乙型肝炎患者病毒前S1抗原与HBeAg及HBV-DNA相关性分析

周 秦

(江苏省南京市第一医院检验科,江苏南京,210006)

乙型病毒性肝炎是由乙肝病毒(HBV)引起的一种传染病,它以肝脏病变为主,流行广泛,危害严重。临床目前开展的检测HBV感染方法主要是检查传统的乙肝血清标志物(HBsAg、HB-sAb 、HBeAg、HBeAb、HBcAg),乙型肝炎患者病毒前S1抗原(Pre-S1)和乙肝病毒(HBV)DNA。其中,HBeAg一直被临床认为是HBV复制及传染性最常用的指标,而血清HBV-DNA阳性检出常作为HBV复制的金标准[1]。前S1抗原是病毒复制的另一个指标,出现在感染HBV的最早期。本研究对293份乙肝感染者的血清样本进行了前S1抗原、HBV-DNA 及HBeAg检测,探讨 Pre-S1对乙肝病毒复制的诊断价值,现报告如下。

1 资料与方法

选取2012年1—10月在本院门诊或住院治疗的乙型肝炎患者293例,血清表面抗原均为阳性,诊断均符合2000年9月由中华医学传染病与寄生虫病学分会 肝病学会联合修订的肝炎诊断标准[2]。其中男 157例,女 136例,年龄 12～65岁,平均年龄40.5岁。所有受试者抽取空腹静脉血,分离血清,-20℃保存待检。

前S1蛋白和HBeAg检测采用ELISA双抗夹心法,试剂由上海市实业科华有限公司生产,使用E-STAR全自动酶免分析仪检测。血清HBVDNA检测采用荧光定量PCR法,HBV-PCR荧光定量检试剂由上海复星医学科技有限公司生产(病毒数量超过1 000 copies/mL为阳性),检测仪器使用罗氏LightCycler 480。

诊断效能指标的计算公式分别为:敏感度=真阳性/(真阳性+假阴性),特异度=真阴性/(假阳性+真阴性),准确性=(真阳性+真阴性)/病例总数,阳性预测值(PPV)=真阳性/(真阳性+假阳性)。

2 结 果

293例乙型肝炎患者中,HbeAg和Pre-S1抗原的阳性检出率分别为35.5%和63.1%。以HBV-DNA为标准,Pre-S1抗原诊断敏感度为88.5%,特异性为92.3%,准确性为89.8%,阳性预测值为96.2%;HBeAg抗原诊断敏感度为49.8%,特异性为95.7%,准确性为64.1%,阳性预测值为96.1%。

以HbeAg检测结果进行分组,HBeAg(+)104例中,Pre-S1抗原阳性98例,HBV-DNA阳性100例,阳性检出率分别为94.2%和96.2%,二者差异无统计学意义(P<0.05);HBeAg(-)189例,Pre-S1抗原阳性87例,HBV-DNA阳性101例,阳性检出率分别为 46.0%和53.4%。Pre-S1抗原和HBeAg,HBV-DNA相关性分析。经χ2检验分析显示,Pre-S1抗原和HBeAg存在相关性(χ2=66.96,P<0.01);Pre-S1抗原与HBV-DNA亦有相关性(χ2=177.69,P<0.01)。

3 讨 论

HBV是具有独特结构的嗜肝细胞DNA病毒,它能侵入肝细胞并在肝细胞内复制繁殖。以往研究认为,HBeAg是反映乙肝病毒复制的标志。近年来,前S1抗原作为HBV血清学的新标志物显示出很高的临床应用价值。Pre-S1抗原是HBV的外膜蛋白成分之一,与HBV的入侵肝细胞、分泌和组装密切相关,临床可作为乙肝病毒活动性复制的指标[3]。有研究[4]表明,前S1抗原的持续存在表明有病毒复制和病毒颗粒存在。目前,血清HBV-DNA仍然是反映病毒复制的最直接的标志[5]。

本研究通过对293例乙型肝炎患者血清Pre-S1抗原、HBeAg及HBV-DNA进行检测,结果发现:①在HBV患者中,Pre-S1阳性检出率明显高于HBeAg阳性率,其敏感度和准确度也明显高于HBeAg,表明Pre-S1抗原检测能更敏感地反映HBV的复制状况。二者的阳性预测值相近表明诊断效能均较高;②在HBeAg阴性的患者中,Pre-S1抗原仍有28.7%的阳性率,说明HBeAg转阴病毒复制仍在。国外有研究[6]表明,部分乙肝患者和病毒携带者体内病毒存在前S区缺失,比例约23%,但前S区突变并不影响病毒的复制与装配,故HBeAg阴性并不代表乙肝病毒停止复制。而Pre-S1抗原测定能弥补HbeAg阴性导致的误诊,一般认为Pre-S1抗原呈阳性,表示病毒复制极为活跃,传染性非常强;③Pre-S1抗原和HBV-DNA存在显著关联性(P<0.01),因此在不能进行HBV-DNA检测时,可作为判断病毒在宿主体内活动的首选指标。

综上所述,Pre-S1抗原可敏感地反映乙肝病毒复制情况,特别是对于HBeAg阴性的乙肝患者要进一步检查Pre-S1抗原和HBV-DNA来确认是否处于复制感染期。HBV-DNA是抗病毒治疗疗效检测最好的指标,但是它对实验室要求较高,一般基层医疗单位很难开展。Pre-S1抗原和HBV-DNA有良好的相关性,检测费用低,具有较高的临床应用价值,已作为常规实验项目开展。此外,机体感染HBV后,最早的免疫应答针对的是Pre-S1抗原,检测Pre-S1抗原可反映机体的免疫状况,判断疾病的转归。

[1]夏邦世,沈忠海,马红松,等.慢性乙型肝炎患者HBV前S1抗原及HBV-M和HBV-DNA与肝功能的关系[J].中华检验医学杂志,2004,27:575.

[2]中华医学会传染病与寄生虫病分会,肝病学分会.病毒性肝炎诊断标准[S].中西医结合肝病杂志,2001,11(1):56.

[3]Hu WG,Wei J,Yang XX,et al.Expression of overlapping Pre-S1 fragment recombinant proteins for the deteHI1ination of immunogenic domajns in HBsAg Pre-S1 region[J].Acta Biochim Biophys Sin,2004,36(6):397.

[4]Gaeta G B,Stornaiuole G,Precone D F,et al.Epideniological and clinicalburden of chronic hepatitis B Virus/hepatitis C virusinfection.Anulticenter Italian study[J].J Hepatol,2003,39(7):1036.

[5]程钢,何蕴韶.荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎毒[J].中华医学检验杂志,1999,22(3):135.

[6]Sugau chi F,Ohno T,Orit o E,et al.Influence of hepatitis B virus gene 2 types on the development of preS deletions and advanced liver disease[J].J Med Virol,2003,70(4):5371.