呼吸系统疾病中抗ENA抗体分析研究

马玉腾，邢志伟，翟 倩，孙红梅，李玉静，吕翠环*

（1.河北医科大学第二医院急诊科，河北石家庄050000；2.河北省胸科医院检验科，河北石家庄050041）

呼吸系统疾病中抗ENA抗体分析研究

马玉腾1，邢志伟2，翟 倩2，孙红梅2，李玉静2，吕翠环2*

（1.河北医科大学第二医院急诊科，河北石家庄050000；2.河北省胸科医院检验科，河北石家庄050041）

目的通过对204例呼吸系统疾病患者自身免疫抗体（autoantibody）阳性结果进行分析，了解自身免疫性疾病在呼吸系统疾病中的分布特点，探讨抗可提取性核抗原（extractable nuclear antigens，ENA）抗体谱的检测对呼吸系统疾病的诊断意义。方法应用欧蒙免疫印迹法对204例自身免疫性疾病合并呼吸系统疾病患者血清进行抗ENA抗体谱的检测，观察自身免疫性疾病在呼吸系统疾病中的分布情况。结果204例抗ENA抗体谱阳性患者中肺结核68例（33.3％），胸膜炎56例（27.5％），肺间质纤维化44例（21.6％），肺炎20例（9.8％），肺癌16例（7.8％）。结论自身抗体检查对疾病的诊断有重要意义，如能早期发现、诊断并给予及时有效的治疗对于控制病情的发展、改善患者生活质量有极大的帮助，抗ENA抗体检测在各系统自身免疫性疾病的诊断及鉴别诊断中占有不可忽视的地位。

自身免疫疾病；抗原，核；呼吸系统

自身抗体是由于正常免疫耐受功能受损或隐蔽自身抗原释放，导致免疫细胞及其成分对自身组织或细胞成分发生免疫应答的产物，血清中检出自身抗体是自身免疫病的诊断基础。目前，自身抗体的检测方法有很多种，抗核抗体和抗可提取性核抗原（extractable nuclear antigens，ENA）抗体的检测是较重要而常用的方法。自身抗体可导致系统损伤及功能障碍，可见于各个系统疾病。为了解自身抗体阳性患者在呼吸系统疾病的分布情况，本文对204例抗ENA抗体谱阳性的结果进行回顾性分析，现分析报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：在2008年1月—2010年1月河北省胸科医院住院的呼吸系统疾病患者中，统计出自身抗体阳性204例，无其他自身免疫性疾病存在，将其结果资料进行收集整理。其中男性56例，女性148例，年龄12～82岁，平均46.04岁。所有患者静脉采血2～3mL，以3000r/min离心5min，分离血清。

1.2 试剂：试剂盒购自北京欧盟生物技术有限公司。

1.3 方法：采用免疫印迹法检测ENA自身抗体谱，操作方法严格按试剂盒说明书进行操作。标本用缓冲液1∶101倍稀释，待测血清中存在的抗ENA抗体分别与硝酸纤维素膜上的相应抗原区带结合，再加入酶标记的抗体及相应底物，出现显色反应。

1.4 结果判断标准：观察阳性显色区带与对应的标准带位置即可判断显色带是何种自身抗体。根据薄膜上各抗原带着色的深浅来判断结果。根据抗原带着色的深浅，可将结果分为阴性、临界阳性和阳性。抗原着色带无色为阴性，着色非常弱为临界阳性，着色中到强为阳性。

2 结 果

2.1 ENA多肽抗体检测：204例自身抗体阳性患者的ENA多肽抗体（nRNP、SM、SS-A/Ro-52、SS-B、Scl-70、Jo-1）项中，分别视疾病不同而有1～6项阳性；204例抗ENA抗体谱阳性患者中肺结核68例（33.3％），肺炎20例（9.8％），肺间质纤维化44例（21.6％），胸膜炎56例（27.5％），肺癌16例（7.8％），见表1。

表1 抗ENA抗体在呼吸系统疾病中的结果分析Table 1 The analysis of anti-ENA antibodies in respiratory diseases

2.2 204例患者的各年龄阶段例数的比较：通过统计204例自身抗体阳性的呼吸系统疾病患者的年龄，比较各年龄阶段的例数分布情况，见表2。

表2 204例自身免疫性疾病患者各年龄阶段例数比较Table 2 The age distribution of 204 cases of autoimmune diseases

3 讨 论

自身免疫性疾病是由于正常免疫耐受功能受损导致免疫细胞及其成分对自身组织结构和功能的破坏，并出现一定临床表现的一类疾病，任何年龄、性别均可发病，以女性为多见。本文发现以＞20～50岁之间的患者为主，占72.0％（147/204），与文献报道相符［1］。

自身免疫性疾病患者体内可产生多种针对细胞核成分的抗体，ENA多肽抗体谱即是其中一类，ENA是可提取性核抗原的总称，属非组蛋白的核蛋白，为酸性蛋白抗原，是由许多小分子RNA（100～215个核苷酸）与各自对应的特定蛋白质组成的核糖核蛋白颗粒，分子中不含DNA。最常用的ENA包括nRNP、Sm、SSA、SSB、Scl-70、Jo-1等6种［2］，本研究主要进行呼吸系统中ENA中6项阳性结果分析。

本文统计204例抗ENA抗体谱阳性患者中肺结核68例（33.3％），所占比例最高。据报道［3］，肺结核患者中由结核杆菌引起的变态反应性疾病占有一定比例，以发热、关节疼痛及皮肤损害为临床表现特征。其发病机制多有报道，有学者［4］认为与结核菌直接感染有关，但亦有文献［5］报道结核风湿症无关节骨质破坏、疏松、增生及关节强直变形等改变，而为细胞介导的Ⅳ型变态反应性疾病。有文献［6］表明常见于呼吸系统的自身免疫性疾病还有韦格纳肉芽肿病，它是一种少见血管炎，常累及上气道、肺、肾脏等。

本文统计肺癌在自身免疫抗体阳性的呼吸系统疾病中占16例（7.8％）。自身免疫性疾病和恶性肿瘤两者之间的联系可能有以下几种机制：相同的病原因素、自身免疫过程激发恶性转化、治疗，而且基因倾向性在2种疾病都有很重要的作用；另一可能机制是自身免疫性疾病（如干燥综合征）中淋巴细胞的慢性抗原刺激，可能产生出一种易恶性转化的淋巴细胞［7］。国外报道了肿瘤患者体内存在抗细胞质或细胞核成分的自身抗体［8］，这些自身抗体有希望成为鉴别诊断正常人与肿瘤患者的标志物［9］。但目前肺癌患者体内自身抗体谱的系统研究的文献还很少，对抗体谱及其靶抗原本质的研究将有助于深入认识肺癌患者的自身免疫现象，为自身抗体应用于肿瘤诊断、治疗的潜在可能性提供更多信息。

本文统计在204例自身免疫抗体阳性的呼吸系统疾病患者中，肺炎20例（9.8％），肺间质纤维化44例（21.6％），胸膜炎56例（27.5％）。当机体发生自身免疫性疾病时，由于自身对自身抗原发生免疫反应，而导致自身组织损害，可以出现肺脏的累及，发展为肺炎、胸膜炎、肺间质病变，甚至晚期出现肺间质纤维化［10］。不论何种免疫机制，针对自身抗原的抗体产生在自身免疫疾病的发病中起重要作用［11］。有文献［12］表明抗SSA和抗Jo-1同时存在可能是提示肺间质病变加重，应积极选择更有效的治疗措施。所以，自身抗体的检测在判断疾病的活动过程、观察治疗效果、指导临床用药等方面均具有重要的临床意义。

总之，抗ENA抗体的检测对于多种自身免疫病有较高的阳性率，在自身免疫病的诊断、治疗效果及预后判断等方面有较高的临床应用价值，而且自身抗体的检测有助于呼吸系统疾病的早期诊断及治疗。

［1］张毅，储以微.Th17与自身免疫病［J］.复旦学报：医学版，2008，35（1）：145－147.

［2］冀春梅，王振明，马居凤.抗核抗体谱检测在自身免疫性疾病中的意义［J］.实用医技杂志，2008，15（5）：583－584.

［3］杨春，杨二杨.蓬塞综合征46例分析［J］.现代实用医学，2008，20（4）：271－272.

［4］CARVALHO M，DOMINONI RL，SENCHECHEN D，et al.Cutaneous leukocytoclastic vasculitis accompanied by pulmonary tuberculosis［J］.Bras Pneumol，2008，34（9）：745－748.

［5］ABDULAZIZ S，ALMOALLIM H，IBRAHIM A，et al.Poncet＇s disease（reactive arthritis associated with tuberculosis）：retrospective case series and review of literature［J］.Clin Rheumatol，2012，31（10）：1521－1528.

［6］张孔，曾辉，梁国庆，等.韦格纳肉芽肿病肺损害的临床分析［J］.中华结核和呼吸杂志，2003，26（10）：623－625.

［7］TVARÜZKOVÁZ，PAVLOVÁS，DOUBEK M，et al.Lymphoproliferative disease in patients with autoimmune and inflammatory diseases：significance of antigenic stimulation and inflammatory processes［J］.Cas Lek Cesk，2011，150（3）：161－168.

［8］OKANO HJ，PARK WY，CORRADI JP，et al.The cytoplasmic purkinje onconeural antigen cdr2 down-regulates c-Myc function：implications for neuronal and tumor cell survival［J］.Genes Dev，1999，13（16）：2087－2097.

［9］季萍.肿瘤患者血清中肿瘤自身抗体的产生及意义［J］.临床输血与检验，2005，7（1）：76－78.

［10］王宽婷，韩淑玲，张敏.干燥综合征并发肺间质纤维化53例临床分析［J］.医学研究杂志，2009，38（11）：88－90.

［11］FEGHALI-BOSTWICK CA，GADGIL AS，OTTERBEIN LE，etal.Autoantibodies in patients with chronic obstructive pulmonary disease［J］.Am JRespir Crit Care Med，2008，177（2）：156－163.

［12］VANCSA A，CSIPO I，NEMETH J，et al.Characteristics of interstitial lung disease in SS-A positive/Jo-1 positive inflammatory myopathy patients［J］.Rheumatol Int，2009，29（9）：989－994.

（本文编辑：赵丽洁）

ANALYSIS AND RESEARCH OF ANTI-ENA ANTIBODY IN RESPIRATORY DISEASE

MA Yuteng1，XING Zhiwei2，ZHAIQian2，SUN Hongmei2，LIYujing2，LV Cuihuan2*
（1.Department of Emergency Medicine，the Second Hospital of HebeiMedical University，Shijiazhuang 050000，China；2.Clinical Laboratory，Heibei Provincial Chest Hospital，Shijiazhuang 050041，China）

autoimmune diseases；antigens，nuclear；respiratory system

R56

A

1007-3205（2013）04-0413-03

2012－08－21；

2012－10－10

马玉腾（1966－），男，河北衡水人，河北医科大学第二医院副主任医师，医学硕士，从事急诊科疾病诊治研究。

*通讯作者

10.3969/j.issn.1007-3205.2013.04.013

【关键词】ABSTRACT：ObjectiveFrom the restrospective analysis of positive autoantibody of 204 patients with disease of respiratory system，to understand autoimmune diseases in respiratory disease and its distribution characteristics，and to explore the diagnosis significance for respiratory diseases by the detections of anti-ENA（extractable nuclear antigens）antibody repertoire.M ethodsThe anti-ENA antibody of 204 cases of patientswith autoimmue diseases and respiratory system diseaseswas detected by Euroimmun immunoblotting.The distribution characteristics of autoimmune diseases in respiratory diseases were reviewed.ResultsIn 204 patients with positive anti-ENA antibody，there were 68 cases of pulmonary tuberculosis（33.3％），56 cases of pleurisy（27.5％），44 cases of pulmonary interstitial fibrosis（21.6％），20 cases of pneumonia（9.8％），16 cases of lung cancer（7.8％）.Conclusion The detections of autoantibodies are important for the diagnosis of these diseases.Itwould be very helpful for controlling the development of the diseases，and for improving the patient′s living standard，if the patients receive early detection，diagnosis and effective treatment.The anti-ENA antibody detections are important and cannot be neglected for diagnosis and differential diagnosis of autoimmune disease of all systems.