研究性实验在临床寄生虫学检验实验教学中的运用研究

张爱君，王秀青

（宁夏医科大学检验学院，宁夏检验医学研究所，宁夏 银川 750004）

临床寄生虫学检验是医学检验专业的一门专业课程，也是一门连接医学检验与临床医学的桥梁课程，它是病原生物学检验的一个组成部分，主要研究和人体健康有关的寄生虫与人体和外界环境因素的相互关系[1]，以及确诊寄生虫病的病原学检查方法，其实验教学尤为重要，而形态学是实验教学的根本，在寄生虫病的实验室检查中具有重要意义。随着我国寄生虫病的流行及实验室检查技术和方法的进步，仅仅以形态学检查的实验教学方法已不能满足学生对知识探究的欲望。因此，我们结合本地区感染寄生虫病的实际情况和当前临床感染性疾病的实验室检查方法，在对该课程常规实验教学内容进行调整的同时，增加研究性实验教学，不仅提高了学生的学习主动性和科研兴趣，还将相关课程和检验方法有机结合，融会贯通。

1 合理选择实验内容，优化传统实验项目

医学检验专业学生必须掌握与致病、诊断有关的寄生虫各期形态结构和相应的检查方法，因此，临床寄生虫学检验实验课的重点仍是基本技能的训练。为此，我们对现行教学大纲中的实验内容进行了合理的选择和整合。

实验标本观察是临床寄生虫学检验实验教学的主要内容，寄生虫标本具有虫种多、标本间易混淆等特点，所以在内容安排上应遵循由易到难的原则，从教材内容编排顺序和学时进度上进行调整。如蛔虫、鞭虫、蛲虫等消化道寄生虫实验由教学大纲安排的12学时调整为8学时，其他内容也根据实际情况进行适当调整。调整后的实验内容不仅充实，而且通过镜下形态结构的直接比较和检验方法的触类旁通，提高学生对标本的检查能力、辨认能力和强化对理论知识的理解，还可以留出一部分实验学时结合实验室开放日开展综合性强、具有研究性的实验项目。

2 开展新的项目，渗透研究性实验

滴虫性阴道炎是由阴道毛滴虫（Trichomonas vaginalis）引起的一种常见性传播疾病，其感染遍及世界各地。我们选择阴道毛滴虫作为研究对象，结合实验室条件，提出研究方向，讨论可行性方案，学生依兴趣选择研究内容，利用实验课时和实验室开放日来完成，从而激发学生潜在的科研能力，发挥其主体作用[2]。

2.1 阴道毛滴虫的体外培养

该实验周期短（2～3天完成），有较强的可操作性，滴虫培养后用生理盐水涂片法检测，在观察活体标本的同时弥补了固定染色标本的缺陷，符合临床实际。此外，培养法可提高病原体的检出率和阳性率，有很高的实用性。

2.1.1 培养基 选用肝浸液培养基，pH 5.6～5.8，经高压灭菌置4℃保存备用。接种前每管加入肝浸液培养基4ml，加入12%灭活的小牛血清，青霉素和链霉素各100万单位。

2.1.2 实验虫株 取临床诊断为滴虫性阴道炎患者的阴道分泌物，接种于肝浸液培养基中，37℃无菌培养，24 h传代一次，稳定传代3次后进行实验。

2.2 中草药抗阴道毛滴虫作用的体外效果研究

遴选几种目前临床上常用的治疗阴道毛滴虫感染的中草药（学生自行选购于银川市古方药店）。对所选药物进行多个不同药物浓度的实验：2 mg/ml，4 mg/m l，8 mg/m l，16 mg/m l，32 mg/ml等，同时设无药对照组。取体外传代培养的滴虫，调整滴虫浓度为2×105个/m l。将药物实验组与无药对照组分别加入滴虫溶液 100 μl，置 37℃ 培养箱中培养 2 h、4 h、8 h、12 h 和24 h，分别吸取各管虫液滴片镜检，观察滴虫活动状态，并计数死亡虫体数和计算死亡率。将虫体圆形、不运动、边缘不整、内含大量颗粒、空泡甚至为碎片状的虫体判定为死亡滴虫，所有实验均重复3次。实验数据应用SPSS 11.5统计软件分析，并对结果进行讨论。

2.3 阴道毛滴虫基因组DNA的提取

对肝浸液培养的虫株进行扩大培养。当虫体总数达1×106个/m l时收集虫体，采用酚氯仿法提取阴道毛滴虫的DNA。此项实验可在本专业课程分子诊断学的理论基础之上，联合其实验课程内容和实验室条件来完成。

3 细化实验环节，突出研究性

学生选择实施的各项研究性实验项目包括实验选题、实验设计答辩、实施操作到结题答辩4个环节。综合临床寄生虫学检验、免疫学检验、分子诊断学等学科的检验方法和实验室条件，引导并指导学生依据各自的实验路线和实验内容完成所选项目。

3.1 实验选题

课题组教师根据实验室条件、教学内容以及本地区寄生虫病特点，确定几个实验方向，学生依兴趣以小组为单位进行选题。

3.2 实验设计答辩

学生小组结合所选课题，查阅文献，设计实验路线，确定实验内容。通过查阅文献锻炼学生获取信息、整理信息和分析信息能力，培养学生的科研素质。研究方法、实验路线的设计则要根据选题的可行性，包括实验材料源、实验室条件、实验经费等进行设计。

模拟研究生开题报告答辩会的形式进行实验设计答辩。通过答辩来修正学生小组制定的研究方法和路线中存在的问题及不足，保证实验的可操作性，确保其顺利完成，同时也锻炼了学生的语言组织能力和分析问题能力。

3.3 实验操作

学生小组通过实验设计答辩后，在教师的指导下分组完成各项实验内容。包括材料的准备，试剂的配制，实验仪器的正确使用以及解决实验中出现的问题，都要亲历亲为，认真思考。在此过程中，学生需将某些课程知识点结合并实际应用，使综合素质得到提高。

3.4 结题答辩

研究性实验的特点就是要有研究结果。在书写结题报告时，学生对实验设计、实验操作及实验原始记录、实验结果等逐层进行分析，充分论述。通过答辩，不仅让学生积累、增长了知识，体验了课题答辩，同时也增强了团队协作意识。

研究性实验是一种将教学、科研、实践三者相结合的教学模式，以培养学生的创造能力和创新意识为着眼点，在教学过程中为学生提供类似于科学研究的场景，让学生通过收集信息、分析信息、利用信息，经过探索、发现和体验，激发学生对实验的兴趣，培养学生自主学习能力和对未知领域的探究意识。同时，开展研究性实验也有利于淘汰那些陈旧、落后的实验方法，采用新颖、先进的实验方法，使学生的学习跟上学科发展的步伐。教育部在《关于进一步加强高等学校本科教学工作的若干意见》中指出，高等学校本科教学工作“要积极推动研究性教学，提高大学生的创新能力，增加综合性与创新性实验”[3]。因此，我们在实验教学中加入研究性实验内容，引导大学生了解多种学术观点并开展讨论、追踪本学科领域的最新进展。学生通过参与研究性实验的各个环节，提高了自主学习和团队协作能力，继而对一些基本的科研方法有所了解并熟悉，早期接触科研，培养了科研能力。

[1]李雍龙.人体寄生虫学[M].7版.北京：人民卫生出版社，2008.

[2]张春龙，何秋璨，刘新光，等.浅谈学生主体性在医学检验专业开放式实验教学中的积极发展[J].卫生职业教育，2008，26（16）：121-122.

[3]仝晓燕.探索研究性实验教学提高学生的创新能力[J].高校实验室工作研究，2007（2）：20-22.