳,恢复体能,提高机体在疲劳及高原缺氧环境的生存能力[1]。其处方经工艺优化后制成口服液剂型。笔者拟对五麦党黄口服液的辐射防护作用进行初步试验观察,为其临床辐射防护的应用提供试验依据。
1 仪器、材料与方法
1.1 仪器与材料
XSP-8CA型生物显微镜(上海光学仪器厂);FA2004型电子分析天平(上海方瑞仪器有限公司);血球计数板(上海市求精生化试剂仪器有限公司)。五麦党黄口服液(WMDH,解放军第452医院制剂室提供,批号为20120301),由五味子、麦冬、党参、炙黄芪、白术、大枣、青陈皮、建曲、泽泻等中药材制成,临用前浓缩至各剂量组相应浓度。KM小鼠,体重18~22 g,雄性,6~8周龄,四川大学实验动物中心提供,生产许可证号SCXK(川)2009-09。试验动物饲养适应环境3 d后进行试验,饲养环境温度为(20±2)℃,自由进食、饮水。
1.2 方法
30 d存活率、存活天数测定:取小鼠50只,随机分成正常对照组(A 组),模型组(B 组),WMDH 给药低、中、高剂量组(C1,C2,C3组,给药剂量分别为 7.3,14.6,29.2 g/kg,相当于 60 kg 成人日用药量的 2.5,5,10倍)共5组,每组 10只。A组及 B组给予等容蒸馏水,给药组分别给予相应浓度的WMDH浓缩液灌胃,每日1次,给药容积均为每10 g体重 0.1mL,各组小鼠连续给药14 d。末次给药后3 h,除 A组外,其余4组均进行全身一次性60Coγ 射线照射,照射距离为 1.0m,照射剂量为 7.5 Gy,照射后观察并记录各组小鼠的生存状况、体重变化,计算各组小鼠的平均生存时间、30 d存活率。
外周血白细胞(WBC)计数:取小鼠50只,分组及给药方法同前,连续给药14 d。除A组外,其余4组均进行全身一次性60Coγ射线照射,照射距离为1.0m,总照射剂量为3 Gy。小鼠于照射前和照射后第4,10天,尾静脉采血20μL,加入WBC稀释液混匀,倒入血球计数板中,于显微镜下进行WBC计数。
胸腺、脾脏指数计算:试验结束后,颈椎脱臼处死小鼠,称重,迅速取出脾脏和胸腺称量湿重,计算胸腺、脾脏指数。
1.3 统计学处理
采用SPSS 17.0软件,配对资料采用 t检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
小鼠受辐照后,食欲下降,活动减少,皮毛无光泽,照射后持续每日2次观察并记录各组小鼠的生存状态,计算每组动物的平均存活时间与30 d存活率,存活超过30 d的以30 d计。结果见表1。辐照后第10天处死小鼠,计算胸腺、脾脏质量指数,以每1 g体重中胸腺或脾脏所占质量(mg/g)来表示,胸腺(脾脏)指数=胸腺(脾脏)质量(mg)/动物质量(g)。见表1。
3 讨论
中医认为,辐射伤病属于热邪侵犯机体致使阴伤和气血不足所致的病症,为邪热伤阴、气血两虚及脾胃不和、肝肾亏损等原因所致[2-3],治疗原则以清热生津、补益气血为主。WMDH以黄芪生脉饮为基础方,以益气生津、强心补肺为效。方中党参补中益气、生津养血,为主药。又因党参补气力不足,故益以黄芪。麦冬润肺养阴,益胃生津,清心除烦;五味子敛肺滋肾,生津止汗,宁心安神,以佐参、芪温补之偏。中医之内科杂症,主张自脾胃入手,谓之辨证论治,脾主运化,为后天之本,万物之母,脾气旺盛,则能生化益气,现代医学研究阐明,“脾虚”证往往与机体非特异性免疫、体液免疫、细胞免疫相关[4]。故组方在黄芪生脉饮基础方补中益气、养阴生津的同时,以党参、白术、大枣等益气健脾为主,辅以青、陈皮、泽泻燥湿除逆,帮助参、术健脾,生姜温中下气、当归行血和营,建曲导滞化积,甘草调和诸药。全方旨在益气养阴,运脾健胃,提高机体免疫能力,对抗辐射损伤,辨证施治。
试验表明,WMDH对延长受照小鼠存活时间、升高外周血白细胞及增加免疫器官指数均有明显作用,且呈一定的量效关系,提示WMDH具有一定的抗辐射作用,有进一步研究开发的价值。
表1 各组观察指标比较(±s)
表1 各组观察指标比较(±s)
注:与 B 组同时点比较,△P <0.05,▲P <0.01。
组别 剂量(g/kg)白细胞计数(×109/L)30 d存活情况脏器指数(mg/g)A组(n=10)B组(n=10)C1组(n=10)C2组(n=10)C3组(n=10)只数10 29.2 14.6 7.3 0311百分率(%)100.00 0 30.00 10.00 10.00时间(d)30.00 ± 0.00▲4.90 ± 3.05 14.90 ± 10.90▲12.15 ± 10.05△7.10 ± 4.34照射前7.89 ± 0.83 7.65 ± 1.09 8.12 ± 1.43 8.05 ± 0.78 7.92 ± 1.14照射后第3天8.10 ± 0.77 2.81 ± 1.36 4.33 ± 1.10△3.94 ± 0.73△3.21 ± 1.52照射后第10天7.92 ± 1.02 4.12 ± 1.07 6.49 ± 1.45▲5.14 ± 1.74 4.66 ± 1.63胸腺3.14 ± 1.21 1.15 ± 0.46 2.36 ± 0.57△1.94 ± 0.44△1.54 ± 0.61脾脏5.60 ± 1.48 2.52 ± 0.79 4.13 ± 0.87▲3.61 ± 1.23△2.87 ± 1.24
[1]李 鹏,胡 露,张 勇,等.五麦党黄汤对小鼠抗疲劳、耐缺氧和抗寒热能力的影响[J].西南国防医药,2012,22(1):16-18.
[2]沈世林,张汝学,贾正平.具有抗辐射损伤作用的中药复方研究进展概述[J].中国实验方剂学杂志,2007,13(11):64-66.
[3]黄黎明,石 鹏,张琳静,等.抗辐射复方中药对辐射损伤小鼠的防护作用研究[J].中国药事,2011,25(2):132 -134.
[4]修宗昌,罗云坚,余绍源.中医脾胃学说中免疫思想探析[J].上海中医药杂志,2003,37(7):3 -6.