28 批次扁咽口服液中肉桂酸的含量测定

唐 亮，刘皈阳，马建丽，周 亮，李 翔

扁咽口服液［总制字(2008)F02001］是纯中药复方制剂，主要由玄参、连翘、冰片等17 味药材组成，具有清热解毒、利咽生津、软坚散结之功效，临床上主要用于急慢性咽、扁桃体炎。原有质控标准无含量测定。为了考察并更好地控制该制剂的内在质量，保证用药安全有效，本文采用HPLC 法对28 批扁咽口服溶液进行了质量考察，测定制剂中君药玄参中肉桂酸的含量，并对考察结果及出现的问题进行了分析与探讨，为制订完善的质量控制标准提供参考。

1 仪器与试药

Agilent 1200 型高效液相色谱仪(包括四元泵，VWD 检测器，自动进样器，ChemStation 化学工作站);Mettler AE200 电子天平;肉桂酸对照品(中国药品生物制品检定所，批号:110855-200801);药材均由北京市鹤延龄中药饮片有限公司提供;扁咽口服液(解放军总医院第一附属医院中药制剂室，批号:111226，10 mL/支);甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为重蒸水。

2 方法与结果

2.1 溶液的制备

2.1.1对照品储备液取肉桂酸对照品12.68 mg置于25 mL 量瓶中，用甲醇定容，摇匀。精密量取1 mL，置于100 mL 量瓶中，用甲醇定容，摇匀，即得5.072 μg/mL 的对照品溶液，置4 ℃冰箱保存。

2.1.2 供试品溶液 精密量取1 mL 置于10 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，0.45 μm 滤膜滤过，取续滤液，即得。

2.1.3 阴性对照溶液 按处方比例及生产工艺制备缺玄参的阴性对照样品，按“2.1.2”项下方法制成阴性对照溶液。

2.2 色谱条件 色谱柱为Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18(4.6 mm ×150 mm，5 μm);流动相为甲醇-1%冰醋酸溶液(50∶50);流速为1.0 mL/min;检测波长为285 nm;柱温为30 ℃。在此条件下，肉桂酸与样品中其他色谱峰分离良好，保留时间约为12 min，理论塔板数按肉桂酸峰计算不低于4 000。

2.3 专属性试验 取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液，按“2.2”项下色谱条件测定，记录色谱图。结果显示，阴性对照对肉桂酸的测定无干扰。见图1。

2.4 线性关系考察 按“2.2”项下色谱条件，分别进样对照品溶液1、2、5、10、20、40 μL，记录肉桂酸峰面积。以肉桂酸的进样量(μg)为横坐标(X)、峰面积为纵坐标(Y)绘制标准曲线，得回归方程为Y =6 397.06 X-0.131 6(r =0.999 9，n =6)。结果表明，肉桂酸在0.005 1 ～0.202 9 μg 范围内与峰面积呈良好的线性关系。

图1 HPLC 色谱图

2.5 精密度试验 取对照品溶液，连续进样6次，每次10 μL。结果肉桂酸峰面积RSD 为0.28%(n=6)，表明仪器的精密度良好。

2.6 稳定性试验 取同一批号(批号:111226)扁咽口服液供试品溶液(“2.1.2”项)，在0、2、4、8、12、24 h 分别进样测定。计算肉桂酸峰面积RSD为1.60%(n =6)，结果表明，供试品溶液在24 h内稳定性良好。

2.7 重复性试验 取同一批号(批号:111226)扁咽口服液样品6 份，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，分别进样测定。结果肉桂酸的平均含量为33.96 μg/mL，RSD 为1.39%(n=6)，表明方法的重现性良好。

2.8回收率试验精密量取已知含量(33.96 μg/mL)的同一批号(批号:111226)扁咽口服液样品6 份，精密加入适量肉桂酸对照品溶液，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，分别进样测定，计算回收率，结果见表1。

表1 加样回收率试验结果(n=6)

2.9 样品含量测定 按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，按相同色谱条件分别进样测定，测定了28 批样品(每批样品测量3 个样本，取其平均值)的含量，结果见表2。

表2 样品含量测定结果(n=28)

3 讨论

扁咽口服液为中成药制剂，组方药味多，成分复杂，文献报道的HPLC 法测定肉桂酸含量方法较多［1-2］。经比较，采用甲醇-1% 冰醋酸溶液(50∶50)洗脱，结果发现肉桂酸与杂质峰能得到较好的分离，所得图谱基线平稳、分离度良好，且阴性样品在相应保留时间的位置上无干扰。HPLC法方法学考察和实测样品的含量结果显示，本方法简单、准确，重现性好，专属性强，结果准确可靠，提高了工作效率，为扁咽口服液的质量控制提供了检测依据。

本研究结果提示，应在原有质量控制标准中增加含量测定检测项，以更好地控制口服液内在质量，保障用药安全有效的重要性;同时，应严格按照制备工艺进行生产。

［1］ 邱星安. 高效液相色谱法测定脉络宁口服液中肉桂酸含量［J］.实用临床医药杂志，2011，15(11):118-120.

［2］ 袁祥慧，杨惠莲.高效液相色谱法测定五苓片中肉桂酸含量［J］.中国药业，2011，20(9):18-19.