香榧假种皮提取物对潜叶跳甲的杀虫活性初步研究

单麟珉　孙小红

摘要：為研究香榧（Torreya grandis cv. Merrilli）假种皮的杀虫活性，采用液-液萃取分离法对香榧假种皮乙醇提取浸膏进行萃取分离（石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇），并采用水蒸气蒸馏法提取挥发油，采用叶碟浸渍法分别测定5种提取物对潜叶跳甲（Argopistes tsekooni）的杀虫活性。结果表明，5种处理液均有较好的杀虫活性，且浓度越高杀虫活性越强。石油醚提取物的杀虫活性最好，浓度达到200 mg/mL以上时处理96 h的校正死亡率达到100%，其次为氯仿提取物。毒力测定结果表明，石油醚提取物LD50最小，为32.82 mg/mL。因此，香榧假种皮提取物表现出较好的抑虫活性，具有进一步研究开发的价值。

关键词：香榧（Torreya grandis cv. Merrilli）假种皮；提取物；女贞潜叶跳甲（Argopistes tsekooni Chen）；杀虫活性

中图分类号：S482.39 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）09-2060-03

香榧（Torreya grandis cv. Merrilli）又名“中国榧”，也被称为榧树、玉榧、野杉子等，为红豆杉科（Taxaceae）榧属（Torreya）常绿乔木，中国原产树种，是世界上稀有的经济树种之一[1]。主要分布在中国南方较为湿润的地区，主产江苏南部、浙江、福建、江西、安徽、湖南、贵州等地。香榧种子的外层为较厚的肉质化假种皮，约占种子鲜重的50%～60%[2]。一直以来，假种皮被视为废弃物堆弃在房前屋后和溪流边，通常会散发出浓重的异味，污染环境。如何开发利用香榧假种皮，防止其造成环境污染，一直是榧农关注且亟待解决的问题。目前对香榧假种皮的开发利用研究尚处于起步阶段，少数学者正在从事关于香榧假种皮精油的化学成分以及药理的研究，香榧假种皮中含有醇、酮、醛、烯等20余种芳香油成分[3]，用途广泛，可用于调制花香、清香型香精，在化妆品、肥皂、日用香料等行业逐步得到重视。

金叶女贞（Ligustrum vicaryi）嫩梢金黄，近年来被广泛应用在街道、公园、广场的绿化中，但其深受潜叶跳甲（Argopistes tsekooni）危害。金叶女贞叶片受害后由金黄色变为褐色，并大量干枯脱落，严重影响金叶女贞长势和绿化效果[4]。迄今为止，鲜有关于金叶女贞上潜叶跳甲的防治研究报道。为了更充分地利用香榧这一植物资源，本研究考察了香榧假种皮提取物对园林害虫潜叶跳甲的杀虫活性，为新植物源杀虫剂的开发提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

香榧假种皮收集自浙江省绍兴市，经绍兴文理学院元培学院金自学教授鉴定为香榧假种皮，置于阴凉通风处自然阴干，备用。潜叶跳甲成虫采自野外金叶女贞树，经专家鉴定为潜叶跳甲，挑选大小、活性基本一致的成虫，饥饿24 h供试。

1.2 方法

1.2.1 香榧假种皮提取物及挥发油的制备 取粉碎后的香榧假种皮样品400 g，用体积分数95%的乙醇进行回流提取，并减压浓缩。取浸膏分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，减压浓缩后得石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇4种溶剂提取物浸膏，放入冰箱冷藏备用。

采用蒸馏法对香榧假种皮进行精油提取：称取香榧假种皮的干粉50 g，置圆底烧瓶中，加入适量的蒸馏水，提取4 h，分离出挥发油层，用无水硫酸钠干燥，收集于磨口试管中，备用。

2.1 香榧假种皮提取物对潜叶跳甲的杀虫活性

香榧假种皮提取物对潜叶跳甲的杀虫活性见表1。从表1可以看出，各处理对潜叶跳甲均有不同程度的杀虫活性。其中，石油醚提取物的活性最强，当浓度达到200 mg/mL时处理96 h的校正死亡率达到100%；其次是氯仿提取物，高浓度（400 mg/mL）的氯仿提取物处理96 h后，校正死亡率也达到100%。正丁醇和乙酸乙酯提取物的杀虫活性相对较低，但高浓度（400 mg/mL）的乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物处理96 h后，校正死亡率也分别达到了72.22%和88.89%。挥发油的杀虫活性也较强，仅次于氯仿提取物，400 mg/mL的挥发油溶液处理96 h，校正死亡率高达94.44%。同时从表1可以看出，随着处理时间的延长，成虫死亡率增加。在试验中发现香榧提取物对潜叶跳甲的抑制作用主要是拒食，而对照组明显有啃食痕迹。各提取物及挥发油对潜叶跳甲都有一定的拒食活性，且浓度越高对潜叶跳甲的拒食率越高，部分药物高浓度组的叶片基本没有被啃食的迹象，并最终导致害虫死亡。

2.2 香榧假种皮提取物对潜叶跳甲毒力测定结果

3 小结与讨论

化学农药用于防治作物害虫以来曾为农业增产做出了巨大的贡献，但如何减少或避免长期广泛使用农药带来的残留、抗性、再猖獗等问题，是世界各国农药研究的发展趋势，而植物来源的杀虫剂存在着极大的开发潜力。

本研究利用香榧生产过程中的废弃物——香榧假种皮提取物，测定其对潜叶跳甲成虫的杀虫活性。结果表明，石油醚提取杀虫物效果最好，且随着处理时间的延长成虫死亡率增加。不同溶剂的提取物的杀虫效果之间存在差异性，有些组的叶片被啃食较多，而杀虫效果好的几组叶片基本没有被啃食，这可能与各溶剂提取物中的活性物质有关。潜叶跳甲的取食行为被抑制的原因可能是感受器信息输入中断，也可能是中枢神经特化的“抑食细胞”受到刺激，亦或两者兼而有之[8]，生物活性物质不同，其作用方式和机制不同，就会产生很大的生物学效应差异[9]，都需要作进一步研究。

试验中观察到石油醚提取物饲喂和氯仿提取物饲喂4 d后的死亡率最高，笔者认为造成这种现象的原因除了提取物本身的毒性外，还因为拒食作用使虫体处于饥饿状态，体质下降而引起死亡。

用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇4种溶剂从香榧假种皮中提取的活性成分及挥发油均具有杀虫活性，说明香榧假种皮含有抑制潜叶跳甲的活性成分。本试验确定石油醚以及氯仿提取物的杀虫效果最好，但目前还无法确定是哪种化学成分起到杀虫效果，对于香榧假种皮杀虫活性成分的分离纯化及鉴定需要进一步研究。以上试验结果均为室内生物测定所得，相关的田间试验有待进一步研究。

参考文献：

[1] 周大铮，易杨华，毛士龙，等.香榧假种皮的二萜类成分[J].中草药，2002，33（10）：877-879.

[2] 陈 阳，孙小红，陈祉旖，等.香榧假种皮挥发油及石油醚提取物的GC-MS分析[J].湖北农业科学，2012，51（8）：1670-1672.

[3] 鲍建峰.香榧假种皮提取物成分分析及功能研究[D].杭州：浙江大学，2010.

[4] 覃建美，罗宏果.女贞潜叶跳甲的为害与防治[J].南方农业，2008， 2（8）：31.

[5] 苏 秀，马良进，李 健，等.山核桃外果皮提取物的杀虫活性[J].东北林业大学学报，2010，38（11）：128-129.

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[8] 陆秀红，刘志明，刘纪霜，等.白花曼陀罗叶总碱提取物杀线活性及其作用机理研究[J].中国农学通报，2006，22（12）：331-334.

[9] 雷 霁，梁婷婷，冉俊祥，等.曼陀罗水提取物对小菜蛾的拒食及毒杀活性[J].西北农业学报，2012，21（1）：175-179.