茶多酚对维持性血液透析患者认知功能和炎性因子的影响

刘学义，张 靖，高山林，郭志军

维持性血液透析(MHD)患者普遍存在记忆力减退、注意力不集中、反应迟钝、工作效率降低及思维不敏捷等认知功能的障碍。认知功能严重障碍会降低血液透析患者执行透析及药物治疗的依从性，影响患者日常生活，甚至危及患者的生命[1]。改善认知功能可以提高MHD患者的生活质量及改善预后。研究报道饮茶及茶叶提取物可以改善认知功能[2]，茶多酚是从天然植物茶叶中分离提纯出来的一组成分复杂、分子量不同、性质与结构差异很大的多酚类衍生物的总称，具有抗炎、抗氧化及神经保护作用[3]。Alvarez等[4]研究显示白介素6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)等炎性因子对情绪及记忆功能有负性作用。本次研究以客观、灵敏、特异性较强的电生理学指标——事件相关电位P300作为评价大脑认知功能的指标，以核因子κB(NF-κB)、TNF-α、IL-6等作为炎性指标，观察茶多酚对MHD患者认知功能的影响及探讨影响机制。

1　对象与方法

1.1研究对象2012年1—9月，选择唐山市工人医院血液透析中心MHD老年患者60例，依照完全随机设计分成常规组31例及茶多酚组29例。常规组男16例，女15例，平均年龄为(67±7)岁；茶多酚组男15例，女14例，平均年龄为(65±6)岁。入选标准：(1)连续规律透析大于3个月；(2)意识清楚、精神正常、听力正常、锥体束征阴性。排除标准：(1)患有糖尿病、急慢性肝病、急慢性感染、恶性肿瘤、自身免疫性疾病；(2)近1个月内使用过糖皮质激素、降脂药、维生素C、维生素E等药物；(3)脑血管病、癫痫、阿尔茨海默病、帕金森病等神经系统疾病。所有患者均采用以下透析方案：维持性碳酸氢盐血液透析治疗，钙离子浓度1.5 mmol/L，每周透析3次，每次4 h，透析液流量500 ml/min，血流量250 ml/min，透析机为贝朗血液透析机，每次透析使用一次性Nipro130A透析器，血管通路为动静脉内瘘。高血压者给予口服钙拮抗剂；常规静脉补充铁剂，皮下注射促红细胞生成素。茶多酚组口服茶多酚片(浙江大学茶业科技开发公司)每次2片(含0.9 g茶多酚)，每日3次；常规组口服安慰剂，每次2片，每日3次。组间性别、年龄具有均衡性，所有患者均知情同意。

1.2研究方法

1.2.1标本收集茶多酚组及常规组患者于上机前均采集空腹外周静脉血各5 ml，分离血清，以0.2%乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝，-70 ℃保存备检。另采集静脉血5 ml，应用淋巴细胞分离液(Ficoll hypaque，密度为1.077)分离单核细胞，按照试剂说明书提取核蛋白，并于-70 ℃保存备检。

1.2.2检测指标3个月后检测炎性反应指标：NF-κB、IL-6和TNF-α；认知功能指标：事件相关电位P300潜伏期及波幅。

1.2.3检测方法IL-6、TNF-α及NF-κB的测定均采用酶联免疫法(ELISA)，试剂盒购自美国RD公司。事件相关电位P300检测方法：采用德国椰格公司生产的Neauroscrean Plus型肌电诱发电位仪，在屏蔽隔音室中进行，受试者保持觉醒状态及注意力集中。按国际10/20电极安置法，记录电极置于Fz电，参考电极置于一侧耳垂，前额接地，电极与皮肤间阻抗<5 kΩ，受试者接受双耳听觉Oddball程序刺激，分析时间1 000 ms，声强80 dB，靶刺激为高频短音(2 kHz)，20%概率出现；非靶刺激为低频短音(1 kHz)，80%概率出现。两种刺激随机出现，要求受试者对靶刺激通过按键做出反应。由经过培训的专人进行操作，每例受试者均先行预试，待受试者明确方法后再进行正式检测。每例重复4次，每轮靶刺激20次，受试者默记靶刺激，结果误差>10%作废。计算机自动分析P300波的潜伏期(PL)及波幅(Amp)，最后取4次P300波的潜伏期(PL)及波幅(Amp)平均值。

2　结果

2.1常规组及茶多酚组NF-κB活性、TNF-α及IL-6的比较茶多酚组与常规组相比，NF-κB、TNF-α及IL-6差异均有统计学意义(P<0.01，见表1)。

表1常规组及茶多酚组NF-κB活性、TNF-α及IL-6的比较

Table1Comparison of activity of NF-κB，TNF-α and IL-6 between conventional group and TP group

组别例数NF-κB(%)TNF-α(mg/L)IL-6(μg/L)常规组3187.7±23.288±23106±26茶多酚组2972.6±19.969±25 88±22 t值 2.69 2.98 3.05P值<0.01<0.005<0.005

注：NF-κB=核因子κB，IL-6=白介素6，TNF-α=肿瘤坏死因子α

2.2常规组及茶多酚组认知功能的比较茶多酚组与常规组相比，P300潜伏期及波幅差异均有统计学意义(P<0.01)，P300异常率差异无统计学意义(P>0.05，见表2)。

表2常规组及茶多酚组P300潜伏期及波幅比较

Table2Comparison of P300 latency and amplitude between conventional group and TP group

组别例数P300潜伏期(ms)P300波幅(μV)P300异常率(%)常规组31387±28 9.7±2.0 75.9茶多酚组29365±3311.2±2.374.2检验统计量值 2.76 2.72 0.01*P值<0.01<0.01>0.05

注：*为χ2值，余检验统计量值为t值

3　讨论

在现代医学的生物-心理-社会模型中，患者生活质量成为评价临床治疗效果的重要指标。认知功能是影响老年人生活质量的重要因素。MHD患者普遍存在记忆力减退、注意力不集中、反应迟钝、工作效率降低及思维不敏捷等认知功能的障碍[1]。Park等[2]研究结果显示绿茶提取物可以改善轻微认知功能损害患者的记忆力及注意力。目前关于茶多酚对MHD患者认知功能的影响报道较少。本研究以事件相关电位P300作为认知功能的指标，就茶多酚对MHD患者认知功能的影响及可能的机制进行了初步探讨。

茶多酚是多酚类化合物的总称，是一种天然的活性物质，具有抗炎、抗氧化及神经保护作用[4]。本研究结果显示MHD患者应用茶多酚后认知功能与常规透析组相比P300潜伏期延长及波幅缩短，与其他报道结果相符。Lee等[5]发现茶多酚能够抑制NF-κB活性，进而保护神经细胞免受损伤。NF-κB是一种广泛存在于多种类型细胞中的一种转录因子，能调控细胞因子、酶及其他促炎性反应因子的基因表达。在任何类型的炎性反应中，均能观察到NF-κB活性的增强，抑制NF-κB的活性可以抑制炎性的发展。TNF-α可以激活NF-κB，NF-κB激活后可以促进IL-6及TNF-α的表达[6]。维持性血液透析患者普遍存在微炎性状态，主要表现为C反应蛋白(CRP)、IL-6和TNF-α等水平增高[7]。Mattson等[8]研究药物阻断NF-κB或敲除IL-6可以抵抗小鼠的类抑郁行为。Alvarez等[4]研究显示抗痴呆药物脑活素可以减少血浆TNF-α的表达。上述研究显示炎性细胞因子参与了认知功能的损害，并且与NF-κB的调控相关。本研究中MHD患者应用茶多酚后微炎性状态得到改善，IL-6、TNF-α及NF-κB水平下调，与常规组相比有差异。由于茶多酚可以抑制NF-κB活性，并且口服经肠吸收后分布广泛，可透过血脑屏障进入脑细胞[9]，推测茶多酚一方面经肠道吸收后通过血脑屏障进入脑细胞通过抑制NF-κB，进而下调IL-6、TNF-α的表达，改善了患者的认知功能；另一方面茶多酚通过减少血浆TNF-α水平，进而抑制了NF-κB活性，从而改善了认知功能。

茶多酚天然的具有抗氧化、抗炎、降脂、免疫调节、抑菌作用、防治动脉硬化、抗肿瘤等多方面作用，而这些作用与维

持性血液透析患者的预后密切相关。由于茶多酚在改善微炎性状态及改善认知功能的同时还可以获得保护心血管及降脂等诸多收益，在维持性血液透析老年患者的治疗中值得推广应用。

1崔立文，徐金升，白亚玲，等.维持性血液透析患者流行病学特征分析[J].河北医药，2010，32(17)：2429.

2Park SK，Jung IC，Lee WK，et al.A combination of green tea extract and l-theanine improves memory and attention in subjects with mild cognitive impairment：A double-blind placebo-controlled study[J].J Med Food，2011，14(4)：334-343.

3李琼，李勇.绿茶多酚防治老年神经退行性疾病研究进展[J].卫生研究，2010，39(1)：123-126.

4Alvarez XA，Sampedro C，Cacabelos R，et al.Reduced TNF-α and increased IGF-I levels in the serum of Alzheimer′s disease patients treated with the neurotrophic agent cerebrolysin[J].Int J Neuropsychopharmacol，2009，12(7)：867-872.

5Lee SY，Lee JW，Lee H，et al.Inhibitory effect of green tea extract on beta-amyloid-induced PC12 cell death by inhibition of the activation of NF-kappaB and ERK/p38 MAP kinase pathway through antioxidant mechanisms[J].Brain Res Mol Brain Res，2005，140(1)：45-54.

6Pahl HL.Activators and target genes of Rel/NF-kappaB transcription factors[J].Oncogene，1999，18(49)：6853-6866.

7Schömig M，Eisenhardt A，Ritz E.The microinfammatory state of uremia[J].Blood Purif，2000，18(4)：327-332.

8Mattson MP，Camandola S.NF-kappaB in neuronal plasticity and neurodegenerative disorders[J].J Clin Invest，2001，107(3)：247-254.

9Suganuma M，Okabe S，Oniyama M，et al.Wide distribution of [3H](-)-epigallocatechin gallate，a cancer preventive tea polyphenol，in mouse tissue[J].Carcinogenesis，1998，19(10)：1771-1776.