液相色谱同测食品中防腐剂与甜味剂方法研究

李琳

（天津市食品研究所有限公司，天津 301609）

液相色谱同测食品中防腐剂与甜味剂方法研究

李琳

（天津市食品研究所有限公司，天津 301609）

摘 要：采用反相高效液相色潽法，对色谱条件进行调整，实现安赛蜜、糖精钠、山梨酸、苯甲酸、脱氢乙酸5项物质同测。试验结果表明，该方法定量准确、精密度高，且节约时间成本。

关键词：反相高效液相色谱；安赛蜜；糖精钠；山梨酸；苯甲酸；脱氢乙酸

GB 2760《食品添加剂使用卫生标准》中对安赛蜜[1]、糖精钠、山梨酸、苯甲酸、脱氢乙酸最高限量都做了相关规定，并且这5项添加剂被广泛的应用于食品中。虽然国家标准中对这5项都有分别的或者部分同测的检验方法[2]，但同时测定这5项添加剂的检验方法目前并未出现。为了适应大批量样品的快速检测，现对这5项添加剂同测进行研究。

1 材料与方法

1.1 试剂和材料

乙酸铵（色谱纯）、甲醇（色谱纯）、冰乙酸（分析纯）、乙酸锌（分析纯）、亚铁氰化钾（分析纯）、氢氧化钠（分析纯）、脱氢乙酸（色谱纯）、纯水、苯甲酸标准溶液[GBW（E）100006]、安赛蜜标准溶液[GBW（E）100171]、山梨酸标准溶液[GBW（E）100007]、糖精钠标准溶液[GBW（E）100008]以上液体标物均购自国家标物中心，浓度均为1.00 mg/mL。

1.2 仪器和设备

AEG220G型电子分析天平：日本岛津公司；e2695型高效液相色谱：沃特世科技（上海）有限公司；UPTII-60L型超纯水机：成都优普电子有限公司；A10纯水机：MILLIPORE公司；AS10200AT超声波洗涤仪。

1.3 色谱参数和条件

色谱柱：Thermo BDS HYPERSIL C18，250×4.6 mm，5 μm；流动相 A：0.02 mol/L 乙酸铵溶液，流动相 B：甲醇；流速：1.0 mL/min；进样量：10 μL；柱温：22 ℃；紫外波长扫描范围190 nm～400 nm。

1.4 标准储备液的配制

根据国标方法GB/T 23377-2009《食品中脱氢乙酸的测定高效液相色谱法》[3]，准确称取0.100 g脱氢乙酸标准样品，用10 mL20 g/L氢氧化钠溶液溶解，用水定容至100 mL，配制成1.00 mg/mL标准储备液，4℃下，可使用3个月。

1.5 标准系列溶液的配制

分别吸取5中添加剂的标准溶液和标准储备液各5 mL，用水稀释至50 mL，成为5种标准物质各为0.100 mg/mL的混合使用液。综合各文献[4-6]，分别吸取混合使用液，用水稀释，制成浓度分别为0.005、0.010、0.020、0.040、0.060、0.080、0.100 mg/mL 的标准溶液系列。

1.6 样品处理

含有CO2的液体需超声脱气，其他样品粉碎混匀。称取2 g～3 g样品于50 mL比色管中，加水适量充分振荡，加入亚铁氰化钾溶液和乙酸锌溶液各5 mL，混匀用水定容。浸泡20 min～30 min，取上清液经0.45 μm的滤膜后待测。

2 结果与讨论

2.1 流动相的选择

选择0.02 mol/L乙酸铵溶液和甲醇作为流动相，而两项比例的少量变化会使5种组分的保留时间发生显著的变化。国标中有乙酸铵溶液和甲醇的比例为90∶10和95∶5两种方式。乙酸铵溶液和甲醇比例90∶10的添加剂标准谱图见图1，乙酸铵溶液和甲醇比例95∶5的添加剂标准谱图见图2。

图1 5种添加剂的标准谱图（乙酸铵溶液和甲醇的比例为90∶10）Fig.1 The standard spectra of five kinds of additives（ammonium acetate solution and methanol ratio of 90∶10）

图2 5种添加剂的标准谱图（乙酸铵溶液和甲醇的比例为95∶5）Fig.2 The standard spectra of five kinds of additives（ammonium acetate solution and methanol ratio of 95∶5）

根据分离图1和分离图2表明，5种物质在流动相乙酸铵溶液和甲醇的比例为90∶10的情况下没有有效分离，而在流动相乙酸铵溶液和甲醇的比例为95∶5分离充分。

2.2 检测条件的选择

对5种添加剂在190 nm～400 nm之间进行全波长扫描，其中安赛蜜在226.5nm处，苯甲酸在224.1nm处，山梨酸在253.6 nm处，糖精钠在205.3 nm处，脱氢乙酸在230.0 nm和291.6nm处，有最大吸收波长。为兼顾各组分的灵敏度，最终选择实验波长为230 nm。

2.3 线性范围

按照在流动相乙酸铵溶液和甲醇的比例为95∶5，流速：1.0 mL/min；进样量：10 μL；柱温：22 ℃；波长为230 nm进行不同质量浓度下各组分的峰面积，以质量浓度和峰面积绘制标准曲线。各组分的相性方程，相关系数，线性范围见表1。

表1 各组分的线性范围Table 1 Linear range of each composition

从表1中可看出各组分在其线性范围内，线性关系良好。

2.4 加标回收率实验

取样品溶液分别加不同浓度标准溶液，结果5种添加剂的回收率均在95%～103%，测定结果准确可靠。

2.5 方法应用

用本文方法对市场上销售的大量样品进行测试，同时在本实验室其他厂家的仪器和使用不同厂家的色谱柱进行测试，在一般情况下均得到良好的结果，证明本方法稳定性较强。

3 结论

使用本方法可以对不同种类、不同组分的食品样品进行分析，操作简单、准确性好、稳定，可以用于日常大批量样品的检测。

：

[1]中华人民共和国卫生部,中国国家标准化管理委员会.GB/T 5009.140-2003饮料中乙酰磺胺酸钾的测定[S].北京:中国标准出版社,2003

[2]中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局,中国国家标准化管理委员会.GB/T 23495-2009食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定高效液相色谱法[S].北京:中国标准出版社,2003

[3]中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局,中国国家标准化管理委员会.GB/T 23377-2009食品中脱氢乙酸的测定高效液相色谱法[S].北京:中国标准出版社,2003

[4]李静娜,胡汉高,黄常刚,等.高效液相色谱法同时测定食品中苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、糖精钠的方法研究[J].公共卫生与预防医学,2011,22(4):91-93

[5]谢柏艳,冯光,辜华胜.高效液相色谱法同时测定食品中的苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、糖精钠[J].中国卫生检验杂志,2012,22(1):49-50

[6]曲娜,赵亚军,郭莹.高效液相色谱法同时测定食品中山梨酸、苯甲酸、糖精钠、安赛蜜的方法研究[J].中国食品添加剂,2008(5):146-148

Performance Liquid Chromatography（HPLC）with Food Preservatives and Sweetener in Measurement Method Research

LI Lin
（Institute of Tianjin Food Co.，LTD.，Tianjin 301609，China）

Abstract：By reversed phase high Performance Liquid chromatography method， adjust the chromatographic conditions，the implementation of arcelormittal honey，saccharin sodium and sorbic acid， benzoic acid， five with measurement of dehydroacetic acid.Experimental results show that this method is accurate quantitative，high precision，cost and time saving.

Key words：reverse phase high performance liquid chromatography（HPLC）；Arcelormittal honey；Sodium saccharin；Sorbic acid；Benzoic acid；Dehydroacetic acid

DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2013.13.026

李琳（1985—），女（汉），助理工程师，本科，主要从事食品检验工作。

2013-06-13