黄芩有效化学成分及抑菌作用的分析

王诗会

（河南省南阳市第二人民医院，河南 南阳 473000）

黄芩有效化学成分及抑菌作用的分析

王诗会

（河南省南阳市第二人民医院，河南 南阳 473000）

目的 探讨黄芩的有效化学成分及抑菌作用。方法 分别使用超声法和水煮法提取黄芩的有效成分，然后比较两种方法所提取的黄芩成效成分，提取液和黄芩结晶物在体外的抑菌效果。结果 使用超声法提取得到的黄芩有效成分的体外抑菌效果明显优于使用水煮法提取得到的黄芩有效成分（P＜ 0.05）；使用超声法提取得到的黄芩结晶物的体外抑菌效果明显优于水煮法提取得到的的黄芩有效成分（P＜ 0.05）。结论 黄芩在临床上具有很好的抑菌作用，使用超声法可以有效的提取出黄芩的有效成分，值得临床推广。

肠球菌属细菌；耐药性；药敏试验

1 资料与方法

1.1 药品、试剂和菌种

实验所用黄芩均采购由浙江省药材公司；MH肉汤以及琼脂采购于上海微生物试剂有限公司；实验研究所用的的其他试剂均为分析纯标准；实验所用的金黄色葡萄球菌为采购于中国食品药品检验所的肠炎沙门氏菌ATCC13076。

1.2 检测仪器

黄芩有效成分的提取主要使用的仪器包括：使用由上海亚荣生化仪器厂制造的RE-52AA旋转蒸发器； SW-CJ-2F超净工作台和DHP9162电热恒温培养箱由上海齐欣科学仪器有限公司制造；超声波发生器由苏州安泰空气技术有取公司制造，超声发生频率为20kHz、800kHz以及1100kHz。

1.3 提取方法

1.3.1 水煮法

首先制备水煎提取液：使用天平精确称取50g黄芩饮片，他别加入500g以及400g水煎煮2次，每次煮1h，然后进行过滤，将两次滤液合并，然后浓缩滤液至50mL，此时的黄芩水煎液浓度为1000mg/mL，经过无菌处理后备用。然后制备结晶物：使用天平精确称取50g黄芩饮片，他别加入500g以及400g水煎煮2次，每次煮1h，然后进行过滤，将两次滤液合并，然后在滤液中加入浓盐酸并将滤液的pH值调节至1～2，并于80℃环境放置30min，静置12h后将上清液弃除，然后加适量水将沉淀物溶解，搅匀后向溶液内加入40%的NaOH溶液，将黄芩素溶解，并将溶液的值调节至6～7，之后加入等量的95%浓度的乙醇，加热至50℃后过滤，使用10%盐酸调节滤液的pH值至2～3，并静置于50℃水浴中30min，使黄芩结晶物能够完全析出，过滤得到结晶物，并用清水将结晶物冲洗至中性，60℃干燥至恒重，得到实验用的黄芩结晶物，最后配制为10mg/mL的溶液，经过无菌处理后备用。

1.3.2 超声提取法

首先取适量（＞50g）的黄芩饮片，于60℃进行烘干，然后进行粉碎并使用10目筛进行过滤，使用天平精确称取50g黄芩粗粉，向粗粉中加入10倍量的水，并使用超声进行处理，频率选择20kHz，并注意随时补充水，让溶液的液面保持同一高度，超声处理1h后进行过滤，使用盐酸将滤液的pH值调节至1～2，80℃水浴静置30min，将黄色的结晶物充分析出后进行过滤。向沉淀物中加入蒸馏水并搅匀，然后向溶液中加入40%的NaOH溶液，将黄芩素溶解，并将溶液的值调节至6～7，之后加入等量的95%浓度的乙醇，加热至50℃后过滤，使用10%盐酸调节滤液的pH值至2～3，并静置于50℃水浴中30min，使黄芩结晶物能够完全析出，过滤得到结晶物，并用清水将结晶物冲洗至中性，60℃干燥至恒重，得到实验用的黄芩结晶物，最后配制为10mg/mL的溶液，经过无菌处理后备用。

本研究用均方差(root mean square error,RMSE)、残差累积系数(residual accumulation coefficient,CRM)和平均误差(average mean error,AME),评估模拟值与观测值的吻合程度。三者的值越趋近于0,表明模型的模拟精度越高。同时用观测值与模拟值之间的1∶1线来评估模型的可靠性。

1.4 抑菌作用比较方法

将实验用肠炎沙门氏菌接种于MH肉汤中，体积约为3mL，在37℃环境下培养18h，并将菌液稀释到浊度105CFU/mL，然后使用二倍稀释法进行提取物的体外抑菌实验，每个浓度的实验均重复3次。

1.5 统计学方法

采用SPSS17.0软件进行数据的统计与分析，全部数据资料用采用t检验，χ2检验，P＜0.05为差异有显著性，具有统计学意义。

2 结 果

2.1 提取液的抑菌浓度

使用超声法提取得到的黄芩有效成分的体外抑菌效果明显优于使用水煮法提取得到的黄芩有效成分（P＜0.05），见表1。

表1 两种提取方法黄芩提取液的最低抑菌浓度MIC比较

2.2 结晶物的抑菌浓度

使用超声法提取得到的黄芩结晶物的体外抑菌效果明显优于水煮法提取得到的的黄芩有效成分（P＜0.05），见表2。

表2 两种提取方法黄芩提取结晶物的最低抑菌浓度MIC比较

3 讨 论

黄芩是临床上常用的中药，其中最为主要的有效成分为黄芩苷，具有良好的清热解毒，消炎利胆，保肝抗变态反应的作用，并且具有非常广泛的抗菌谱，对金葡菌、绿脓杆菌以及沙门氏菌均具有十分良好的抑制作用。在临床上，黄芩主要是用于治疗热病烦燥、肺热咳嗽、湿热泻痢以及烦渴等疾病。近年来，有研究发现，黄芩还具有良好的抗病毒作用[2]。

传统的黄芩苷提取方法为水煮法，但水煮法的提取时间比较长，而且提取率比较低。因此，为了提高黄芩苷的提取率，笔者采用最新的超声提取法和传统的水煮法进行对比分析[3]。研究结果显示，超声法提取黄芩的抑菌效果明显优于水煮法提取的黄芩，超声法提取黄芩结晶物的抑菌效果明显优于水煮法提取的黄芩。

综上所述，黄芩在临床上具有很好的抑菌作用，使用超声法可以有效的提取出黄芩的有效成分，值得临床推广。

[1]魏述永.黄芩有效成分提取物对沙门氏菌的抑菌活性比较研究[J].中国医药杂志,2008,6(5):40-41.

[2]黎丹戎.汉黄芩素对人卵巢癌细胞株SKOV3裸鼠移植瘤生长及端粒酶活性的抑制作用[J].中国药理学通报,2007,23(4):534-538.

[3]郭京华.浅析黄芩有效化学成分及抑菌作用[J].中国实用医药, 2012,7(16):195-196.

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：1671-8194（2013）08-0083-02