加味皮康颗粒的质量标准研究

于 玲 王晓飞 葛海生

武警部队药品仪器检验所，北京 102613

加味皮康颗粒的质量标准研究

于 玲 王晓飞 葛海生

武警部队药品仪器检验所，北京 102613

目的：建立加味皮康颗粒的质量标准。方法：采用薄层色谱法对方中的桑白皮、白鲜皮、当归进行定性鉴别，采用高效液相色谱法对芍药苷进行含量测定。结果：TLC斑点清晰，分离度好，专属性强，阴性对照无干扰；芍药苷进样量在0.01394～0.5576μg范围内线性良好（r＝0.9999），平均回收率：98.45%，RSD：1.33%（n＝6）。结论：所建标准能有效控制加味皮康颗粒的质量。

加味皮康颗粒；质量标准；薄层色谱法；高效液相色谱法；芍药苷

加味皮康颗粒是由牡丹皮、桑白皮、白鲜皮、当归、陈皮、五加皮、大腹皮、地骨皮等多味中草药组成，具有清热凉血，祛风止痒，活血消斑的功效，临床用于玫瑰糠疹、湿疹的治疗，为保证和控制该制剂的质量，本文建立了白鲜皮、桑白皮、当归的薄层色谱（TLC）定性鉴别，采用高效液相色谱（HPLC）测定制剂中芍药苷的含量，方法简单，专属性强、重复性好，获得了较满意的结果。

1 仪器与试药

1.1 仪器 SHIMADZU LC－2010HTC高效液相色谱仪，METTLER TOLEDO AL204电子天平。

1.2 试药 白鲜皮对照药材（批号：120978－201105，购自中国食品药品检定研究院）、桑白皮对照药材（批号：12114－201006，购自中国食品药品检定研究院）、当归对照药材（批号：120927－201014，购自中国食品药品检定研究院），芍药苷对照品（批号：110736－200526，购自中国食品药品检定研究院）；加味皮康颗粒（批号：20130301、20130302、20130303，为武警部队药品仪器检验所自制）；硅胶G薄层板（青岛海洋化工厂分厂）；乙腈、甲醇为色谱纯，其他试剂为分析纯。

2 定性鉴别：

2.1 桑白皮的TLC鉴别［1］取本品约4.5g，加饱和碳酸钠溶液30ml，超声20分钟，加稀盐酸调pH值至1～2，静置30分钟，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液Ⅰ。另取桑白皮对照药材2g，按供试品溶液Ⅰ制备的方法制成对照药材溶液Ⅰ；另取不加桑白皮药材的阴性样品，按供试品溶液Ⅰ制备的方法制成阴性对照溶液Ⅰ。按薄层色谱法（《中国药典》一部2010年版附录ⅥB）试验，吸取上述溶液供试品溶液Ⅰ5μl、对照药材溶液Ⅰ10μl，阴性对照溶液Ⅰ5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）－乙酸乙酯（6：4）为展开剂，展开、取出、晾干。置紫外灯（365nm）下检视，结果供试品溶液色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照溶液在相应位置上无干扰（见图1）。

2.2 白鲜皮的TLC鉴别［2］取本品约2.3g，加甲醇30m l，超声20分钟，滤过，滤液加中性氧化铝（100～200目）1.5g，振摇2min，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇1m l使溶解，作为供试品溶液Ⅱ。另取白鲜皮对照药材1g，加水40ml，煮沸并保持微沸30min，脱脂棉滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇2m l使溶解，作为对照药材溶液Ⅱ。另取不加白鲜皮药材的阴性样品，按供试品溶液Ⅱ制备的方法制成阴性对照溶液Ⅱ。按薄层色谱法（《中国药典》一部2010年版附录ⅥB）试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷－丙酮－浓氨水（20：20：1）的上层溶液为展开剂，展开、取出、晾干。喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点清晰。结果供试品溶液色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点，阴性对照溶液在相应位置上无干扰（见图2）。

2.3 当归的TLC鉴别［3］取本品2.3g，加1%碳酸氢钠溶液20m l，超声处理10分钟，离心，取上清液用稀盐酸调节pH值至2～3，用乙醚振摇提取2次，每次20m l，合并乙醚液，挥发，残渣加甲醇1m l使溶解，作为供试品溶液Ⅲ。另取当归对照药材0.5g，按供试品溶液Ⅲ制备的方法制成对照药材溶液Ⅲ；另取不加当归药材的阴性样品，按供试品溶液Ⅲ制备的方法制成阴性对照溶液Ⅲ。按薄层色谱法（《中国药典》一部2010年版附录ⅥB）试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷－二氯甲烷－乙酸乙酯－甲酸（4：1：1：0.1）为展开剂，展开、取出、晾干。置紫外灯（365nm）下检视，结果供试品溶液色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照溶液在相应位置上无干扰（见图3）。

3 芍药苷的含量测定［4］

3.1 色谱条件 色谱柱：SHISEIDO，ODS分析柱（4.6mm ×250mm，5？m）；流动相：乙腈－0.1%磷酸溶液（14：86），柱温：30℃，检测波长：230nm，流速：1.0m l·min－1，在上述色谱条件下，芍药苷和供试品中其它组分可达到基线分离，芍药苷与其相邻色谱峰的分离度大于1.5，且阴性对照液无干扰（附图）；理论塔板数按芍药苷峰计大于2000。

3.2 对照品溶液的制备 精密称取芍药苷对照品约6.97mg，置于10m l量瓶中，加甲醇适量溶解后，稀释至刻度，摇匀制得贮备液。精密吸取贮备液1m l，置50m l量瓶中加甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液。

3.3 供试品溶液的制备 取本品约1g，精密称定，置于锥形瓶中，精密加入甲醇25m l，称定重量，超声处理（功率300W，频率45kHz）15分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

3.4 阴性对照溶液的制备 按处方配制不含牡丹皮的样品颗粒，并按“3.3”项下方法对样品进行制备，制成阴性样品溶液。

3.5 方法专属性试验精密吸取芍药苷阴性对照溶液、对照品溶液、供试品溶液各10μl，分别注入色谱仪，按“3.1”项下色谱条件进行测定，记录图谱，见图4。在B、C色谱图相应的位置上具有相同保留时间色谱峰，而A图在相应位置上无干扰峰。

3.6 线性关系考察精密量取对照品溶液（浓度为：13.94μg·m l－1）各1，5，10，15，20，25，30，35，40μl注入色谱仪中，按“3.1”项下色谱条件测定芍药苷峰面积（A），作为纵坐标，同时以芍药苷进样量（μg）为横坐标，得回归方程为Y＝766＋1254293X，r＝0.9999。以上数据表明芍药苷进样量在0.01394μg～0.5576μg范围内线性良好。

3.7 精密度试验 精密量取3.6中浓度为13.94μgμml－1的溶液，按3.1项下色谱条件重复进样6次，每次10μl，计算得芍药苷的峰面积RSD为0.86%（n＝6），表明仪器的精密度良好。

3.8 稳定性试验将3.3项下的溶液于室温放置，分别在放置0，2，4，6，8，10，12h时进行分别进行测定，计算得芍药苷峰面积RSD为1.45%（n＝7），表明供试品在12h内基本稳定。

3.9 重复性试验 取同一批号的样品6份，按样品溶液制备方法制备及测试条件测定，结果芍药苷平均含量的RSD＝1.31%（n＝6），表明本法重复性良好。

3.10 回收率试验 采用加样回收法，取已知芍药苷含量的同一批号的本品（批号：20130302，含量为0.2315 mg· g－1）约1g，共6份，精密称定，置于锥形瓶中，精密加入芍药苷对照品溶液（浓度为0.2323mg·ml－1）各1ml，再精密加入甲醇25ml，按3.3中项下方法制成供试品，分别吸取供试品溶液10μl，注入HPLC仪，测定芍药苷含量，计算加样回收率，结果见表1。

表1 加样回收率试验结果（n＝6）

3.11 样品的测定 取本品3批，按“3.3”项下制成供试品溶液，进样10μl分别测定。按外标法计算芍药苷的含量，结果见表2。

表2 样品含量测定结果（n＝3）

4 讨论

4.1 在2.1桑白皮的TLC鉴别中，曾采用样品溶液点于聚酰胺薄膜上，展开剂用醋酸，进行试验，分离结果不满意。

4.2 在2.2白鲜皮的TLC鉴别中，曾采用样品溶液超声后，滤过，滤液未加中性氧化铝（100～200目）振摇，滤过，滤液直接蒸干，残渣加甲醇使溶解，制成供试品后进行试验，分离结果不满意。

4.3 本试验对方中的主要成分桑白皮、白鲜皮、当归采用TLC进行定性鉴别，色谱斑点清晰，分离效果好，专属性强，可用于该制剂的定性鉴别。

4.4 在定量试验中，取同一批号的样品，采用甲醇、乙醇、稀乙醇分别考察了超声处理15min的考察方法，结果表明，以甲醇为溶剂，超声处理15min，方法简便，提取充分，方法最佳。

4.5 试验中，比较了参考文献4、5所述的流动相、柱温，以乙腈－0.1%磷酸溶液（14：86），柱温：30℃，制剂中芍药苷能与其他组分的色谱峰很好分离，理论塔板数按芍药苷峰计大于2000，且方法简便、实用，结果准确，重现性好，可有效的控制加味皮康颗粒的质量。

［1］贺云杰，赵晨，李妍，等.参附强心丸中人参、大黄、桑白皮的薄层鉴别鉴别及乌头碱限度检查［J］.世界科学技术（中医药现代化），2009，03：468.

［2］王春桃，符洪.白山片的薄层色谱鉴别方法研究［J］.中国热带医学，2008，8（6）：1036.

［3］国家药典委员会编.中华人民共和国药典（一部）［S］.2010年版.北京：化学工业出版社，2010：124.

［4］国家药典委员会编.中华人民共和国药典（一部）［S］.2010年版.北京：化学工业出版社，2010：97.

［5］王晓飞，葛海生，于玲，等.柴辛鼻敏康颗粒的质量标准研究［J］.中国药房，2011，22（19）：1800.

Quality Standard of jiawei pikang Granules

Yu Ling，Wang Xiao－fei，Ge Hai－sheng（Institute for Drug Control of the Chinese People＇s Armed Police Forces，Beijing102613，China）

Objective：To establish the Quality Standard of jiawei pikang Granules.Methods：TLC was adopted to identify Cortex Mori，Radix Ampelopsis and Radix Angelicae sinensis.HPLCmethodwasused to test the contentof paeoniflorin.Results：TLC spots were clear，well－separated and specific without interference from negative control；The linear range of paeoniflorin was0.01394～0.5576？g（r＝0.9999）with an average recovery of98.45%，The RSD is 1.33%（n＝6）.Conclusion：Establish Standard is suitable for the quality control of jiawei pikang Granules.

jiawei pikang granules；quality standard；TLC；HPLC；paeoniflorin

R286

A

1007－8517（2013）23－0014－03

2013.10.13）

于玲，副主任药师，本科，研究方向为药品检验，E－mail：yuling.y＠163.com