夏枯草香附水煎剂对行为绝望抑郁模型小鼠抗抑郁作用研究

胡静娜 浙江省宁波市鄞州第二医院药剂科 宁波 315100

（浙江中医药大学在职研究生）

夏枯草香附水煎剂对行为绝望抑郁模型小鼠抗抑郁作用研究

胡静娜 浙江省宁波市鄞州第二医院药剂科 宁波 315100

（浙江中医药大学在职研究生）

目的：观察夏枯草香附水煎剂（SP-CR-W）的抗抑郁作用。方法：清洁级ICR小鼠50只，随机分空白对照组、盐酸氯米帕明组、夏枯草香附水煎剂高、中、低剂量（1.288、0.644、0.322g/kg）组，每组10只，分别予相应药物灌胃，10天。通过小鼠自主活动、小鼠悬尾实验（TST）、小鼠强迫游泳实验（FST）和利血平拮抗实验，评价夏枯草香附水煎剂的抗抑郁效果。结果：夏枯草香附水煎剂高、中剂量（1.288、0.644g/kg）均能显著缩短小鼠在 TST及 FST的不动时间（P＜0.05或 P＜0.01)，对小鼠自主活动均无显著影响（P＞0.05）。夏枯草香附水煎剂各剂量组均能拮抗利血平注射后1h所致的小鼠降温作用，减少小鼠眼睑下垂数及呆在圈内的动物数。结论：夏枯草香附水煎剂可以改善小鼠抑郁行为，具有抗抑郁作用，且无中枢兴奋性作用。

小鼠 行为绝望抑郁模型 夏枯草香附水煎剂 悬尾实验 强迫游泳实验 利血平拮抗实验

抑郁症是一种临床综合征，属于中医“郁证”范畴。根据《中医内科学》对郁证证候的分类，肝郁是其常见证型[1]。文献记载夏枯草和香附组成的补肝散具有行气泻火、清肝明目的功效，主治肝郁火盛证候[2]。本实验通过小鼠自主活动、小鼠悬尾实验（tail suspension test，TST）、小鼠强迫游泳实验（forced swimming test，FST）和利血平拮抗实验观察夏枯草香附水煎剂抗抑郁作用，现报道如下。

1 实验材料

1.1 实验动物 清洁级ICR小鼠50只，雌雄各半，体质量18～22g，浙江中医药大学实验动物中心提供，合格证号：SYXK（浙）2003-003。给小鼠自然昼夜节律光照，自由饮水、摄食，适应性喂养5天后进行实验。

1.2 主要仪器 YLS-1A多功能小鼠自主活动记录仪，山东医学科学院设备供应维修站产品；悬尾实验箱，自制，40cm×40cm×50cm；游泳塑料桶，高 50cm，直径30cm。

1.3 实验药物 夏枯草、香附药材购于浙江省宁波市鄞州第二医院中药房，按1:2煎煮并浓缩成质量浓度分别为1.288、0.644、0.322g/mL的水煎剂；盐酸氯米帕明片（阳性药），北京诺华制药有限公司产品，批号X0045。

2 实验方法

2.1 分组及给药 将50只ICR小鼠随机分成空白对照组、盐酸氯米帕明组、夏枯草香附水煎剂（SPCR-W）高、中、低剂量组，每组10只。分别予生理盐水10mL/kg、盐酸氯米帕明20mg/kg和夏枯草香附水煎剂 1.288g/kg、0.644g/kg、0.322g/kg灌胃，1 天 1 次，连续10天。

2.2 小鼠自主活动实验[3]小鼠第9天灌胃给药后1h，将小鼠放入自主活动记录仪中，适应2min后，记录5min内小鼠活动次数。

2.3 小鼠悬尾实验（TST）[3]小鼠末次灌胃给药后1h，用黏膏条将小鼠尾端1cm处固定于水平金属棒上，使小鼠呈倒挂状态，离底部15cm，适应2min后，记录4min内小鼠的不动时间。

2.4 强迫小鼠游泳实验（FST）[3]小鼠第9天灌胃给药后1h，将小鼠轻放入高50cm、直径30cm的桶中，桶中水深 16cm，水温（25±1）℃，适应 2min后，测小鼠5min内不动状态(即小鼠在水中停止挣扎，或小鼠呈漂浮状态，仅有细小的肢体运动以保持头部浮在水面)的时间。

2.5 利血平拮抗实验[4]第10天灌胃给药后1h后，测定小鼠基础体温。每组小鼠均腹腔注射利血平2.5mg/kg，观察：①分别在1h、3h后，将温度计探头放置在肛门内2cm处，测定小鼠肛温。②给药后1h，将动物放置在支架上观察15s，比较给药组和利血平对照组（原空白对照组）中眼睑关闭1/2以上的动物数。③将动物放置在7.5cm直径的圆形内，观察15s后呆在圈内的动物数。

2.6 统计学方法 应用SPSS13.0统计软件，数据以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用单因素方差分析。

3 实验结果

3.1 对小鼠自主活动的影响 夏枯草香附水煎剂高、中、低剂量和盐酸氯米帕明对小鼠自主活动无明显影响，与空白对照组比较，差异无统计意义（P＞0.05），见表 1。

3.2 对小鼠悬尾不动时间的影响 与空白对照组比较，夏枯草香附水煎剂高、中剂量和盐酸氯米帕明能显著缩短小鼠悬尾不动时间（P＜0.05或 P＜0.01），见表1。

3.3 对小鼠强迫游泳不动时间的影响 与空白对照组比较，夏枯草香附水煎剂高、中剂量组和盐酸氯米帕明均能显著缩短小鼠游泳不动时间（P＜0.05或P＜0.01），见表 1。

表1 夏枯草香附水煎剂对小鼠自主活动、悬尾及强迫游泳的影响（±s）

表1 夏枯草香附水煎剂对小鼠自主活动、悬尾及强迫游泳的影响（±s）

注：与空白对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

组 别空白对照组盐酸氯米帕明组夏枯草香附水煎剂高剂量组夏枯草香附水煎剂中剂量组夏枯草香附水煎剂低剂量组n/只10 10 10 10 10剂量/（g/kg）-0.02 1.288 0.644 0.322自主活动次数/s 119.10±20.77 128.00±17.02 127.40±17.24 123.60±12.38 130.00±19.96悬尾不动时间/s 135.50±31.54 87.80±29.68**96.6±28.40**101.4±32.11*119.2±45.96游泳不动时间/s 153.10±60.60 54.44±8.80**64.70±33.95**86.3±68.04*126.90±67.96

3.4 对利血平拮抗实验小鼠体温、眼睑下垂、运动不能的影响 与利血平对照组比较，夏枯草香附水煎剂高、中、低剂量和盐酸氯米帕明能显著拮抗利血平所致小鼠体温下降，也能减少小鼠眼睑下垂率，增加出圈率（P＜0.05 或 P＜0.01）。见表 2～3。

表2 夏枯草香附水煎剂对利血平实验小鼠体温的影响（±s）

表2 夏枯草香附水煎剂对利血平实验小鼠体温的影响（±s）

注：与利血平对照组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01

组 别利血平对照组盐酸氯米帕明组夏枯草香附水煎剂高剂量组夏枯草香附水煎剂中剂量组夏枯草香附水煎剂低剂量组n/只10 10 10 10 10剂量/（g/kg）-0.02 1.288 0.644 0.322基础体温/℃36.95±0.31 37.01±0.246 37.10±0.34 36.90±0.27 37.26±0.57 1h 体温/℃34.84±0.59 36.29±0.62△△35.55±0.44△35.43±0.37△35.64±0.65△3h 体温/℃32.25±1.31 34.43±0.69△△33.79±0.94△△34.17±1.20△△33.16±0.75△

表3 夏枯草香附水煎剂对利血平实验小鼠眼睑下垂率、出圈率的影响（±s）

表3 夏枯草香附水煎剂对利血平实验小鼠眼睑下垂率、出圈率的影响（±s）

注：与利血平对照组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01

组 别利血平对照组盐酸氯米帕明组夏枯草香附水煎剂高剂量组夏枯草香附水煎剂中剂量组夏枯草香附水煎剂低剂量组n/只10 10 10剂量/（g/kg）-0.02 1.288眼睑下垂率/%100 20△△50△出圈率/%0 80△30△100.64450△40△100.3228020

4 讨论

《肘后备急方·卷六·治目赤痛暗昧刺痛诸病方第四十三》中记载：“《简要济众》，治肝虚，目睛疼，冷泪不止，筋脉痛，及眼羞明怕日，补肝散。夏枯草半两，香附一两，共为末，每服一钱，腊茶，调下无时。”刘家骅编著的《药对》中记载，夏枯草和香附组成的补肝散具有行气泻火、清肝明目的功效，主治肝郁火盛证候[2]。

小鼠悬尾实验（TST）和强迫游泳实验（FST0作为行为绝望抑郁模型是经典的抗抑郁药筛选、评价模型，具有简单、快捷、敏感等特点[5]。本组结果显示，夏枯草-香附水煎剂高、中剂量均能显著缩短小鼠在TST及 FST的不动时间（P＜0.05或 P＜0.01)。小鼠自主活动实验可初步排除药物对中枢神经系统的兴奋作用而造成的假阳性结果的可能[6]，确定该药抗抑郁作用的可靠性。本组结果显示，夏枯草香附水煎剂高、中、低剂量对小鼠自主活动均无明显影响。利血平拮抗实验反映了药物对单胺能神经系统的兴奋作用[7]，本实验显示，夏枯草香附水煎剂高、中剂量、低剂量均能拮抗利血平所致体温下降、眼睑下垂、运动不能等现象，但是夏枯草香附水煎剂中剂量作用优于高剂量，其原因有待进一步考证。

本实验研究表明，《肘后备急方》中由夏枯草和香附两位药组成的补肝散，具有明显的抗抑郁作用，且无中枢兴奋作用，为本方进一步扩展在中医临床中的应用提供了实验依据，但其抗抑郁机制有待进一步研究。

［1］周仲瑛.中医内科学［M］.第2版.北京：人民卫生出版社，2010：373-378.

［2］刘家骅.药对［M］.北京：人民卫生出版社，2009：347.

［3］李仪奎.中药药理实验方法学［M］.第2版.上海：上海科学技术出版社，2006：219.

［4］畅洪昇，梁吉春，石任兵，等.枳术宽中胶囊对抑郁动物模型的抗抑郁作用研究［J］.北京中医药大学学报，2009，32（10）：690-694.

［5］张崇燕，唐永鑫，曾南，等.逍遥散及其组方对行为绝望抑郁模型小鼠的影响［J］.成都中医药大学学报，2009，32（2）：51-53.

［6］陈忠新，李强，闫丽莉，等.刺五加浸膏抗抑郁作用的实验研究［J］.黑龙江科技论坛，2011，（13）：48.

［7］Askew BM.A simple screening producer for imipram inelike antidepressant drugs［J］.Life Sci，1963，2：725-730.

Antidepressant Effect of the Water Extract Isolated from Spica Prunella and Cyperus Rotundus L.on Depression in Mice

HU Jingna.Ningbo Yinzhou No.2 Hospital，Ningbo(315100)，China

Objective：To study the antidepressant effect of Spica prunellae and Cyperus rotundus L.-water mixture（SP-CR-W） on depression mice.Methods：Fifty ICR mice were randomly divided into 5 groups as follows:blank control group，positive control group，and SP-CR-W groups（1.288，0.644，0.322 g·kg-1）.All groups were administered intragastrically for 7 days.The tests of spontaneous motion，tail suspension（TST），forced swimming（FST） and antagonism of reserpine in mice were carried out to observe the antidepressant effect of SP-CR-W.ResultsSP-CR-W（1.288 and 0.644 g·kg-1）significantly shortened the dead time of tail suspension and forced swimming in mice （P<0.05 orP<0.01）while it had no effect on spontaneous motion.SP-CR-W in different doses resisted the descent of body temperature and reduced the numbers of the drooping eyelids and staying inside the circle induced by the injection of reserpine after 1 hour.ConclusionSP-CR-W has antidepressant effect and can relieve the depressant behaviors of mice.

mice animal model of depression Spica prunellae and Cyperus rotundus-water mixture tail suspension forced swimming testantagonism of reserpine

2013-06-03

2013-06-26