复方豆蔻酊防腐剂的选择

陈树新，庞佩珊，陈翠环

(广东省佛山市第一人民医院药剂科，广东 佛山 528000)

复方豆蔻酊由肉桂、白豆蔻、小茴香等用乙醇浸渍提取而成，具有驱风健胃作用，用于食欲不振、胃肠气胀、恶心、呕吐等[1]，为我院制剂(驱风合剂、小儿驱风合剂)的自制中间产品。复方豆蔻酊含醇量为65%，应具备抑菌作用，但工作中发现该制剂出现微生物限度超标的现象，影响后续工序的进行和制剂的质量。参考文献[2-4]，加入适量防腐剂可有效控制制剂的微生物限度，笔者通过加入不同浓度的3种不同防腐剂，比较其对复方豆蔻酊的抑菌效果，筛选适宜的防腐剂及其浓度控制复方豆蔻酊的微生物限度。

1 仪器与试药

HH．B11型电热恒温培养箱(上海市跃进医疗器械一厂);LRH-150B型生化培养箱(上海一恒科技有限公司);Ph-340型pH酸度计，DGH 80-B型电热恒温鼓风干燥箱(武汉瑞华仪器设备公司);10 000级洁净细菌培养室、无菌室;玻璃仪器等。小茴香(批号为 110107)，白豆蔻(批号为 100806)，肉桂(批号为20110501)均由南海药材公司提供;甘油(湖南尔康制药公司，批号为20110215);95%乙醇(安徽安特生物化学制品，批号为1105113201);苯甲酸(镇江前进化工公司，批号为100902);羟苯乙酯(台山新宁制药有限公司，批号为0100901);度米芬(重庆青阳药业有限公司，批号为101001);氯化钠(台山市新宁制药有限公司，批号为20110302);灭菌生理盐水、纯化水等均为药用规格。牛肉浸膏(批号为20070412)，蛋白胨(批号为F20101012)，琼脂粉(批号为F20080313)均由国药集团化学试剂有限公司提供;玫瑰红钠琼脂(北京陆桥技术有限责任公司，批号为100422);牛胆盐(国药集团化学试剂有限公司，批号为F20070710);乳糖(天津市永大化学试剂有限公司，批号为20100323);溴百里香草酚蓝(广州化学试剂厂，批号为970801);氯化-2，3，5-三苯基四氮唑(上海化学试剂采购供应站分装厂，批号为861127)。以上均为分析纯。

2 方法与结果

2．1 试验用品准备

样品:按复方豆蔻酊处方量，取已粉碎(过24目筛)的小茴香、白豆蔻、肉桂药材，以65%乙醇润湿后装桶，用65%乙醇浸渍3次，每次48 h，渗漉，收集滤液，加入甘油，调节含醇量至65%，搅匀，即得。

供试品[5]:分别等量量取复方豆蔻酊样品9组，向1～3组分别添加 0．06% ，0．08% ，0．1% 的苯甲酸，作为供试品 1，2，3;向4 ～6 组分别添加 0．01%，0．03% ，0．05% 的羟苯乙酯，作为供试品 4，5，6;向 7 ～9 组分别添加 0．01%，0．03%，0．05%的度灭芬，作为供试品 7，8，9。

培养基:按2010年版《中国药典》附录ⅪJ微生物限度检查法中培养基及其制备方法[6]制备0．001%TTC营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、胆盐乳糖增菌液。

阴性对照品:试验用稀释液0．9%无菌氯化钠溶液。

2．2 检测方法

2．2．1 样品检测[6]

检测细菌、霉菌/酵母菌:取样品10 mL，用0．9%无菌氯化钠溶液按1∶10，1∶100稀释，备用。取各梯度样品稀释液1 mL，分别注入到无菌平皿中，向每个平皿倾注15～20 mL不超过45℃的溶化的营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基，混匀，凝固，倒置培养，每稀释级每培养基制备2个平板。取试验用稀释液1 mL，置无菌平皿中，注入营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基，凝固，倒置培养，制备2个平板。在恒温培养箱培养，计数，取平均值，检测细菌用营养琼脂培养基，30～35℃培养3 d，检测霉菌/酵母菌用玫瑰红钠琼脂培养基，23～28℃培养5 d。

检测大肠埃希菌:取样品10 mL，直接接种至100 mL胆盐乳糖增菌液中，在恒温培养箱30～35℃培养18～24 h。同样品检查方法同时做阳性对照和阴性对照试验。

2．2．2 供试品检测

供试品的检测按样品检测方法检测。

2．3 检测结果

检测结果见表1和表2。由表1可知，复方豆蔻酊样品的霉菌/酵母菌、大肠埃希菌含量测定结果为阴性，无菌生长;而其细菌含量超过100 cfu，不符合规定。由表2可知，每份供试品的霉菌/酵母菌、大肠埃希菌含量测定都呈阴性;供试品4～9，添加羟苯乙酯、度灭芬后，每1毫升供试品的细菌含量仍然超过100 cfu，超出规定范围，其不同浓度时的抑菌效果无明显差异;从供试品1，2，3的检测可以看出，随着苯甲酸的浓度的增大，抑菌效果增加，当浓度在0．08%时，已产生抑菌作用，检测菌数小于100 cfu;浓度增加到0．1%时，抑菌效果较好，供试品细菌含量小于10 cfu。

表1 样品微生物限度检测结果

表2 供试品微生物限度检测结果(细菌/霉菌或酵母菌/大肠埃希菌)

3 讨论

酊剂是我国传统中药制剂，必须符合《中国药典》酊剂项下的规定。复方豆蔻酊作为我院内服制剂的原料，微生物含量是其中一项质量控制指标。由于原材料生药含水分过多、产品含醇量不足、空气溶剂及生产环境污染等原因，制剂微生物限度超标情况时有出现。而中药制剂微生物限度越来越受到人民关注，解决微生物限度超标可采用环氧乙烷对其消毒灭菌、高温灭菌或加入防腐剂的方法。环氧乙烷消毒灭菌法存在影响生产进度、增加生产成本等缺点;高温灭菌法会破坏制剂当中某些中药有效成分的结构，使得药效降低，影响疗效;加入防腐剂来解决，有效、安全、可行。

本研究中，3种防腐剂均能溶于复方豆蔻酊中;复方豆蔻酊pH为6．1，符合苯甲酸及其盐类在偏酸性使用条件。研究结果表明，添加0．1%苯甲酸对复方豆蔻酊的抑菌作用较为明显，可有效控制复方豆蔻酊的微生物限度。当然，要有效控制制剂的微生物限度，还必须严格执行操作规程和规范。

[1]中央人民政府卫生部．中华人民共和国药典 [M]．上海:商务印书馆，1953:293．

[2]袁惠英．50%硫酸镁溶液的防腐剂筛选研究[J]．中国药房，2011，22(9):812-814．

[3]温东妹，夏春森，冯柏康，等．利巴韦林口服溶液中抑菌剂的筛选[J]．中国药房，2010，21(45):4 251-4 253．

[4]钱木水，叶兴法，倪赤杭．液体制剂中防腐剂选用的体会[J]．海峡药学，2009，21(3):32-34．

[5]崔福德，龙晓英．药剂学[M]．北京:人民卫生出版社，1980:144-146，181-184．

[6]国家药典委员会．中华人民共和国药典(二部)[M]．北京:中国医药科技出版社，2010:附录105-附录115．