Wnt/β—catenin 信号通路及其在胰腺癌发生发展中的作用

吴梦瑶?谢宇锋?陶敏

摘 要 Wnt信号传导通路是广泛存在于真核生物中一条高度保守的信号通路，β-连环蛋白（β-catenin）是Wnt信号通路中的关键调控因子，通路中的效应因子在肿瘤的侵袭转移和增殖凋亡过程中发挥重要作用。Wnt/β-catenin信号通路与胰腺癌关系密切，并在肿瘤形成的不同阶段发挥不同的作用，抑制此通路能起到抗肿瘤作用，有可能成为候选的靶向治疗靶点，值得进一步研究。本文就Wnt/β-catenin通路的信号传导途径及其在胰腺癌发生发展过程中的作用作一综述。

关键词 Wnt β-catenin 胰腺癌

Wnt是一种作用于动物发育过程中多个阶段的分泌型糖蛋白，哺乳动物基因组中共有19种Wnt信号基因。Wnt信号通路可分为经典的Wnt信号途径（canonical Wnt/β-catenin pathway）与非经典的Wnt信号途径（noncanonical Wnt/β-catenin pathway）2种类型。经典的Wnt信号途径以Wnt配体与跨膜受体卷曲蛋白（Frizzled）和辅助性受体低密度脂蛋白受体相关蛋白5/6（LRP-5/6）2种受体的结合为起始点，最终导致β-catenin在细胞质中积聚入核后与核内转录因子T细胞因子（TCF）/淋巴样增强因子（LEF）结合形成复合体，调控靶基因的表达。

1 Wnt/β-catenin信号通路及其生物学作用

1.1 Wnt/β-catenin信号通路的组成

目前认为Wnt/β-catenin信号通路主要由以下几种蛋白构成：Wnt、Frizzled（FZD）、β-catenin、LRP5/6、松散蛋白（Dsh）、酪蛋白激酶I（CKl）、结直肠腺瘤性息肉蛋白（APC）、糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）、轴蛋白（Axin）、TCF/ LEF和泛素蛋白（Ub）等。哺乳动物中存在的10种FZD受体蛋白都是7次跨膜受体，并且有较大的胞外N末端富半胱氨酸区（CRD），能够提供Wnt结合的主区域[1]。CRD有多个结合层面，其中一个包含能与Wnt分子相互作用的疏水凹槽。Wnt信号通路激活时，Wnt蛋白结合一个FZD蛋白与LRP5/6蛋白组成的异源二聚体受体复合物，最终导致β-catenin在胞质中积累并转运到细胞核[2]，核中TCF与β-catenin结合后转化为TCF/β-catenin转录激活因子，最终启动WNT信号通路下游特异性靶基因的转录[3、4]。当 FZD/LRP受体未被结合时，胞质中β-catenin与GSK-3β、APC、CKl和Axin构成一个多蛋白复合物。β-catenin的Ser33/Ser37/Thr41位点受到GSK-3β磷酸化后立即被蛋白酶体泛素化降解，使其保持在一个较低水平。β-catenin的Tyr654位点磷酸化后，C末端更易被众多转录共激活因子绑定而促进转录，这些转录共激活因子是常规[6]。β-catenin在细胞质与细胞核之间穿梭的细节仍不清楚，不过最近有研究证明微管的作用和主动运输与其相关[7]。还有研究表明β-catenin会瞬时有序地与不同的核孔成分结合以顺利通过核孔，在这些成分中Nup358对于β-catenin在核易位过程中与核孔的对接与断连尤其重要[8]。TCF根据不同的细胞内环境产生促进或抑制靶基因的作用[9]。昆虫的基因组只编码一种TCF，而脊椎动物中则有4种，TCF1、TCF3、TCF4、LEF1，它们都能与β-catenin发生反应，在脊椎动物中存在的剪接变异体使情况更为复杂[4]。在脊椎动物中，有的TCF更倾向于阻遏Wnt/β-catenin的靶基因，而更多的则是激活剂[10]。近期有研究认为蛋白质Jerky/Earthbound能调节β-catenin-TCF活性，且具有细胞类型特异性[11]。除TCF外β-catenin也能结合各种其他转录因子并诱导其靶基因的转录，例如在小鼠胚胎干细胞中，β-catenin能够与多能性转录因子Oct4结合而诱导其下游靶基因的转录[4]。

Lyashenko等研究证明β-catenin的生物学功能取决于它在信号通路和组织学结构上的双重角色。缺乏β-catenin的小鼠胚胎干细胞无法分化出中胚层胚叶，并且无法形成神经上皮，两者都会影响到分化过程中细胞与细胞间的连接，而重新加入β-catenin后细胞间粘附点得到了修复，神经上皮组织也可继续形成，但中胚层的形成无法恢复，因为其需要实现完整的β-catenin转录过程[12]。在背神经管和神经嵴细胞的发育过程中，β-catenin的缺失会比仅仅抑制其表达造成更明显的表型，进一步证明β-catenin的作用会产生叠加效应[13]。

1.2 Wnt信号通路和干细胞自我复制

WNT通路在维持干细胞方面的作用已引起广泛的关注。干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞，在一定条件下它可以分化成多种功能细胞，这主要取决于外界的细胞信号，这些信号包含能够短期限制干细胞数量的信号中心[14]。

已有研究证明Wnt是干细胞的关键信号，在胃肠、皮肤、毛囊和乳腺等器官中都发现事先标记过的干细胞[15、16]。世系追踪技术证实Wnt是多种成体干细胞的自我复制信号蛋白，Wnt蛋白或Wnt信号通路激动剂可维持干细胞的生长。早期有研究表明小鼠TCF4突变导致肠干细胞的损伤，随后出现组织的分解。毛囊中的Wnt信号通路在干细胞和祖细胞生物学中起到多重作用。表达DKK以阻断Wnt信号通路后，毛囊和乳腺等其他皮肤附属结构的组织特异性干细胞受到很大程度的损失。相反，在造血和毛囊系统中激活Wnt信号通路均可导致干细胞的扩增[17]。Wnt通路激动剂R-Spondin可以维持干细胞的自我更新状态以分化出肠上皮细胞[18]。Ten Berge 等[19]发现Wnt可以维持小鼠胚胎干细胞的多能性。因此Wnt对于退化性疾病的治疗有一定临床意义。

1.3 WNT通路抑制剂通过多种途径作用于WNT受体

Wnt/β-catenin能受到多种因素的调节，其中有分泌型Frizzled相关蛋白（sFRPs）和Wnt抑制蛋白（WIF），两者都能与Wnt结合从而竞争性抑制Wnt和FZD/LRP受体的结合。其他Wnt抑制剂包括Dickkopf（DKK）和WISE/SOST家族蛋白，能够结合LRP5/6而拮抗信号通路的传导。此外还有一种膜结合糖蛋白APCDD1能够分别与Wnt和LRP结合从而削弱Wnt信号传导通路。

1.4 Wnt信号通路和肿瘤

早期研究将Wnt通路与乳腺癌和结肠癌联系起来，并证明Wnt信号通路的激活会促进肿瘤的起始和发展。随后有研究证明最初设想过于简单，Wnt通路在不同环境中对于肿瘤的形成起到不同的作用，不能仅用单一的机制来解释。APC突变造成的遗传性肿瘤病变被称为家族性腺瘤性息肉病（FAP）。FAP患者携带杂合子APC基因突变，第二个等位基因在能成长为结肠腺瘤、息肉的个体细胞中经常丢失，KRAS、TP53和Smad4等其他的基因突变会诱发这些息肉的恶变。大多数散发性大肠癌源于APC等位基因的缺失，造成β-catenin和TCF家族成员TCF4复合物的形成。近期全球的全基因组外显子测序已证实，绝大多数大肠癌患者基因组中存在APC突变[20]。此外还揭示编码TCF4的基因VTl1A 和Tcf7l2罕见但周期性出现的融合现象，使结肠癌的癌基因列表又增添一位Wnt信号通路成员[21]。

2 Wnt/β-catenin信号通路相关因素在胰腺癌中的表达水平

Wnt信号通路多方面调节胰腺癌的生物学特性，通路活性在胰腺癌中普遍上升，胰腺癌细胞表达多种Wnt配体[22]，在大部分人类胰腺肿瘤中都发现Wnt信号通路构成因子突变。除经典的Wnt信号通路，非经典的Wnt信号通路也在胰腺癌中起到重要作用[23、24]，不同的Wnt通路的重要性还需要进一步研究。

越来越多的证据表明Wnt/β-catenin信号通路在胰腺癌中的作用随着病程、位置、作用强度、激活机制的不同而发生改变，有时甚至会自相矛盾。β-catenin在正常胰腺发育过程中是必不可少的，但在成人胰腺中表达下调。基因测序技术证明胰腺癌有大量高度易变的基因改变，这些基因改变与Wnt信号通路等所有肿瘤共有的12条通路相关。海泽等已经证明，Wnt/β-catenin通路的上调可以诱导胰腺癌发生。Qiao等发现β-catenin参与胰腺癌的发生，其胞膜表达减弱、胞质的异位表达均与胰腺癌的预后紧密相关。相反，Lowy等研究发现β-catenin在胰腺癌细胞中表达下调而不是上调。Heiser等研究发现，在小鼠体内持续活化β-catenin可导致胰腺上皮内瘤变（PanIN）及最终肿瘤形成。Zhang Y等[25]发现抑制Wnt通路会显著延迟胰腺上皮内瘤变的形成。3-Cl-AHPC能抑制β-catenin在胰腺癌细胞中的表达[26]。SOX15 （sex determining region Y—box 15）也能抑制Wnt/β-catenin通路，从而在胰腺癌中起到肿瘤抑制因子的作用[27]。Ripka等研究认为Wnt通路增强了胰腺癌细胞的增殖、侵袭和转移活性，参与胰腺癌细胞的上皮-间充质转化（EMT）过程。调节EMT的转录因子ZEB1（也称为DEF1）受到β-catenin的直接调控。在形成EMT的过程中，它不仅在多种不同类型的肿瘤中都可以稳定转录表达E-钙粘蛋白（E-cad），还能激活间充质基因[28]。根据研究，经典Wnt/β-catenin通路中的各个因子在所有的胰腺癌病例中都上调，但Wnt/β-catenin信号通路拮抗剂DKK1的上调却能促进肿瘤的侵袭，不过其机制尚未明确[29]。Wnt/β-catenin信号通路及其下游基因在胰腺癌中的具体作用还有待更全面的基因检测以得出进一步的结论。

3 Wnt/β-catenin信号通路在胰腺癌发生和发展中的作用机制

3.1 Wnt/β-catenin信号通路对胰腺癌细胞增殖的作用机制

β-catenin是Wnt通路的调解中心，胞质中的β-catenin与TCF / LEF结合后进入细胞核成为转录激活剂，最终激活Wnt靶基因，如C-Myc、细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、环氧合酶-2（COX-2）、c-Jun及纤连蛋白（FN）等。C-Myc是一种常见的原癌基因，可使细胞无限增殖获永生化功能，是调控细胞周期的主要基因，与多种肿瘤发生发展有关。C-Myc表达的变化与细胞的增殖及分化状态有关，其表达产物在调节细胞生长、分化或恶性转化中发挥作用。目前认为胰腺癌、胃癌、乳腺癌、结肠癌、宫颈癌等都有C-Myc基因的扩增或过度表达。Cyc1inDl基因又称PARDI，是Gl期细胞增殖信号的关键蛋白，是细胞周期素之一。CyclinD1能与细胞周期蛋白激酶（CDK4）结合激活成CDK4一CyclinD1复合物，与多种蛋白协同作用促进细胞由G1期向s期的过渡。Schuuring等研究表明Cyclin-D1扩增和蛋白表达在多种组织的癌变早期就已出现，且与肿瘤的浸润生长、淋巴转移及预后差有关。COX-2能激活环磷酸腺苷（cAMP）途径诱导肿瘤血管生成，并通过抑制机体免疫系统和改变肿瘤周围微环境而利于肿瘤的浸润转移，其代谢产物前列腺素E2（PGE2）能够刺激细胞增殖抑制凋亡。另外，COX-2高表达促使慢性炎症部位形成癌前微环境（PCM），其具有类似肿瘤微环境（CM）的生物特性可以促使慢性炎症向肿瘤转变。

近期有研究发现一种新型的基因-胰腺癌促进因子（PAUF），能够通过上调β-catenin的表达诱导胰腺细胞快速增殖，因此可推测β-catenin可能成为胰腺癌靶向治疗的目的基因。激活SIRT1基因能够在表达PAUF基因的胰腺癌细胞中下调β-catenin的表达，从而成为胰腺癌的一条治疗途径[30]。

3.2 Wnt/β-catenin信号通路对胰腺癌细胞浸润迁移的作用机制

Wnt2是循环肿瘤细胞（CTC）的候选基因，能够促进胰腺癌细胞的迁移，在人体中胰腺癌非贴壁肿瘤干细胞的形成与多种Wnt基因的上调有关。对galectin-3进行转染使β-catenin下调后，胰腺癌细胞的迁移和侵袭能力都受到抑制[31]。胰腺癌细胞与周围基质环境之间的相互作用中也出现Wnt信号通路的激活。有研究表明位于上皮组织的E-cad与β-catenin结合减少的胰腺癌患者往往预后较差。Krebs yon den Lundgen-6/Mucin 1敲除后，E-cad 和E-cad/β-catenin 复合体的表达都增加， 但核中的β-catenin， cyclin D1和c-myc的表达都减少，导致胰腺癌细胞的增殖减缓、凋亡增多和侵袭能力下降[32]。定位在细胞膜上的β-catenin受到E-cad的控制以维持细胞与细胞的粘附。在正常成体细胞中，胞质内的β-catenin大部分与E-cad及α-连环蛋白（α-catenin）结合形成复合体参与细胞骨架的调节，维持同型细胞的黏附，保证上皮的完整性，防止细胞转移，少部分游离的β-catenin在胞质内被降解复合体磷酸化后由泛素蛋白酶体识别并降解，保持胞内β-catenin血低水平状态。Wnt通路激活后β-catenin即与E-cad分离，使β-catenin由细胞膜解离而进入胞质和胞核，导致E-cad介导的细胞黏附连接作用丧失，使肿瘤细胞脱落、分散和移动，从而形成转移和浸润。Wnt信号通路的另一个组成部分APC，参与极化细胞的迁移和细胞间的粘附。早期有研究表明，APC定位在迁移细胞上与成束微管相连的细胞膜突出部分。最近有研究发现APC的分布与以整合素为基础的定向迁移粘附的信号复合体的激活相关。此外还发现与E-cad和β-catenin相关的粘合连接点上有一种APC同源体（E-APC），损伤E-APC位点会破坏细胞-细胞间的粘附，上调胞质中β-catenin的水平。Wnt信号通路异常除促进细胞增殖破坏细胞间粘附外还会促进血管内皮生长因子（VEGF）生成 ，同时上调基质金属蛋白酶（MMP）家族的表达，增加其对细胞外基质（ECM）的降解促进肿瘤细胞转移侵袭。CXCR4表达阳性患者的整体生存率显著低于阴性的患者，CXCR4的缺失会显著影响胰腺癌细胞的增殖和侵袭，Wnt靶基因如Vimentin and Slug也受到抑制。近期Criscimanna A等[33]发现缺氧能够促进胰腺癌的增殖、迁移和侵袭，缺氧诱导因子2α在胰腺上皮内瘤变的过程中通过维持Smad4的β-catenin的适当水平调节Wnt信号通路。

Dickkopf（DKK）基因蛋白产物是Wnt的拮抗剂，能够与Frizzled受体结合参与肿瘤的进展过程。在大部分胰腺癌细胞系中DKK-1的表达显著上调，而DKK-3表达水平较低，DKK-2与DKK-4则未检出。在胰腺癌细胞中敲除DKK-1导致其迁移能力下降，增殖与侵袭的能力也受到抑制。尽管DKK-1对于WNT信号通路起到拮抗作用，它在胰腺癌对周围组织的浸润过程中却起到重要作用。抗DKK1抗体能够抑制肿瘤细胞的侵袭和增殖能力，能够作为肿瘤诊断和治疗的潜在工具[34]。

4 展望

胰腺癌是一种恶性程度较高的肿瘤，死亡率在所有恶性肿瘤中居第4位。随着我国生活水平的提高和饮食结构的改变，近年来胰腺癌的发病率呈现上升趋势并且有年轻化的倾向。有研究显示胰腺癌患者5年生存率不超过5%，伴转移的中位生存时间不超过6个月。胰腺癌预后极差的原因一方面在于临床上约80%的胰腺癌患者在出现症状而就诊时已经存在转移，另一方面在于它对于放化疗均不敏感，虽然吉西他滨对部分患者能起到一定效果，但还没有任何一种化疗方案能延长转移性胰腺癌患者的生存中位数，因此开发新型抗胰腺癌药物尤为重要。

胰腺癌中Wnt/β-catenin信号通路的激活和调节方式意味着临床上胰腺癌可能更适合基因治疗或Wnt/β-catenin信号通路靶向治疗，β-catenin也可以作为胰腺癌预后判断的生物标志物。最近有研究表明阻断WNT通路配体和受体的相互作用以调制Wnt/β-catenin信号通路是一种合适的胰腺癌治疗方法。许多人造的Wnt通路调节物，包括分子类、多肽类、抗体类，在多种癌症的动物模型中表现出巨大的前景。实际上Wnt抑制剂OMP-18R5等靶向治疗Wnt/β-catenin信号通路的药物正在逐步发展到临床运用中，但只有极少数的Wnt/β-catenin通路抑制剂进展到临床试验早期阶段，包括IGC-001、CWP232291、??PRI-72等。除此之外，非甾体类抗炎药可以降低β-catenin的浓度，抑制Wnt通路。Dihlmann研究证实吲哚美辛和阿司匹林都可干扰β-catenin/TCF复合物功能来发挥抑癌作用。甲磺酸伊马替尼（格列卫）可选择地抑制血小板衍生生长因子（PDGF）受体，下调Wnt通路关键蛋白β-catenin水平，并能降低Cyclin D1、TCF/LEF等下游靶基因的表达，从而发挥抗癌的作用。

胰腺癌形成的起始步骤是MAPK/ERK信号通路的激活，是上皮内瘤变的关键步骤[35]。突变的Kras和Wnt通路协同推进其他组织的肿瘤发生，例如肺和结肠[36]。近期还发现黑色素瘤和结肠癌中都存在MAPK和Wnt通路的上位相互作用[37、38]，在黑色素瘤中Wnt抑制MAPK，而在结肠癌中Wnt稳定Ras从而提高MAPK的活性。大部分肿瘤中存在多通路的共同作用，鉴于Wnt与其他致瘤和抑瘤通路的相互作用，未来的研究不仅要能够将Wnt通路抑制剂应用到临床上，还应致力于进一步解决Wnt与其余信号通路网络之间相互串扰的机制问题。尽管未来充满挑战，Wnt/β-catenin信号通路的靶向治疗仍是一种很有前景的肿瘤治疗方法。

参考文献

[1] Janda CY， Waghray D， Levin AM， et al. Structural basis of Wnt recognition by Frizzled[J]. Science， 2012， 337 （6090）： 59-64.

[2] Li VS， Ng SS， Boersema PJ， et al. Wnt signaling through inhibition of beta-catenin degradation in an intact Axin1 complex[J]. Cell， 2012， 149 （6）： 1245-1256.

[3] Najdi R， Holcombe RF， Waterman ML. Wnt signaling and colon carcinogenesis： beyond APC[J]. Journal of carcinogenesis， 2011， 10： 5.

[4] Archbold HC， Yang YX， Chen L， et al. How do they do Wnt they do？： regulation of transcription by the Wnt/beta-catenin pathway[J]. Acta Physiol （Oxf）， 2012， 204（1）： 74-109.

[5] Bannister AJ， Kouzarides T. Regulation of chromatin by histone modifications[J]. Cell research， 2011， 21（3）： 381-395.

[6] van Veelen W， Le NH， Helvensteijn W， et al. beta-catenin tyrosine 654 phosphorylation increases Wnt signalling and intestinal tumorigenesis[J]. Gut， 2011， 60（9）： 1204-1212.

[7] Sugioka K， Mizumoto K， Sawa H. Wnt regulates spindle asymmetry to generate asymmetric nuclear beta-catenin in C. elegans[J]. Cell， 2011， 146（6）： 942-954.

[8] Sharma M， Jamieson C， Johnson M， et al. Specific armadillo repeat sequences facilitate beta-catenin nuclear transport in live cells via direct binding to nucleoporins Nup62， Nup153， and RanBP2/Nup358[J]. The Journal of biological chemistry， 2012， 287（2）： 819-831.

[9] Hikasa H， Sokol SY. Phosphorylation of TCF proteins by homeodomain-interacting protein kinase 2[J]. The Journal of biological chemistry， 2011， 286（14）： 12093-12100.

[10] Wray J， Kalkan T， Gomez-Lopez S， et al. Inhibition of glycogen synthase kinase-3 alleviates Tcf3 repression of the pluripotency network and increases embryonic stem cell resistance to differentiation[J]. Nature cell biology， 2011， 13（7）： 838-845.

[11] Benchabane H， Xin N， Tian A， et al. Jerky/Earthbound facilitates cell-specific Wnt/Wingless signalling by modulating beta-catenin-TCF activity[J]. The EMBO journal， 2011， 30（8）： 1444-1458.

[12] Lyashenko N， Winter M， Migliorini D， et al. Differential requirement for the dual functions of beta-catenin in embryonic stem cell self-renewal and germ layer formation[J]. Nature cell biology， 2011， 13（7）： 753-761.

[13] Valenta T， Gay M， Steiner S， et al. Probing transcription-specific outputs of beta-catenin in vivo[J]. Genes & development， 2011， 25（24）： 2631-2643.

[14] Losick VP， Morris LX， Fox DT， et al. Drosophila stem cell niches： a decade of discovery suggests a unified view of stem cell regulation[J]. Developmental cell， 2011， 21（1）： 159-171.

[15] Barker N， van Es JH， Kuipers J， et al. Identification of stem cells in small intestine and colon by marker gene Lgr5[J]. Nature， 2007， 449（7165）： 1003-1007.

[16] van Amerongen R， Bowman AN， Nusse R. Developmental stage and time dictate the fate of Wnt/beta-catenin-responsive stem cells in the mammary gland[J]. Cell stem cell， 2012， 11（3）： 387-400.

[17] Gat U， DasGupta R， Degenstein L， et al. De Novo hair follicle morphogenesis and hair tumors in mice expressing a truncated beta-catenin in skin[J]. Cell， 1998， 95（5）： 605-614.

[18] Sato T， van Es JH， Snippert HJ， et al. Paneth cells constitute the niche for Lgr5 stem cells in intestinal crypts[J]. Nature， 2011， 469（7330）： 415-418.

[19] ten Berge D， Kurek D， Blauwkamp T， et al. Embryonic stem cells require Wnt proteins to prevent differentiation to epiblast stem cells[J]. Nature cell biology， 2011， 13（9）： 1070-1075.

[20] Wood LD， Parsons DW， Jones S， et al. The genomic landscapes of human breast and colorectal cancers[J]. Science， 2007， 318（5853）： 1108-1113.

[21] Bass AJ， Lawrence MS， Brace LE， et al. Genomic sequencing of colorectal adenocarcinomas identifies a recurrent VTI1A-TCF7L2 fusion[J]. Nature genetics， 2011， 43（10）： 964-968.

[22] Arensman MD， Kovochich AN， Kulikauskas RM， et al. WNT7B mediates autocrine Wnt/beta-catenin signaling and anchorage-independent growth in pancreatic adenocarcinoma[J]. Oncogene， 2013.

[23] Yu M， Ting DT， Stott SL， et al. RNA sequencing of pancreatic circulating tumour cells implicates WNT signalling in metastasis[J]. Nature， 2012， 487（7408）： 510-513.

[24] Griesmann H， Ripka S， Pralle M， et al. WNT5A-NFAT signaling mediates resistance to apoptosis in pancreatic cancer[J]. Neoplasia， 2013， 15（1）： 11-22.

[25] Zhang Y， Morris JPt， Yan W， et al. Canonical Wnt Signaling Is Required for Pancreatic Carcinogenesis[J]. Cancer research， 2013， 73（15）： 4909-4922.

[26] Farhana L， Dawson MI， Das JK， et al. Adamantyl Retinoid-Related Molecules Induce Apoptosis in Pancreatic Cancer Cells by Inhibiting IGF-1R and Wnt/beta-Catenin Pathways[J]. Journal of oncology， 2012， 20（12）： 796-729.

[27] Thu KL， Radulovich N， Becker-Santos DD， et al. SOX15 is a candidate tumor suppressor in pancreatic cancer with a potential role in Wnt/beta-catenin signaling[J]. Oncogene， 2013.

[28] Sanchez-Tillo E， de Barrios O， Siles L， et al. beta-catenin/TCF4 complex induces the epithelial-to-mesenchymal transition （EMT）-activator ZEB1 to regulate tumor invasiveness[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America， 2011， 108（48）： 19204-19209.

[29] Takahashi N， Fukushima T， Yorita K， et al. Dickkopf-1 is overexpressed in human pancreatic ductal adenocarcinoma cells and is involved in invasive growth[J]. International journal of cancer Journal international du cancer， 2010， 126（7）： 1611-1620.

[30] Cho IR， Koh SS， Malilas W， et al. SIRT1 inhibits proliferation of pancreatic cancer cells expressing pancreatic adenocarcinoma up-regulated factor （PAUF）， a novel oncogene， by suppression of beta-catenin[J]. Biochemical and biophysical research communications， 2012， 423（2）： 270-275.

[31] Kobayashi T， Shimura T， Yajima T， et al. Transient gene silencing of galectin-3 suppresses pancreatic cancer cell migration and invasion through degradation of beta-catenin[J]. International journal of cancer Journal international du cancer， 2011， 129（12）： 2775-2786.

[32] Xu H， Inagaki Y， Seyama Y， et al. Expression of KL-6/MUC1 in pancreatic cancer tissues and its potential involvement in tumor metastasis[J]. Oncology reports， 2011， 26（2）： 371-376.

[33] Criscimanna A， Duan LJ， Rhodes JA， et al. PanIN-Specific Regulation of Wnt Signaling by HIF2alpha during Early Pancreatic Tumorigenesis[J]. Cancer research， 2013， 73（15）： 4781-4790.

[34] Sato N， Yamabuki T， Takano A， et al. Wnt inhibitor Dickkopf-1 as a target for passive cancer immunotherapy[J]. Cancer research， 2010， 70（13）： 5326-5336.

[35] Collisson EA， Trejo CL， Silva JM， et al. A central role for RAF-->MEK-->ERK signaling in the genesis of pancreatic ductal adenocarcinoma[J]. Cancer discovery， 2012， 2（8）： 685-693.

[36] Pacheco-Pinedo EC， Durham AC， Stewart KM， et al. Wnt/beta-catenin signaling accelerates mouse lung tumorigenesis by imposing an embryonic distal progenitor phenotype on lung epithelium[J]. The Journal of clinical investigation， 2011， 121（5）： 1935-1945.

[37] Jeong WJ， Yoon J， Park JC， et al. Ras stabilization through aberrant activation of Wnt/beta-catenin signaling promotes intestinal tumorigenesis[J]. Science signaling， 2012， 5（219）： ra30.

[38] Biechele TL， Kulikauskas RM， Toroni RA， et al. Wnt/beta-catenin signaling and AXIN1 regulate apoptosis triggered by inhibition of the mutant kinase BRAFV600E in human melanoma[J]. Science signaling， 2012， 5（206）： ra3.