朝藿定C的NMR数据解析

张海艳，康建勋，董建军，赵天增，吴鸣建

(1.河南省科学院天然产物重点实验室，河南郑州450002;2.郑州大学化学系化学分子工程学院，河南郑州450001;3.郑州大学化工与能源学院，河南郑州450001)

0 引言

朝藿定C(Epimedin C)为8-异戊烯基黄酮醇苷类化合物，具有很好的心血管保护和抗骨质疏松药理活性［1］.迄今已从小檗科淫羊藿属植物Epimedium koreanum［2］，Epimedium sagittatum［3］，Epimedium diphyllum［4］，Epimedium sutchuenense［5］，Epimedium wanshanense［6］，Epimedium brevico-rnum［7］，川鄂淫羊藿［8］，Epimedium hunanense［9］，粗毛淫羊藿［10］，黔岭淫羊藿［11］中，均发现该化合物的存在.其 δH、JHH、δC数据已有报道［2，11］，但其归属详细解析过程和数据未见报道，且糖单元1HNMR数据很不充分.

笔者对其进行了1H和13C NMR测定，并通过DEPT和1H-1H COSY、HSQC、HMBC等 2D NMR技术对其所有的1H和13C NMR信号进行了全归属和详细解析，着重指出了异戊烯基和糖单元的NMR数据特征.

1 实验部分

所有NMR实验均在Bruker DPX 400型核磁共振仪上进行.1H NMR的工作频率为400 MHz，13C NMR 的工作频率为 100.577 MHz，以DMSO-d6为溶剂.

质谱ESI-MS用Waters Micromass公司Q-Tof MicroTM型高分辨质谱仪测定.

图1 朝藿定C的结构Fig.1 The structure of Epimedin C

2 结果与讨论

试样为黄色粉末.用高分辨质谱(HRESIMS)确定其分子式为C39H50O19(m/z=823.3053［M+H］+，calcd.for C39H51O19823.3022;m/z 845.2844［M+Na］+，calcd.for C39H50O19Na 845.2841).

朝藿定C的1HNMR中，δH6.66(1H，s)为黄酮苷元A环C-6位质子信号，7.91(2H，d，J=8.8 Hz)，7.14(2H，d，J=8.8 Hz)分别为 C 环 AA'BB'自旋系统中 C-2'，6'和 C-3'，5'位的质子信号，3.87(1H，s)为C环C-4'位甲氧基质子信号，1.62(3H，s)，1.70(3H，s)，3.51(1H，dd)，3.59(1H，dd)，5.18(1H，t，J=6.7 Hz)为异戊烯基上的甲基、亚甲基和烯基质子信号，12.64(1H，s)为OH-5 的质子信号.δH0.83(3H，d，J=5.2 Hz)，1.12(3H，J=6.0 Hz)分别为2个鼠李糖的6位甲基质子信号，5.40(1H，d，J=1.0 Hz)，4.90(1H，brs)分别为2个鼠李糖的端位质子信号;δH5.02(1H，d，J=7.1Hz)为葡萄糖的端位质子信号;显示朝藿定C含有3个糖单元.

朝藿定C的13C NMR数据显示39个碳信号.DEPT显示5个甲基碳信号、2个亚甲基碳信号;21个叔碳信号;11个季碳信号.其中，δC55.4为C 环4'位甲氧基碳信号，25.4，17.8，21.3，122.1，131.0分别为异戊烯基上14、15位甲基碳、11位亚甲基和12、13位双键碳信号;159.0，160.5，108.3，152.9，105.5 分别为 A 环 5，6，7，8，9 和 10位苯环碳信号，130.5×2，114.0 ×2，161.4分别为C 环 1'，2'和 6'，3'和 5'，4'位苯环碳信号，178.1为B环 C-4羰基信号，157.2，134.5为 B环 C-2、C-3信号.δC17.4和17.5为2个鼠李糖的甲基碳信号;δC60.5为葡萄糖的6位亚甲基碳信号;δC100.4、100.6、101.5分别为葡萄糖和2 个鼠李糖的端位碳信号;68.7至77.1共有12条碳峰，为1个葡萄糖和2个鼠李糖的其它糖信号，显示朝藿定C含有3个糖单元，与氢谱结论一致.

朝藿定C的甲基碳和甲基氢归属不易区分，其归属区分如下［12］:处于双键顺式的C-15与C-11之间的γ-效应较强，导致C-15的δC值相对较低;处于双键反式的C-14与C-11之间的γ-效应较低，导致C-14的δC值相对较高.H-14和H-15的区分则基于上述结果通过HMBC［20］确定.HMBC显示C-8与H-11a、H-11b相关，同时由于C-8与 H-14、H-15 形成高丙烯体系［17］，C-8 也与 H-14、H-15相关，从而证明了异戊烯基的连接位置.

朝藿定C具有1个葡萄糖和2个鼠李糖，其NMR数据解析主要应是如何区分3个糖的NMR数据归属.具体分析如下:

HMBC显示 δC134.5(C-3)与 δH5.40相关，证明 δH5.40 归属 H-1″，HSQC 显示 δC100.6 与 δH5.40(1H，d，J=1.0 Hz)相关，证明 δC100.6 归属C-1″.1H-1H COSY 显示 δH5.40(H-1″)与 4.14 相关，证明 δH4.14归属H-2″;HSQC 显示 δC75.5与δH4.14相关，证明 δC75.5归属 C-2″;HMBC 显示δC75.5与 δH4.99相关，证明 δH4.99归属 OH-3″;1H-1H COSY显示δH4.99与3.62相关，证明δH3.62 归属 H-3″，δH3.62 与 3.16 相关，证明 δH3.16归属H-4″.与淫羊藿苷1H NMR数据相比，δH0.83应归属鼠李糖 H-6″，1H-1H COSY显示 δH0.83与3.16相关，证明H-5″的化学位移为3.16.至此，C-3位鼠李糖的1H NMR数据全部得到归属，再通过 HSQC 数据，δC70.0/δH3.62，71.3/3.16，70.6/3.16，17.4/0.83，其13C NMR 数据也可得到全部归属.

HMBC 显示 δC101.5 与 δH4.14(H-2″)、4.71(OH-2‴)相关，证明 δC101.5 归属 C-1‴，同时证明2个鼠李糖相连且为1→2相连.HSQC显示δC101.5 与 δH4.90(1H，brs)相关，证明 δH4.90归属 H-1‴.1H-1H COSY 显示 δH4.71(OH-2‴)与3.70相关，证明 δH3.70 归属 H-2‴.δH3.70 与3.38相关，δH3.38与3.20相关，证明 δH3.38与3.20分别归属 H-3‴和 H-4‴.由于 δH0.83归属H-6″，所以δH1.12应归属另1个鼠李糖的6位甲基H-6‴，1H-1H COSY显示δH1.12与3.38相关，证明H-5‴的化学位移为3.38.至此，另1个鼠李糖的1H NMR数据全部得到归属，再通过HSQC数据，δC70.2/δH3.70，70.4/3.38，69.6/3.20，68.7/3.38，17.5/1.12，其13C NMR数据也可得到全部归属.

HSQC 显示 δC100.4 与 δH5.02(H-1″″) 相关，HMBC 显示 δC160.5(C-7)与 δH5.02相关，说明 δH5.02 归属 H-1″″，δC100.4 归属 C-1″″，同时说明1个葡萄糖连在C-7位.1H-1H COSY显示δH5.02(H-1″″)与 3.33 相关，证明 δH3.33 归属 H-2″″，由于 δH3.33 含有 2 个氢，表明 δH3.33 还归属另一氢.HSQC显示δC60.5与δH3.47，3.74相关，表明 δH3.47，3.74 归属 H-6″″.1H-1HCOSY 显示δH3.43与3.74、3.20相关，3.20又与3.33相关，证明 3.43 归属 H-5″″，3.20 归属 H-4″″，3.33的另一个氢归属H-3″″.至此，与C-7相连的葡萄糖的1H NMR数据全部得到归属，再通过HSQC数据，δC73.3/δH3.33，76.5/3.33，71.8/3.20，77.7/3.43，参照淫羊藿苷［17］数据，其13CNMR 数据也可得到全部归属.

朝藿定 C的1H、13C NMR数据解析结果见表1.

表1 朝藿定C的1H NMR，13C NMR，HSQC，1H-1H COSY和HMBC数据 (DMSO-d6，δ)Tab.1 1H NMR，13C NMR，HSQC，1H-1H COSY 和 HMBC data of Epimedin C in DMSO-d6

续表1

3 结论

笔者联合运用1H、13C NMR、DEPT一维NMR技术和1H-1H COSY、HSQC、HMBC二维 NMR技术对朝藿定C所有的1H和13C NMR数据进行详细解析和全归属，为该类化合物异戊烯基和糖单元的结构鉴定提供了可靠的解析方法.

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