液基细胞学检查联合HPV-DNA检测筛查宫颈病变的临床价值

栾金倩 张 玲 浙江省台州市中心医院妇产科 台州 318000

液基细胞学检查联合HPV-DNA检测筛查宫颈病变的临床价值

栾金倩 张 玲 浙江省台州市中心医院妇产科 台州 318000

宫颈癌 LCT HPV-DNA CIN 临床价值

宫颈癌在妇女恶性肿瘤的发病率中仅次于乳腺癌，对宫颈癌发病机制的深入研究发现，宫颈癌的发生发展需要经历一个相对缓慢的过程，即癌前病变到宫颈癌这一过程，如何早期发现癌前病变及宫颈癌已成为降低发病率和提高治愈率的关键。人乳头状病毒（human papillomavirus，HPV）感染被认为是宫颈病变及宫颈癌发生的必要因素[1]。HPV检测已成为宫颈癌及癌前病变一种重要的筛查手段。宫颈液基细胞学检测（liquid-based cylologic test，LCT）与传统细胞学检测相比，提高了细胞学筛查的灵敏度。本研究以病理诊断为金标准，观察LCT联合HPV-DNA检测对宫颈癌及癌前病变筛查的应用价值，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2011年1月—2012年5月我院妇科门诊就诊需进行宫颈病变筛查的患者2 290例，排除无性生活史、妊娠期、月经期，24h内有性生活及3天内有阴道上药或阴道冲洗者。随机选取2 290例患者，按照既往所行各检查方法实际人数比例分组，其中LCT组1 200例，年龄20～55岁，平均33.6岁；HPV-DNA检测组700例，年龄22～56岁，平均32.0岁；LCT+HPV-DNA检测组390例，年龄20～51岁，平均30.9岁；三组年龄分布组间差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 研究方法

1.2.1 宫颈液基细胞学检测（LCT） 充分暴露宫颈，用棉签轻拭分泌物后，将Rovers毛刷中央部分深插入子宫颈管，使其充分接触宫颈，按同一方向转动毛刷5周以上，取下刷头放入保存瓶内，拧紧送检。采用美国liquid-protest系统进行检测，按照TBS分类系统对宫颈病变诊断，以意义未明的不典型鳞状细胞（atypical squamous cells of undermined significance，ASCUS）及以上病变为阳性指标。

1.2.2 HPV-DNA检测 充分暴露宫颈，采用HPV检测专用毛刷深入宫颈内按同一时针方向转动毛刷5周以上，停留10s后连毛刷全部浸入样本管中，盖好瓶盖送检。采用第二代基因杂交捕获法（Hybrid CaptureII，HCⅡ），HCⅡ≥1.0pg/mL 为阳性诊断标准。

1.2.3 阴道镜下宫颈组织活检 在阴道镜下观察宫颈移行上皮及血管，在醋酸白实验、碘试验阳性部位取宫颈组织活检，1%甲醛溶液固定，采用Olympus公司阴道镜数字成像系统进行病理学检查。

1.3 统计学方法 采用χ2检验。

2 结果

LCT组1 200例中宫颈病变阳性196例，经阴道镜下活检病理学诊断证实为CIN及宫颈癌145例，敏感度为74.0%，特异度为95.2%；HPV-DNA组700例中HPV-DNA阳性204例，经阴道镜下活检病理学诊断证实为CIN及宫颈癌171例，敏感度为89.1%，特异度为93.5%；HPV-DNA检测对宫颈病变筛查的敏感性高于LCT（P＜0.05）；但两组特异度差异无统计学意义（P＞0.05）。LCT+HPV-DNA 检测组 390例中HPV-DNA阳性156例，经阴道镜下活检病理学诊断证实为CIN及宫颈癌140例，敏感度为99.29%，特异度93.57%，显著高于LCT组和HPVDNA 组（P 均＜0.05），见表 1。

表1 三种方法筛查宫颈病变病理学结果比较 例

3 讨论

1974年Zur首次提出HPV感染与宫颈肿瘤的密切关系。近20年学者们对HPV感染与宫颈病变关系的认识逐渐一致：HPV感染是宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）及宫颈癌发生的必要因素[2-3]。HPV分为低危型和高危型，低危型HPV（如 HPV6、11、42、43、44）一般不诱发癌变，其主要引起肛门皮肤及男性外生殖器、女性阴唇及阴道下段外生性疣和低级别宫颈上皮内瘤变。而高危型HPV（如 HPV16、18、33、39 等）除能引起上述外生性疣外，更可导致高级宫颈上皮内瘤变，甚至宫颈癌或外生殖器癌。因此，HPV-DNA的检测对宫颈病变的预测具有十分重要的意义。

目前临床上已使用第二代基因杂交捕获HCII技术检测HPV，具有高度敏感性和特异性，阴性预测值更高达99%。但HPV-DNA技术对于低级别宫颈病变存在一定的假阴性率。Mark等[4]通过对病理诊断为宫颈病变者进行HPV-DNA检测，有33.8%的HPV-DNA阴性患者存在低级别或显微镜下病变。因此在筛查低级别宫颈病变方面，单独HPV-DNA检测可能导致诊断的遗漏。

LCT是基于巴氏涂片法基础上发展起来的一项宫颈病变筛查技术。与传统巴氏涂片法比较，LCT不仅改善了样本的收集率，而且使细胞均匀分布在玻片上，提高标本质量，缩短检查时间，更减少了细胞病理学专家因视力疲劳等人为因素所造成的阅片误差，提高阳性诊断率，其敏感性及特异性达89.4%及96.91%[5]。因此，LCT在宫颈癌及癌前病变筛查中突显出的高效性，使其成为CIN及早期宫颈癌的重要筛查手段，近年来这一技术正在被广泛推广和应用。但国内学者发现，LCT与病理组织学在低度宫颈病变中符合率低，存在的一定的假阴性率[6]。

本研究将LCT与HPV-DNA检测方法结合在一起，以两项中有一项异常发现，即定为阳性标准，再以阴道镜检测为金标准，以检验该方法在敏感性及特异性的方面是否优于单独某项检测方法。结果表明，将LCT与HPV-DNA检测方法结合在宫颈病变检出的敏感性方面均优于单独应用其中一项方法。此结果也与李颖等[7]研究结果相似。临床上将LCT及HPV-DNA技术相互结合，能够提高筛查的特异性，对预测宫颈病变的发展趋势，积极有效预防宫颈癌的发生，以及早期及时治疗宫颈癌均有积极作用。

［1］Snijders PJ，Heideman DA，Meijer CJ.Methods for HPV detection in exfoliated cell and tissue specimens［J］.APMIS，2010，118（6-7）：520-528.

［2］Schiffman MH，Bauer HM，Hoover RN，et al.Epidemilolgic evidence showing that Human Papillomavirus infection causes most cervical intraepithelial neoplasia［J］.Natl Cancer Inst，1993，85（6）：958-964.

［3］郎景和.接子宫颈癌预防的全球挑战与机遇［J］.中华妇产科杂志，2002，37（2）：129-131.

［4］Mark S，Rolando H，Allan H，et al.HPV DNA Testing in Cervical Cancer Screening-Results From Women in a High-Risk Province of Costa Rica［J］.JAMA，2000，283（1）：87-93.

［5］Li LY，Qiao ZQ，Zhang MF，et al.Study on the value assessment of various screening programs regarding cervical cancer screening strategy in the rural areas of China［J］.Zhonghua Liu Xing Bing Xue Za Zhi，2007，28（10）：964-967.

［6］杨怡卓，李亚里，徐滨，等.TCT在宫颈病变筛查中的临床价值及不足［J］.中华妇产科临床杂志，2008，9（2）：87-89.

［7］李颖，王树玉.TCT联合液态基因芯片法HPV检测对宫颈病变的筛查效果评价［J］.中国优生与遗传杂志，2011，19（10）：33-34.

浙江省台州市科技项目（No.111KY07-8）

2013-06-23