复方银红滴丸的急性毒性研究

朱光怡　王翠媛　朱丹

摘要：采用与临床应用相同的给药途径对小鼠和大鼠分别灌胃给予复方银红滴丸，测定其急性毒性和最大耐受量。结果表明，在急性毒性试验中，受药液浓度及灌胃容积的限制而未能测出半数致死量（LD50），测定复方银红滴丸对大鼠的的最大耐受量（MTD）为279 g/kg。说明在本试验条件下，复方银红滴丸对受试动物未见明显的急性毒性，按急性毒性分类，属无毒级，表明该制剂具有良好的安全性。

关键词：复方银红滴丸；最大耐受量；急性毒性

中图分类号：S853.9 文献标识码：A 文章编号：1007-273X（2013）09-0013-02

复方银红滴丸是根据中医药学和现代医学理论，精选红花、金银花等道地药材，经现代工艺技术提炼精制而成的复方中药制剂，其应用简单、经济，对治疗奶牛乳房炎有独特疗效。为客观、科学地评价复方银红滴丸的安全性，并为该产品的开发提供理论依据，现对其进行急性毒性研究。

1 材料与方法

1.1 受试药物

复方银红滴丸，自制（生产批号：YH-001、YH-002、YH-003），每克含生药干膏0.63 g。临用前用蒸馏水配成最大浓度（0.667 g生药/mL）的混悬液。

1.2 受试动物

健康KM种小鼠20只，清洁级，体重（20.0±2.0 ）g，雌雄各半，由佳木斯大学实验动物中心提供，动物合格证号：19-082。

健康Wistar大鼠20只，清洁级，体重（200.0±10 .0）g，雌雄各半，由佳木斯大学实验动物中心提供，动物合格证号：19-085。

1.3 动物饲料

配方的营养成分组成：水分8.53%，粗蛋白25.10%，精蛋白24.6%，粗脂肪7.33%，粗灰分7.50%，精纤维21.4%，无氮浸出物48.4%，能量18.17 MJ/kg。

1.4 饲养条件

空调动物室，温度（22±2）℃，相对湿度（60±5）%，动物每笼5只，定时定量添加饲料，自由饮水，每周更换垫料3次。

1.5 试验方法

试验在空调恒温实验室进行，室内恒温25 ℃，光线充足，排风扇排风，空气流通良好，环境安静，清洁，对试验结果影响较小。试验前1周购进小鼠，强化饲养，适应环境。

1.5.1 测定复方银红滴丸对小鼠的半数致死量（LD50） 选取健康小鼠20只雌雄各半，给药前禁食14 h，不禁水。按文献方法[1，2]随机分组，实验动物灌胃给予复方银红滴丸，以药物的最大浓度（50%）和动物能耐受的最大容积（0.8 mL/20 g）在24 h内连续灌胃给药2次（每日上午8：00、下午14：00各灌胃一次），每次0.4 mL。严密观察小鼠给药后的反应，逐日观察并记录小鼠的行为活动、步态、皮毛、呼吸、大小便、食欲及摄食量、体重、鼻、眼、口腔有无异常分泌物等情况及动物死亡数，试验后即刻及连续观察7日，求出半数致死量，并确定急性毒性分级。

1.5.2 测定复方银红滴丸对大鼠的的最大耐受量（MTD） 选取健康大鼠20只雌雄各半，给药前禁食12 h，不禁水。按文献方法[3]随机分组，实验动物灌胃给予复方银红滴丸，最大体积2 mL/20 g（剂量279 g/kg，相当于临床日用药剂量的386.2倍），上下午各灌胃1次。给药后观察动物的体征、行为活动、精神状态等，连续观察16 d，定期称重，计算体重变化，并同对照组作比较。于第16天处死动物，尸检，肉眼观察主要脏器的外观变化。

1.6 数据处理

试验验数据以平均数±标准差表示，用统计软件SPSS 12.0处理。

2 结果与分析

试验观察中可见，小鼠灌胃给予复方银红滴丸后，出现自主活动减少、闭眼、卧伏等现象，食欲有所下降，粪便呈褐色，所有体征在给药2 h后基本恢复正常。在连续7 d中一般情况良好，无明显异常症状；步态活动、行为、精神状态正常，毛色光亮，摄食饮水情况良好，无震颤、扭体及翘尾，鼻、眼、口腔无异常分泌物，未显现呼吸兴奋及抑制现象，大小便正常。7 d内小鼠无一例死亡，亦未见明显毒性反应；7 d后断颈处死实验小鼠，经解剖和尸检未发现内脏器官异常。

大鼠在灌胃给予复方银红滴丸后，亦出现自主活动减少的现象，然后进入闭眼、静卧不动状态，食欲有所下降，呼吸无明显变化，粪便呈褐色，所有体征在给药1 h后基本恢复正常。同对照组比较，大鼠在给药后1～16 d内的体重变化无显著性差异（表1）。16 d内无动物死亡，经解剖和尸检未发现大鼠主要脏器因毒性作用引起的改变。

3 小结与讨论

小鼠灌胃给予复方银红滴丸未引起明显的毒性反应，无动物死亡，按急性毒性分级标准规定，该受试物属于无毒级。大鼠灌胃给予复方银红滴丸的最大耐受量为279 g/kg（折合原生药总量计），相当于临床用量386.2倍。急性毒性试验结果表明复方银红滴丸的毒性低，临床用药安全。

参考文献：

[1] 谢秀琼.中药新制剂开发与应用[M].第二版.北京：人民卫生出版社，2000.540.

[2] 陈 奇.中药药理研究方法学[M].第一版.北京：人民卫生出版社，1993.112-130.

[3] 张均田.现代药理实验方法学[M].第一版.北京：北京医科大学协和医科大学联合出版社，1998.1816-1821.