QueCHERS法检测毛豆中苯醚甲环唑的残留量

毛久浪，王 珏，毛晨蕾，吴慧明

(浙江农林大学农业与食品科学学院，浙江临安 311300)

苯醚甲环唑 (difenoconazole)，化学名为顺，反-3-氯-4-［4-甲 基-2-(1H-1，2，4-三 唑-1-基 甲基)-1，3-二哑戊烷-2-基］苯基4-氯苯基醚，结构如图1所示［1－2］。属于三唑类内吸性杀菌剂，主要抑制麦角甾醇的生物合成，破坏细胞膜的结构与功能［3］。多用于防治豆类、小麦、马铃薯、瓜果类、果树等作物的真菌病害。

图1 苯醚甲环唑结构式

近年来，因出口毛豆中苯醚甲环唑残留超标引发的外贸退赔问题时有发生，而商品毛豆中苯醚甲环唑残留的检测方法和相关标准未见报道。已报道的苯醚甲环唑残留检测方法多数是关于土壤和水体的［4－6］，或农产品中残留的快速检测［7］。

QuEChERS是近年使用的1种农药残留快速检测方法，适用于各种分子结构和极性农药残留的提取净化，具有提高分析速度、减少试剂用量、适于自动化分析，且灵敏、简便、快速、高效等的独特优势［8］。运用QueCHERS法检测苯醚甲环唑也有相关报道，但与气相色谱-质谱的联用［9－10］，使成本升高和普及性下降。因此，结合QuEChERS前处理的方法，优化仪器检测条件，旨在通过建立普通GC-ECD法，快速准确检测毛豆样品中苯醚甲环唑的残留量。

1 材料与方法

1.1 材料

采自杭州、临安、宁波、诸暨4个产地的68批次毛豆产品。

1.2 仪器与试剂

岛津GC2010气相色谱仪 (ECD检测器)带自动进样器，色谱柱 HP-1(30 m×0.32 mm×0.25 μm)，食品加工机 (4184，博朗电器)，高速匀浆机 (T25D，IKA)，TDL-5-A离心机 (上海飞鸽公司)，高速冷冻离心机 (R21，热点)。

丙酮、乙酸乙酯、乙腈、氯化钠和硫酸镁均为市售化学纯试剂;N-丙基乙二胺 (PSA，上海月旭)，苯醚甲环唑标准品 (≥98%，上海振翔)

1.3 样品处理

1.3.1 样品预处理

将待检测的毛豆或带荚毛豆样品与纯水按质量比1∶1混匀后，在食品加工机中匀浆混匀，取200 g混合物，待测。

1.3.2 样品前处理

称取匀浆后的样品10 g，置于50 mL离心管内，加入10 mL乙腈，剧烈振荡1 min，加入1 g氯化钠和4 g硫酸镁，剧烈振荡1 min。3 000 r·min－1离心3 min，取1.5 mL上清液于装有50 mg PSA和250 mg硫酸镁的2 mL离心管中，剧烈振荡1 min，4 ℃10 000 r·min－1离心1 min，取1 mL 上清液至试管，N2吹干后用1 mL乙酸乙酯溶解残留物，待测。

1.4 仪器条件

色谱柱:Agilent HP-1石英毛细管柱 (30 m×0.32 mm×0.25 μm);载气:高纯N2(≥99.999%);进样口280℃，检测器290℃，柱箱初始温度160℃，以20℃·min－1升到255℃，保持6 min，再以50℃·min－1升到270℃保持6 min;每分钟柱流量5 mL，尾吹30 mL，不分流进样1 μL。在上述仪器条件下，苯醚甲环唑的保留时间为9.8 min。

1.5 添加回收方法

称取空白对照样品10 g，分别添加适量的苯醚甲环唑标准溶液，将样品中浓度设为0.001，0.010和0.100 mg·kg－1，每浓度重复5次，按1.3.2节方法测定苯醚甲环唑残留量，并计算添加回收率。

2 结果与分析

2.1 标准曲线与线性相关性

准确称取10 mg苯醚甲环唑标准品于10 mL容量瓶中，用丙酮溶解并定容至刻度。用乙酸乙酯分别稀释为0.001，0.005，0.010，0.050 和 0.100 mg·kg－1的标准溶液，并在上述仪器条件下进样检测，以进样浓度为横坐标，ECD响应值为纵坐标，绘制标准曲线 (图2)。苯醚甲环唑的回归方程为y=3 229x－0.366 2，相关系数r=0.999。

图2 苯醚甲环唑标准曲线

2.2 方法的精确度与精密度

在上述样品处理方法和仪器条件下，苯醚甲环唑的最低检测浓度为0.001 mg·kg－1。当添加浓度为0.001，0.010和0.100 mg·kg－1时，按上述方法和步骤进行检测。毛豆仁和带荚毛豆的平均添加回收率80.8%～95.6%和90.7%～101.9%，相对标准偏差(RSD)为1.7%～4.9%和9.3%～14.8%(表1)。苯醚甲环唑的精确度和准确度，变异系数都在《农药残留试验准则》允许范围内，说明方法符合农药残留分析与检测技术要求。

表1 苯醚甲环唑的添加回收

2.3 毛豆样品中苯醚甲环唑残留量的检测

我国暂未规定毛豆中苯醚甲环唑的最大残留限量标准 (MRL)，CAC则规定了干大豆中为0.020 mg·kg－1。将检测结果从低到高列于表2中。结果显示，在检测的68批次样品中 (20个毛豆仁样品，48个带荚毛豆)，毛豆仁中苯醚甲环唑的残留量均低于 0.020 mg·kg－1，最高为0.011 mg·kg－1(宁波4);4个毛豆仁样品中苯醚甲环唑残留量低于0.001 mg·kg－1，占20%。13个带荚毛豆样品的苯醚甲环唑残留量大于0.020 mg·kg－1，最高达到0.126 mg·kg－1，超标率达27.1%。

试验结果显示，杭州、临安、宁波、诸暨4产地毛豆仁中苯醚甲环唑的残留量都较小，只有宁波的1个样品超出0.010 mg·kg－1，但低于MRL值。毛豆仁中平均残留量以宁波略高，达0.005 mg·kg－1，杭州最小，为0.003 mg·kg－1。带荚毛豆中苯醚甲环唑的残留量明显高于毛豆仁，杭州、临安、宁波、诸暨4地的超标率分别为25%，25%，33%，25%，未检出率分别为16.7%，25.0%，8.3%和16.7%;宁波和诸暨平均残留量分别为0.023 和0.022 mg·kg－1，高于 MRL。

3 小结与讨论

试验结果表明，用QueCHERS和GC-ECD法可快速检测毛豆样品中苯醚甲环唑的残留量。对68个不同产地的毛豆仁和带荚毛豆检测结果显示，不同地区因耕作制度、用药习惯、气候条件等的差异，苯醚甲环唑在毛豆上的残留量有一定差异。在诸暨和宁波，带荚毛豆中的残留量较高，12批次样品的均值大于0.020 mg·kg－1;同时，带荚毛豆残留的苯醚甲环唑明显高于毛豆仁。前者各地均值0.013～0.023 mg·kg－1，毛豆仁则为 0.003 ～0.005 mg·kg－1，仅为带荚时的18% ～31%。由此表明，去荚可有效去除残留于豆荚上残留的苯醚甲环唑，降低食用毛豆时暴露于苯醚甲环唑的风险。

表2 毛豆和带荚毛豆中苯醚甲环唑的残留量

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［2］李海华，廖福广，王鹏，等．杀菌剂苯醚甲环唑的制备［J］．北京理工大学学报，2006，26(4):365－368．

［3］Khan M F R，Smith L J．Evaluating fungicides for controlling Cerosporaleaf spoton sugar beet［J］．Crop Prot，2005，24:79－86．

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［6］冯雪玲，纪然，曹维良，等．气相色谱法测定水和土壤中苯醚甲环唑的残留量［J］．化工环保，2007，27(1):93－96．

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