骨髓间充质干细胞在肝纤维化中的作用

李益飞 牟晓洲 项春生

浙江大学医学院附属第一医院，浙江杭州 310003；传染病诊治国家重点实验室，浙江杭州 310003

临床慢性肝病所有类型中，肝纤维化为共同病理基础，可诱发上消化道出血、肝癌、肝腹水等恶性疾患，对患者的生命健康及生存质量造成了严重威胁[1]。肝纤维化必经的发展至肝硬化的阶段，为肝脏对慢性损伤的修复反应，在病程转入肝硬化前，可能存在逆转机会，故选择一种有效的治疗方案，可改善预后，阻断恶性近展[2]。骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）在不同诱导条件下可分化成软骨、脂肪、神经等多种细胞，易分离，遗传背景相对稳定，可在体外大量扩增，体内植入反应较弱，为肝硬化的治疗开辟了新的途径，本文就相关内容综述如下[3]。

1 肝纤维化中BM-MSCs的研究与临床应用

就目前的临床研究与应用现状来看，BM-MSCs能够改善患者肝脏功能，同时减轻肝纤维化程度，进而延缓患者肝脏纤维化的发展进程[4-7]。其中有研究证明，BM-MSCs在体内外均能够增强肝细胞的分化能力，而且还显示出骨髓间充质干细胞向肝脏细胞的分化能力更为显著，而且通过多次临床试验都得到证实，BM-MSCs的分化能力并未受到环境的影响。随着临床研究力度的加大，有不少学者提出，骨髓间充质干细胞其实是一种具有表达肝系细胞的表型，在一定的外因作用下，它可以实现向肝细胞的分化[8-9]。而且在临床应用中，通过低密度脂蛋白与糖原贮积研究也得到证实，其中部分功能性肝脏细胞均可以经过BM-MSCs细胞分化[10-11]。而这一临床研究的提出，则为慢性肝脏疾病的临床治疗提供了有效依据。特别是一些临床治疗难度较大的功能性肝脏疾病，如肝硬化、肝腹水、肝癌等，都可以借助BM-MSCs分化功能来实现治疗，并且为治疗方法的选取提供了新路径，进而有效降低患者肝脏纤维化程度与进展，以此确保患者的生存质量[12-13]。以下则是笔者对BM-MSCs临床应用特点与分离方法进行的简要阐述。

2 BM-MSCs特点分析

根据相关研究资料显示，除造血干细胞分布于骨髓外，还有间充质干细胞存在（MSCs），具有多向分化潜能和自我增殖能力[14]。BM-MSCs除可对基质细胞和血细胞分化外，还能够有效的保持体内细胞的内胚层分化潜能，进而促使上皮、肺脏、神经细胞等细胞分化[15]。可能由特残转录因子决定MSCs分化，诱导条件不同，分化方向也存有差异，诱导条件启动转录因子，对分化方向发挥作用，BM-MSCs的可塑性对大脑、肝脏、心脏等一些器官和骨骼肌等功能和结构恢复加以促进[16]。BM-MSCs除具多向分化的潜能外，还为外源基因的表达和转染提供了条件[17]。相关研究显示，BM-MSCs有可能成为潜在的全身或局部基因治疗的传递系统[18-19]。且其所携带的外源基因表达组织特异性较明显，故基因治疗和细胞治疗中BM-MSCs均为理想靶细胞[20]。因此将其应用到临床治疗中，就可以有效的提高治疗有效性。

3 BM-MSCs分离及标面标志

临床目前共4种对MSCs分离的方法，如密度梯度离心法、贴壁筛选法、免疫磁珠分离法和流式细胞仪分离法[21]。贴壁细胞分离法污染机会少、操作简单，依据造血系细胞悬浮生长而BMMSCs贴壁生长特性完成，但所得细胞纯度不足，成分复杂，可能有杂质存在。免疫磁珠分离法和流式细胞仪分离法可致细胞完全失去活性，但所需骨髓量大，要求的实验条件高，较难操作，故限制了临床应用[22]。密度梯度离心法纯度高、简便、对细胞活性未构成明显，使用最为广泛。虽BM-MSCs分离培养已成熟，但尚无MSCs特异性标志，均以一个细胞群体形式进行，对贴壁筛选法和密度梯度离心联合运用，将单个核细胞利用淋巴细胞分离液分离出来，再通过BM-MSCs的贴壁生长特性，将未贴壁细胞除去，以此获得的BM-MSCs具有更高的性质，在均一性、比例方面都显著提高。不过就相关资料显示，BM-MSCs具有非单一性的特征，而且尚无高度特异性表面抗原。

4 小结

现代组织工程和细胞工程如BM-MSCs等为人类肝纤维化、肝损伤等肝病的治疗提供了新的科研方向。BM-MSCs实用、移植简便、不存在免疫排斥、费用低，占有较大的优势，已前全球均在着力研究，随着BM-MSCs定向分化条件和纯化技术等研究的不断深入，BM-MSCs作为基因和细胞治疗将在临床安全有效的应用。

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