尿液S-100蛋白在新生儿缺氧缺血性脑病早期诊断中的作用

李法孟

(夏津县人民医院，山东夏津 253200)

新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)是导致新生儿死亡和儿童伤残的主要原因之一。早期诊断和评估其严重度对筛选合适患者进行早期干预极为重要。但目前的诊断方法如临床评价、头颅超声、CT或MRI、脑电图等早期诊断价值不大。血pH、乳酸及Apgar评分早期诊断HIE的特异性和敏感性均较低。近年来发现S-100蛋白在血清和脑脊液中的浓度变化可反映中枢神经系统损害的程度，已成为判断和评估脑损害的特异性指标［1］。但血液和脑脊液标本的获得有一定难度，且为有创检查，不易动态监测。S-100蛋白主要从肾脏排出，而尿液标本较易早期获得，且为无创检查，可以多次监测动态观察。2009年6月～2010年6月，我们测定尿液S-100蛋白，评价其在新生儿HIE早期诊断和严重度评价方面的临床价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2009年6月～2010年6月我院产科出生的足月窒息新生儿118例，所有窒息新生儿按照HIE的分度标准进行分别于生后12、24、36、48和72 h行临床评估。其中无HIE(无HIE组)、轻度HIE(轻度HIE组)、中重度HIE(中重度HIE组)患儿分别为24、29和65例，均符合HIE诊断和分度标准［2］。三组间胎龄、出生体质量、分娩方式、性别、血清肌酐和尿素氮水平差异均无统计学意义。选择同期住院的无窒息史和其它脑损伤(如颅内出血、脑梗塞、先天发育异常等)的52例患儿作为对照组。

1.2 标本收集 分别在出生后6 h以内、12、24、36、48和72 h留取尿液标本，不能自主排尿者通过导尿获得标本。标本获得后即刻进行离心10 min。取上清液放置－70℃冰箱冷冻保存留待监测。

1.3 尿S-100蛋白测定 采用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法，放免试剂盒购自瑞典AB sanptecmedica公司，操作由专人按其说明严格执行。

1.4 统计学方法 采用SPSS 11.0软件，所有数据以表示，多组均数比较采用one-Way ANOVA方法，结果显示有统计学意义时，再用Student-Newman-Keuls(SNK)法进行组间比较。相关性分析采用Spearman相关性分析。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 尿液S-100蛋白浓度 轻度HIE组尿液S-100蛋白浓度在各个时间点较无HIE和对照组均增高(P＜0.05);中重度HIE组S-100蛋白在各个时间点均高于无HIE组、轻度HIE组及对照组(P均＜0.01)。

2.2 尿液S-100蛋白浓度与HIE严重度相关性各时间点尿液S-100蛋白浓度与HIE严重度均呈显著正相关，＜6 h、12 h、24 h、36 h、48 h 和 72 h 相关系数 r分别为0.62、0.71、0.72、0.65、0.68、0.67，P均 ＜0.05。

3 讨论

早期诊断和评价新生儿HIE严重度具有重要的临床意义。新生儿HIE的治疗存在时间窗，即在发生第二次能量衰竭之前进行干预［3］。研究表明第二次能量衰竭发生在12 h以内，因此只有早期诊断才能进行早期干预。此外，选择合适的患者进行干预也非常重要，如低温治疗对中度HIE可能有效［3］，因此早期正确评价新生儿HIE严重度也非常重要。

表1 各组患儿各个检测时间点尿液S-100蛋白浓度()

表1 各组患儿各个检测时间点尿液S-100蛋白浓度()

注:与对照组比较，﹡ P ＜0.05;与无HIE 组比较，#P ＜0.05;与轻度 HIE 组比较，△P ＜0.01

组别 n尿液S-100蛋白浓度(μg/L)＜6 h 12 h 24 h 36 h 48 h 72 h无 HIE 组 24 0.18 ±0.11 0.19 ±0.10 0.19 ±0.09 0.26 ±0.11 0.26 ±0.15 0.30 ±0.16轻度 HIE 组 29 1.12 ±0.43﹡# 1.26 ±0.57﹡# 1.35 ±0.62﹡# 1.61 ±0.68﹡# 1.71 ±0.72﹡# 1.85 ±0.65﹡#中重度 HIE 组 65 2.01 ±1.12﹡#△ 2.38 ±1.21﹡#△ 2.27 ±1.46﹡#△ 2.25 ±1.28﹡#△ 2.67 ±1.32﹡#△ 2.83 ±2.12﹡#△对照组 52 0.14 ±0.06 0.14 ±0.08 0.21 ±0.10 0.22 ±0.10 0.27 ±0.13 0.29 ±0.11

目前新生儿HIE的诊断和评价方法包括临床和影像学检查以及脑电生理检查，但均不能敏感地早期诊断和评价其严重度。生化检查如血pH值、乳酸、血清酶学检查等并不能直接反应脑损伤的程度，且其它疾病时也可异常。

神经特异性蛋白检查在新生儿HIE诊断和评价中具有重要价值，特别是S-100蛋白。S-100蛋白是一种钙结合蛋白，由中枢神经系统星形胶质细胞合成，是组成胶质细胞的主要成分。研究表明S-100蛋白是一种可以反映脑细胞损伤程度的标记物，HIE脑损伤胶质细胞变性坏死时，S-100蛋白便从胞质中释放到CSF中，进而进入血液循环。因此脑损伤时CSF和血清中S-100蛋白浓度均增高增高。既往研究表明血清和脑脊液中S-100蛋白浓度与HIE严重度呈正相关，特别是脑脊液中浓度，可以早期诊断和评估HIE严重度，但血液或脑脊液标本获得存在一定难度且不易动态检测［4］。既往研究表明颅内出血的早产儿尿中S-100蛋白浓度增高［5］，而肾脏本身并不分泌S-100蛋白，因此尿中检测到的S-100蛋白来源于血液循环［6］，通过检测尿液中S-100蛋白浓度可以反映脑损伤的程度。

本研究发现，存在HIE的新生儿尿液S-100蛋白浓度增加，且中重度HIE患儿尿液S-100蛋白浓度高于无或轻度HIE的患儿。与其他研究结果类似，Gazzolo等［7～9］研究表明中重度HIE患儿尿液内S-100蛋白浓度显著高于轻度HIE患儿，预后不良的患儿显著高于预后良好者。由于肾脏本身不分泌S-100蛋白，因此尿液中升高的S-100蛋白浓度提示S-100蛋白来源于损伤的中枢神经系统;尿液中持续升高的S-100蛋白提示严重的脑细胞损伤。本研究结果提示中重度HIE生后6 h内尿S-100蛋白浓度已经高于无或轻度HIE患儿和对照组，且可持续72 h，提示尿液S-100蛋白测定可以作为新生儿HIE早期诊断和严重度评估的早期指标。另外S-100蛋白的半衰期很短，仅为1 h，动态检测尿液S-100浓度也可以作为评价治疗效果的指标之一，值得进一步研究。

由于中重度HIE患儿常表现为肾功能障碍，另外为了排除肾功能障碍对结果的影响，我们对肾功能进行了监测，窒息患儿血BUN和Cr与对照组没有显著差异。中重度HIE与无或轻度HIE比较也没有显著差异，因此提示尿液S-100蛋白的显著性差异反映了HIE严重度不同，并不是由于肾功能差异而导致的。

本研究表明，检测尿液S-100蛋白浓度可以早期诊断和评价新生儿HIE严重度，而尿液标本容易获得，且可动态观察，可以作为临床早期选择合适患儿进行干预的依据，在疗效评价和预后评估方面的价值值得进一步探讨。

［1］Michetti F，Gazzolo D.S-100B protein in biological fluids:a tool for perinatal medicine［J］.Clin Chem，2002，48(12):2097-2104.

［2］杨于嘉，姚裕家.新生儿缺氧缺血性脑病诊断标准［J］.中华儿科杂志，2005，43(8):584-584.

［3］邵肖梅.新生儿缺氧缺血性脑病的诊治进展及相关问题［J］.临床儿科杂志，2007，25(3):179-182.

［4］Ramaswamy V，Horton J，Vandermeer B，et al.Systematic review of biomarkers of brain injury in term neonatal encephalopathy［J］.Pediatr Neurol，2009，40(3):215-226.

［5］Gazzolo D，Bruschettini M，Lituania M，et al.S100B protein levels in urine are correlated with gestational age in healthy preterm and term newborns［J］.Clin Chem，2001，47(6):1132-1133.

［6］Baudier J，Glasser N，Haglid K，et al.Purification，characterization and ion binding properties of human brain S100b protein［J］.Biochim Biophys Acta，1984，790(2):164-173.

［7］Gazzolo D，Florio P，Ciotti S，et al.S100B protein in urine of preterm newborns with ominous outcome［J］.Pediatr Res，2005，58(6):1170-1174.

［8］Gazzolo D，Marinoni E，Di Iorio R，et al.Measurement of urinary S100B protein concentrations for the early identification of brain damage in asphyxiated full-term infants［J］.Arch Pediatr Adolesc Med，2003，157(12):1163-1168.

［9］Gazzolo D，Frigiola A，Bashir M，et al.Diagnostic accuracy of S100B urinary testing at birth in full-term asphyxiated newborns to predict neonatal death［J］.PLoS One，2009，4(2):e4298.