药食用真菌液体发酵关键技术的研究

药食用真菌是指可食用的、对疾病有治疗、预防或抑制作用以及对人体有保健作用的一类真菌,其药食用部位有子实体、菌核菌丝体和发酵液等。药食用真菌在液体发酵过程中,除菌丝或孢子会大量增殖外,还会产生多糖、多肤、生物碱、酶、核酸、氨基酸、维生素、植物激素等具有生理活性的物质，具有抗癌、抗炎、抗菌、抗衰老、抗溃疡等多种功效。

近年来，国内外科研人员在药食用真菌菌种分离、筛选诱变、培养方式、培养过程、活性成份的提取纯化等方面进行了大量的研究。如：Wojciech Krzyczkowski等（2005）通过优化培养基提高猴头菇液态发酵过程中活性物质Erinacine A的产量，并通过高效液相 (HPLC)方法检测该活性物质浓度。Baskar,Gurunathan等（2011）在灵芝产多糖的培养基中，采用大豆粉作为低价值培养基成分，灵芝胞外多糖产量达到1 005.55 mg/L。Cho,Eun Jae等（2006）利用银耳菌体在液态发酵条件下产胞外多糖。国内在药食用真菌的研究方面更是形成了一些主要科研团队，发表了大量的研究成果。如江南大学的章克昌、丁重阳等，中南林业科技大学的刘高强、韩文军，江苏大学的黄达明、张志才等，其基于不同药食用真菌的生长及代谢产物的发酵特性，结合动植物成分的生物活性特点，在筛选多种动植物成分的基础上，基于生物活性物质和生物活性指标，建立了灵芝、金耳、鸡腿蘑和猴头菌等药食用真菌的液体发酵关键技术，有效提高发酵液中活性物质产量和发酵液生物活性功能。CN200710062838.3公开了一种生产含有倍半萜的金耳发酵液的发酵工艺，其以金耳为出发菌株，进行液体摇瓶培养、液体摇瓶扩大培养、一级种子培养和发酵培养，得到含有倍半萜的金耳深层发酵液。用该生产工艺生产的发酵液及倍半萜经口服途径给予高血糖小鼠可显著降低其血糖和果糖胺，证实金耳发酵液和倍半萜具有制备降低血糖保健饮品及药物的用途。该发明的发酵液及5 mg/mL的倍半萜对体外非酶糖基化 (AGEs)的抑制率高达72%～90%。CN200510068284.9涉及一种添加苦瓜的鸡腿磨深层发酵工艺，以及由该工艺获得的发酵产品。该工艺解决了鸡腿蘑大规模液体培养的难题，同时由于在发酵培养基中加入了中药苦瓜，在发酵过程中与鸡腿蘑发生生物转化，大大提高了发酵液的活性，对鸡腿蘑的产业开发具有重要的意义。该发明的发酵液菌丝体的干重为7～10克每升，发酵液对体外非酶糖基化(AGEs)的抑制率高达93～98%。CN200910305177.1公开了一种从灵芝发酵液中制备三萜类物质赤芝酮C的方法，通过在灵芝发酵液中补加蜣螂的乙醚提取物150～400 mg/L来促进赤芝酮C的形成，并进一步探索出灵芝发酵液中赤芝酮C的提取、分离和纯化技术，形成了一种能在灵芝发酵液中制备单一化合物赤芝酮C的简单、低成本的方法。CN200710190182.3为猴头菌转化银杏叶的发酵液及发酵液提取物的制备方法及用途。其将猴头菌接种到麸皮固体培养基，分别培养3-7天后，先转接入种子培养基，培养1～2天后，再转接入发酵培养基中培养。 其中种子培养组成为葡萄糖10～40 g/L，麸皮1～5 g/L，蛋白胨2～10 g/L，玉米粉5～20 g/L；发酵培养基：葡萄糖 10～40 g/L，麸皮 1～5 g/L，蛋白胨 2～10 g/L，玉米粉 5～20 g/L，MgSO4·7H2O 0～1 g/L 和 KH2PO40.1～2 g/L，1～10 g/L CaCO3，0.2～5%的EGB。该发明的方制得的发酵液经糖尿病大鼠实验证明可用于降血糖药物的制备。王锋、丁重阳等（2005）研究中药对鸡腿蘑深层发酵中生物量和胞外粗多糖的影响，其采用将中药固体粉末分别加入培养基中接种培养,培养4 d后测定生物量和胞外粗多糖。结果表明，除黄芪、玉竹外，绞股蓝、苦荞、魔芋、百合、人参、丹参和苦瓜都能促进鸡腿蘑的生长和胞外多糖的分泌。不同中药量添加的结果显示，人参的最适添加量为1.5%，绞股蓝、苦荞、魔芋、百合、丹参和苦瓜的最适添加量均为0.5%。刘高强等（2007）为提高灵芝菌体生长和多糖的合成，在灵芝发酵过程中分别添加了地鳖和蜣螂的乙酸乙酯提取物，发现蜣螂提取物对胞外多糖具有良好的促进作用，而地鳖提取物对菌体生长和胞内多糖具有良好的促进作用。

药食用真菌液体发酵技术可以实现工业化连续生产，规模大、发酵周期短、产量高，具有广泛的发展前景，同时，也为我国中药的研发提供了一个重要的研究方向。

（江南大学图书馆 张群）