CyclinD1在皮肤鳞状细胞癌中的表达及意义

肖 明 赵学堂

（寿光市皮肤病医院，山东 寿光 262700）

CyclinD1在皮肤鳞状细胞癌中的表达及意义

肖 明 赵学堂

（寿光市皮肤病医院，山东 寿光 262700）

目的 探讨 cyclinD1 在皮肤鳞状细胞癌中的异常表达及与生物学行为的关系。方法 应用免疫组化 PV9000 法检测 52 例皮肤鳞状细胞癌中 p16 和 cyclinD1 的表达水平。结果 52 例皮肤鳞状细胞癌中 cyclinD 的阳性表达率为 67.3%。结论 cyclinD1 的异常表达在皮肤鳞状细胞癌的发生发展中起重要作用，可作为判断恶性程度，评估预后的指标。

鳞状细胞癌；免疫组织化学；cyclinD1

皮肤鳞状细胞癌是皮肤科常见恶性肿瘤。肿瘤的发生发展是一个多步骤的过程，是多种癌基因的激活和抑癌基因的失活或缺失、细胞凋亡基因表达的紊乱导致的。CyclinD1是作为细胞周期重要的正调控因子，在肿瘤的发生发展过程中起着重要作用[1]本研究采用免疫组化技术，本研究采用免疫组化PV9000法检测皮肤鳞状细胞癌组织和正常皮肤组中CyclinD1表达情况，试图探讨其表达与临床病理特征的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2006年～2011年寿光市皮肤病医院病理科保存的活检或手术石蜡标本，经2名病理医师HE染色确定为皮肤鳞状细胞癌。共46例，其中男20例，女26例；年龄41～70岁，平均60.3岁。按Broders 病理分级法将其分为：G1是13例、G2是24例、G3是15例。对照组是15例正常的皮肤组织，来自皮肤活检术或者是外科手术中皮损皮肤的切除部分。

1.2 方法

1.21 使用的主要试剂有：鼠抗人单克隆CyclinD1抗体、PV9000免疫组化试剂盒、EAB显色试剂盒、PBS缓冲液均购于北京中杉金桥生物试剂公司。

1.2.2 免疫组织化学方法：严格按照PV9000试剂盒的步骤顺序进行。实验时用已经明确知道的CyclinD1阳性的前列腺的组织切片作为实验时的阳性对照，而用PBS作为实验的阴性对照。

1.2.3 结果判断的标准：观察细胞的细胞核内如果出现综褐色或者是棕黄色的颗粒就可以判断为阳性。

1.2.4 判断的标准主要有：随机选择显微镜下的5个独立的高倍视野，观察视野内阳性的细胞所占的比例进行判断，其中①无表达，即全部细胞都没有着色，用（-）表示；②低表达，即染色的阳性细胞所占的百分比N＜25%，用（+）表示；③中度表达，即染色的阳性细胞所占的百分数N，25%＜N＜50%，用（+ +）；④高表达，即染色的阳性细胞所占的百分数N＞50%，用（+++）表示。3对数据进行统计：采用SPSS17统计软件进行统计，P值＜0.05差别具有统计学意义。结果CyclinD1在正常的细胞染色比较浅，阳性表达为17%；CyclinD1在鳞癌组织细胞中染成棕黄色，阳性表达为25%，阳性细胞散在的分布在组织中。可见，CyclinD1在正常细胞中的表达远远少于在鳞癌细胞中的表达，差异具有统计学的意义。CyclinD1在鳞癌组织中的表达与年龄无关，与不同病理分级有关，随着病理分级的逐渐升高，着色强度增加，阳性表达率升高。见表1所示。

表1 CyclinD1在正常皮肤及皮肤鳞癌组织中的表达

3 讨 论

cyclinD1 是一种细胞周期素D，它的作用是可以与CDK4相结合，活化CDK4。而被活化以后的CDK4能够使Rb蛋白发生磷酸化，从而能够进一步促使转录基因E2F发生解离，让细胞由G1期进入S期[2]。本研究显示CyclinD1主要在皮肤鳞癌组织的细胞核中表达，其阳性表达率较正常对照组高，差异有统计学意义，表明CyclinD1在皮肤鳞癌组织中有促进细胞增殖恶化作用，与皮肤鳞癌的发生相关。CyclinD1作为细胞周期中重要的调控因子，其基因多态性的不同对肿瘤的形成有不同的影响[3,4]。通过本次研究得出以下结果：cyclinD1在正常的组织细胞中是低表达，细胞着色比较浅；而在鳞癌组织中表达明显增加，着色较深。这说明：cyclinD1对于鳞癌的形成具有一定的促进作用。在病理上cyclinD1表达的分级在G1、G2、G3间有显着性差异（P＜0.05），低分化鳞癌（93.3%）明显高于高分化鳞癌（46.2%）及中分化鳞癌（66.7%），研究与沈金翠等[5]研究结果一致。本研究提示cyclinD1异常表达可作为肿瘤分化程度和预后的评价指标之一。

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