鸡新城疫疫苗研究及应用概况

宫晓 程增青 李陆梅等

摘要：介绍了鸡新城疫病的流行情况及疫苗的应用现状，概述了灭活疫苗、活疫苗及基因工程苗等主要的鸡新城疫疫苗研究及应用现状，旨为鸡新城疫疫苗的研制和应用提供一定的参考依据。

关键词：新城疫；疫苗；研制；应用

中图分类号：S858.31 文献标识码：B 文章编号：1007-273X（2013）09-0065-02

1 新城疫流行情况及疫苗应用现状

鸡新城疫又叫亚洲鸡瘟。它是一种由副粘病毒引起的高度接触性、急性败血性传染病。主要感染禽，也可感染人类。该病流行于很多国家，给世界养殖业造成很大的威胁，被世界卫生组织定为A类疫病[1]。新城疫自1926年被确认以来，在世界范围内广为传播已有80多年，给养禽业带来了巨大的经济损失，迄今仍是禽类最重要的疾病之一。新城疫病毒自1946年在我国首次分离至今已在中国存在了60多年，自20世纪90年代以来，临床上非典型新城疫的发生现象十分普遍，在鹅群及鸭群中均有发生[2-4]，说明新城疫的易感宿主范围在进一步扩大。由于疫苗的广泛应用，目前的NDV流行株基因型已发生较大改变，流行病学调查充分显示，基因Ⅶd亚型在我国当前NDV流行株中占有绝对优势，与经典疫苗Lasota 株（基因Ⅱ型）核苷酸同源性不足78%。扬州大学[5]、中国动物疫病流行中心[6，7]、山东农科院家禽所[8]等在流行病学调查中均显示我国近几年基因Ⅶ型NDV流行十分普遍。目前国内外企业生产的新城疫疫苗毒株有10余株，其中Lasota毒株制备的活疫苗、灭活疫苗占据优势地位。

2 疫苗种类

2.1 灭活疫苗

目前预防鸡新城疫的灭活疫苗使用较多的为油乳剂灭活疫苗，国内生物制品厂家多用Lasota株，梅里亚用Ulster2c株、英特威用Clone-30株制备疫苗。评价疫苗质量的主要因素在于毒株的免疫原性及病毒含量的高低。目前，疫苗效力均已达到国际上要求的灭活苗标准，可用于不同日龄的鸡，主要通过颈部皮下及肌肉注射途径免疫。

2.2 活疫苗

目前新城疫弱毒活疫苗有I系、Ⅱ系、Ⅳ系、Clone-30、CS2、VG/GA、HB1、Mukteswar、ZM10、N79、F、Ulsterzc、V4/HB92克隆株、VH株等几种。

2.2.1 I系苗 为中等毒力，主要由Mukteswar株制备，对雏鸡有一定的致病性。60日龄以上鸡才可以用。用法为肌肉注射，不能点眼、滴鼻或饮水，接种后产生免疫力很快，7～10 d抗体水平上升到高峰，随后缓慢下降。同低毒力疫苗相比，免疫期较长。I系苗不能用于产蛋鸡，否则可引起产蛋量大幅下降，蛋壳变劣，且恢复缓慢。

2.2.2 CS株 为中等毒力，免疫效果与普通I系苗相似但毒力稍温和，安全性较优。鸡群1月龄以上才可使用，且此前至少接种过1次新城疫低毒力苗，不能用于初生雏鸡；产蛋鸡不宜接种；在有成鸡和雏鸡的鸡场，应注意消毒隔离，避免苗毒的传播引起雏鸡死亡。接种方法只能肌肉注射。

2.2.3 Ⅱ系苗 毒力弱，通常只用于雏鸡首免，安全性好，但产生免疫力较慢较弱。用法为点眼、滴鼻，不能饮水。

2.2.4 Ⅳ系苗（Lasota株） 是国内外广泛应用的优良低毒力苗，其毒力与免疫性能高于Ⅱ系苗，安全性良好。7日龄以上的健康雏鸡、青年鸡、产蛋鸡均可使用。用法可滴眼、滴鼻、饮水或肌肉注射，雏鸡首免可点眼、滴鼻。

2.2.5 Clone-30株 该疫苗最早是荷兰研制者应用克隆技术，由Lasota株优化制成。其免疫效果与Ⅳ系苗相似而毒力较温和，能突破母源抗体障碍，从1日龄雏鸡至成年鸡均可使用。用法可点眼、滴鼻、饮水或肌注，雏鸡首免可点眼、滴鼻。

2.2.6 N79株 是美国应用克隆技术对Ⅳ系苗加以优化而制成，滴鼻、点眼、饮水免疫均可。

2.2.7 VH株 是以色列用新城疫病毒自然弱毒株制成的一种低毒力苗，毒力温和而稳定，主要用于雏鸡首免。通常应用的是该毒与传支制成的联苗，如VH+H120+28/86，用法可点眼、滴鼻。

2.2.8 其他新城疫低毒力苗 有法国的“卫鸡城”活疫苗与VG/GA株活疫苗、ZM10株活疫苗、V4/HB92克隆株活疫苗、HB1株活疫苗、F株活疫苗等，其主要优点是免疫原性好而毒力温和，呼吸道反应轻微，可饮水、点眼、滴鼻。

2.3 基因工程苗

随着分子生物学及重组DNA技术的发展，基因工程疫苗的研究不断深入，传统的全病毒疫苗存在诸多缺陷，利用基因工程技术开发疫苗是目前疫苗研究的热点，但商品化的产品较少。国内外一些实验室从20世纪80年代末开始利用重组DNA技术研制ND基因工程疫苗。目前，ND基因工程苗主要有DNA疫苗、亚单位苗、活载体疫苗、多肽苗和转基因植物疫苗等几种。

2.3.1 亚单位苗 是将NDV保护性抗原基因在原核或真核系统中表达所获得的产品制成的疫苗，具有安全性高，稳定性好，便于保存运输，易于批量生产的优点。有研究利用相同系统表达的NDV长春株的HN蛋白作为亚单位疫苗，雏鸡可抵抗NDV强毒攻击，并可获得100%的保护。扬州大学[9]利用反向遗传操作构建的基因Ⅶ型疫苗为经过改造的Ⅶ型毒株与大多数流行株一致，为基因Ⅶd亚型，可有效降低喉气管和泄殖腔中的排毒率，对鹅、鸭等水禽具有更好的免疫效果，比经典疫苗Lasota株产生更高的抗体。

2.3.2 DNA 疫苗 具有能够激发机体体液免疫和细胞免疫反应、不散毒、便于储存和运输等优点。DNA疫苗不仅可诱导体液免疫应答，而且还可诱导细胞免疫应答，并兼有亚单位苗的安全性和弱毒疫苗的高效性，已经成为国际疫苗研究领域最热门的课题之一。2005年底农业部宣布，中国已成功研制出禽流感-新城疫重组二联活疫苗，并正式批准生产。

2.4 联苗

新城疫在我国主要养殖区域流行相当普遍，尤其与其他疾病混合感染的情况也很常见，因此在进行新城疫疫苗免疫的同时还要对其他禽病进行疫苗免疫。为了减少对鸡的免疫次数和应激，多采用联苗来防治鸡的各种疾病。国内外新城疫联苗正处于研制及推广应用阶段，已显示出其打一针可防数病的优越性。国内灭活疫苗产品有新支二联、新流二联、新法二联、新病二联、新支减三联、新支流三联、新支法三联、新流法三联、新支法关四联、新支流法四联等相关产品，活疫苗有新支二联等，市场应用效果较好。

3 应用展望

从以上介绍来看，灭活疫苗接种剂量较大，接种后通常需2～3周后才能产生免疫力，不能用作紧急预防免疫。活疫苗能刺激产生局部免疫，免疫后很快得到保护。亚单位疫苗虽然安全性高，稳定性好，便于保存运输，易于批量生产，但是市场应用效果一般，故目前市场仍然采用活疫苗加灭活苗的免疫程序进行鸡新城疫的预防。

据市场跟踪调查，新城疫活疫苗每个月用一次，灭活苗2～3个月免疫一次，使用频率如此之高，但新城疫病毒仍不能得到有效控制，有研究者提出，鸡新城疫虽然只有一个血清型，但由于疫苗株与当前流行株之间的基因型和抗原差异性，免疫鸡群中也会不同程度地感染强毒，目前常用新城疫疫苗毒株与当前流行毒株基因型不匹配，免疫保护力不足。新城疫新型疫苗对控制我国新城疫病毒流行有着非常广阔的应用前景，并且实验室的数据表明，使用与流行株同型的基因Ⅶ型疫苗可以有效降低免疫鸡群中新城疫强毒的携带量及感染率。秦卓明等[10]对国内大量新城疫病毒（NDV）血凝素基因F和HN的测序表明，NDV主要免疫原HN和F基因与生产中广泛应用的经典疫苗Lasota 株的核苷酸同源性不足80%，而NDV流行株之间的同源性则高达94.4%～100%，从分子遗传学角度证实了VIId型NDV是导致新城疫免疫失败的重要原因。HI交叉抑制试验和鸡胚中和试验等则从抗原性的角度证实了NDV在免疫压力下抗原性的变化。

新城疫目前没有特效药物及疫苗，只能以预防为主，根据当地的发病特点、流行趋势和规律，用高质量的疫苗，科学的免疫程序，加强饲养管理与隔离消毒，才是防治ND的关键。因而筛选出优质高效的VIId型NDV毒株制备灭活疫苗或者活疫苗，有可能在今后的生产上替代现有的疫苗，而被广泛使用。参考文献：

[1] 甘孟侯.中国禽病学[M].北京：中国农业出版社，1999.

[2] 宋战胜，王晶钰，赵 伟，等.鸭源新城疫病毒的分离鉴定[J].动物医学进展，2007，28（5）：22-25.

[3]张训海，朱鸿飞，陈溥言，等. 鸭副粘病毒强毒株的分离和鉴定 [J]. 中国动物检疫，2001，18（10）：24-26.

[4] 陈金顶，廖 明，辛朝安.鹅Ⅰ型禽副粘病毒GPMV/QY97 -1株HN 基因的克隆和序列分析[J].病毒学报，2003，19（4）：355-359.

[5] 姚春峰，刘文博，刘秀梵，等.新城疫病毒分离株的生物学特性鉴定

及F 蛋白基因序列分析 [J].病毒学报，2009，25（2）：117-124.

[6] LIU H， WANG Z， WU Y， et al. Molecular epidemiological analysis of Newcastle disease virus isolated in China in 2005[J]. J Virol Methods， 2007， 140（1-2）：206-211.

[7] LIU H， WANG Z， WU Y， et al. Molecular characterization and phylogenetic analysisof new Newcastle disease virus isolates from the mainland of China[J]. Res Vet Sci， 2008， 85 （3）：612-616.

[8] QIN Z M，TAN L T，XU H Y，et al. Pathotypical characterization and molecular epidemiology of Newcastle disease virus isolates from different hosts in China from 1996 to 2005[J].J Cin Microbiol，2008，46（2）：601-611.

[9] HU S L，MA H，WU Y，et al. A vaccine candidate of attenuated genotype VII Newcastle disease virus generated by reverse genetics[J]. Vaccine，2009，27（6）：904-910.

[10] 秦卓明，徐怀英，刘玉山，等.疫苗免疫压力下新城疫病毒的动态演化[J].中国兽药杂志，2013，47（2）：1-6.