抗环瓜氨酸肽抗体、类风湿因子对类风湿关节炎的诊断价值

邓连瑞，徐江霞，漆 坚，龚初平，霍 颖

(南昌大学第四附属医院，南昌330003)

类风湿关节炎(RA)是常见的自身免疫性疾病，其病理改变以滑膜慢性炎性增生、关节软骨和骨质进行性不可逆性破坏为特征。如不及时诊治，患者2年内即可发生不可逆的关节破坏或畸形［1］。因此，早期确诊并及时干预治疗对控制病情发展、减少关节侵蚀破坏有重要意义。目前，国内对RA的诊断主要依据临床表现、X线检查及类风湿因子(RF)检测，但据此标准确诊者常已出现骨关节破坏，丧失最佳治疗时机。近年研究发现，RA患者血清中存在特异性抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体，可作为RA诊断及病程评价的血清免疫学指标［2］。基于此，本研究检测了118例RA患者、112例其他自身免疫病患者和120例正常人血清中的抗CCP抗体和RF，以探讨二者对RA的诊断与鉴别诊断价值。

1 资料与方法

1．1 临床资料 选择2009～2011年本院门诊及住院RA患者118例(RA组)，男33例、女85例，年龄16～75(55±12)岁，均符合1987年美国风湿病协会(ARA)修订的RA诊断标准。其他自身免疫性疾病患者(非RA自免组)112例，包括系统性红斑狼疮(SLE)34例，多发性肌炎/皮肌炎26例，混合性结缔组织病(MCTD)20例，骨关节炎(OA)21例，硬皮病2例，原发性干燥综合征(PSS)5例，系统性硬化症4例。正常对照组120例为同期本院体检的正常人群。各组性别、年龄具有可比性。

1．2 方法

1．2．1 检测方法 采集受试者空腹静脉血，离心分离血清。血清抗CCP抗体检测采用ELISA方法，试剂盒由欧蒙(德国)医学实验诊断有限公司提供，cutoff值设定结果＞5 U/mL为阳性;血清RF检测采用速率散射比浊法，使用SIEMENSBNP特定蛋白自动分析仪检测系统测定，RF＞20 U/mL为阳性。

1．2．2 统计学方法 采用SPSS18．0统计软件，计量资料±s表示，采用四格表计算抗体的敏感性和特异性，两样本间比较用 t检验和 χ2检验。P≤0．05为差异有统计学意义。

2 结果

2．1 三组抗CCP抗体、RF检测结果 见表1。RA组抗CCP抗体、RF及二者联合检测的阳性率均高于其他两组(P均＜0．05)。

表1 各组抗CCP抗体、RF及二者联合检测的阳性率比较［例(%)］

2．2 RA患者抗CCP抗体与RF的相关性 见表2。经交叉分类资料的χ2检验分析发现，抗CCP抗体与RF呈正相关(P＜0．05)。

表2 抗CCP及RF在RA中分布及相关性(例)

2．3 抗CCP抗体、RF及两者联合检测对RA的诊断价值比较 见表3。通过三组样本综合分析，RF诊断RA的敏感性、阴性预测值高于抗CCP抗体(P均＜0．05);抗CCP抗体对诊断RA的特异度、阳性预测值均高于RF(P＜0．05或＜0．01);抗CCP抗体和RA联合检测对RA的诊断敏感性明显高于抗CCP抗体、RF(P均＜0．01);抗CCP抗体和 RA联合检测对RA诊断的阴性预测值高于抗CCP抗体、RF两项检测指标单独应用，且比单用RF提高了特异度及阳性预测值(P均＜0．05)。

表3 抗CCP抗体、RF及二者联合检测的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值比较(%)

2．4 ROC曲线分析 以美国风湿病学会1987修订的RA分类标准为金标准，根据诊断试验的敏感性和特异性绘制抗CCP及RF的ROC曲线，进行诊断试验效能评价。结果显示，曲线下面积均大于0．7，提示抗CCP抗体和RF联合检测的诊断效能优于抗CCP抗体、RF单独应用。见表4。

表4 各组ROC曲线下面积

3 讨论

现行RA诊断标准的血清学指标中，RF是抗IgG分子Fc片段的自身抗体，按免疫球蛋白类型可分为IgM、IgG和IgA型。RF见于70%的RA患者，主要是IgM类抗体，在其他结缔组织的自身免疫性疾病及一些非结缔组织病如感染、肿瘤等疾病患者中亦可升高，故特异性相对较低。近年来，随着自身免疫疾病研究的进展，人们又发现了 AKA、APF、AFA等多种RA相关自身免疫相关抗体，其诊断RA的特异性较RF明显提高，且多种指标联合检测的敏感性更高。但这些抗体测定所需的抗原成分不易获得和纯化，造成结果稳定性差、误差较大。由于上述抗原成分都含有共同的瓜氨酸肽成分，因此Schellekens等［2］将2个丝氨酸替换为半胱氨酸，形成与β转角类似结构的二硫键，构建了19个氨基酸组成的瓜氨酸肽链的合成CCP，并建立以此为抗原的ELISA检测方法，其对RA诊断的敏感度为45%～85%，特异性为 90% ～97%［3］。

本研究结果显示，抗CCP抗体诊断RA的敏感性和特异性分别为69．5%、74．29%，RF诊断RA的敏感性和特异性分别为72．9%、61．14%。相对于正常对照组和非RA自免病组，RA组抗CCP抗体与RF的阳性率均有统计学差异，表明二者均可用于RA的诊断，且抗CCP抗体的特异性明显优于RF，与文献［4］报道一致。抗CCP抗体诊断RA的敏感性较低，其原因可能是合成肽链中仅包含部分抗原表位，而RA患者细胞骨架成分中存在含瓜氨酸分子的不同抗原表位，以致血清中免疫应答产生的抗CCP抗体存在异质性，只能与相应抗原表位相应的CCP抗体发生结合［5］;另外，也可能与机体的免疫状态相关，抗CCP抗体对诊断活动性RA具有很高的敏感性，在稳定期敏感性降低［6］。

本研究经相关性分析显示，抗CCP抗体与RF存在相关性，与文献报道一致［7］，但相关性较弱，说明二者对RA的诊断虽然具有一致性，但在RA中的反应性及诊断效能存在差异。抗CCP抗体的特异性较RF高，并且与RF的敏感性和特异性存在互补［8］。联合检测抗CCP抗体和RF，即两者中任一项阳性作为RA筛查指标时，其敏感性和特异性较单独应用RF显著提高。进一步采用ROC曲线来评价二者单独及联合应用的诊断效能，结果显示，抗CCP抗体、RF及二者联合检测的曲线下面积均大于0．7，提示均具有一定的诊断准确性，并且二者联合检测的临床诊断效能优于单用抗CCP抗体和RF。

总之，抗CCP抗体是具有高特异性和一定敏感性的免疫学检测指标，可以作为辅助诊断RA的一个重要指标，与RF联合检测可提高对RA的诊断效能。

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