消化道肿瘤贫血患者血清铁调素及炎症介质的表达

仇慧珠，潘湘涛，陆晔，程旭，饶彪锋

(太仓市第一人民医院血液肿瘤科，江苏苏州215400)

消化道肿瘤贫血患者血清铁调素及炎症介质的表达

仇慧珠，潘湘涛，陆晔，程旭，饶彪锋

(太仓市第一人民医院血液肿瘤科，江苏苏州215400)

目的研究血清铁调素(Hepcidin)和炎症介质细菌脂多糖(LPS)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)和干扰素(IFN)等细胞因子在消化道肿瘤贫血患者中的表达特点以及与消化道肿瘤贫血之间的关系。方法应用双抗夹心生物素-亲和素-酶联免疫吸附试验(ABC-ELISA)检测31例消化道肿瘤贫血患者的Hepcidin、LPS、IL-6、TNF-α、TNF-β、IFN-β、IFN-γ的水平，分析Hepcidin与炎症介质之间的关系，以同期30例健康体检者作为对照。结果1.实验组Hepcidin、IL-6、TNF-β、IFN-β、LPS分别为53.8±32.4μg/L、20.3±26.1ng/L、117.4±110.7ng/L、9.8±7.2ng/L、81.6±46.1μg/L，均明显高于对照组的23.1±5.2μg/ L、7.9±9.6ng/L、65±23.0ng/L、6.0±2.3ng/L、49.0±19.0μg/L(P＜0.05)，而IFN-γ及TNF-α与对照组比较差异无统计学意义。2. Hepcidin与IL-6、LPS之间存在正相关关系(r=0.27，p＜0.01、r=0.222，P＜0.05)，与TNF-β、IFN-β呈负相关关系(r=-0.348，P＜0.001，r=-0.265，P＜0.01)，与IFN-γ、TNF-α之间无相关关系。结论消化道肿瘤贫血患者高表达Hepcidin、IL-6、TNF-β、IFN-β、LPS，Hepcidin与IL-6、LPS均呈正相关关系。

铁调素；脂多糖；贫血；白介素-6；细胞因子

贫血是消化道肿瘤的常见并发症，引起消化道肿瘤贫血的原因包括慢性失血、造血原料缺失、肿瘤骨转移破坏骨髓造血微环境等，目前对消化道肿瘤相关贫血的具体机制尚不完全明确。本实验检测消化道肿瘤贫血患者的血清铁调素(Hepcidin)和多种炎症介质的表达情况，以初步探讨消化道肿瘤相关贫血的发生机制。

1 对象与方法

1.1 对象实验组2009年6月至2010年5月之间太仓市第一医院住院消化道肿瘤并伴有贫血的患者31例，其中女性9例，男性21例，年龄46～81岁，所有患者均为术后病理诊断或活检病理确诊，以Hb值男性＜120.0g/L和女性＜110.0g/L作为贫血的诊断标准。疾病种类为结直肠癌10例，食管癌2例，胃癌19例，对照组30例，为同期太仓市第一医院健康体检者，年龄42～72岁，男性16例，女性14例。两组在性别构成比、年龄差异无统计学意义。

1.2 试剂与方法Hepcidin试剂盒购自美国DRG International Inc.USA，LPS和其余5种细胞因子试剂盒为R＆D公司生产。分别检测实验组及对照组的血红蛋白、血清Hepcidin、IL-6、TNF-α、TNF-β、IFN-β、IFN-γ、LPS。清晨抽取被检者血液分置于试管中，Hb测定应用常规方法即时检测，血清则放入-80℃冰箱保存，对31例患者及30例对照组血清标本同时应用ABC-ELISA方法检测Hepcidin及上述各细胞因子。

1.3 统计学处理应用SPSS13.0版软件包进行统计学分析，分别采用方差分析和Spearman等级相关法。以P＜0.05为有统计学意义。

2 结果

2.1 实验组和对照组Hepcidin、LPS和各细胞因子的比较各组血清Hepcidin、LPS和各细胞因子测定结果见表1，其中实验组的Hepcidin、IL-6、TNF-β、IFN-β、LPS均明显高于对照组(P＜0.05)；而IFN-γ及TNF-α与对照组比较差异无统计学意义。

2.2 相关分析分别对Hepcidin与IL-6、TNF-α、 TNF-β、IFN-β、IFN-γ、LPS之间进行相关分析。结果Hepcidin与IL-6、LPS之间存在正相关关系(Hepcidin与IL-6为r=0.27，P＜0.01；Hepcidin与LPS r=0.22，P＜0.05)；Hepcidin与TNF-β、IFN-β呈负相关关系(Hepcidin与TNF-β为r=-0.348，P＜0.001；Hepcidin与IFN-β为r=-0.265，P＜0.01)。Hepcidin与TNF-α、IFN-γ之间无相关关系。

表1 各组血清hepcidin、LPS和各种细胞因子测定结果

3 讨论

近年来随着研究的深入，临床医师更加关注肿瘤患者的生存时间以及生活质量，因此肿瘤相关性贫血日益受到重视。目前大量研究表明，慢性炎症在肿瘤的发生过程中起到重要的作用。在机体免疫系统与肿瘤细胞的相互作用中产生大量炎症介质，这些炎症介质参与了肿瘤细胞的生长、转移等过程，也与肿瘤的伴随症状如疼痛、贫血等密切相关。Hepcidin是2000年发现的重要的铁调节激素,Hepcidin是机体铁稳态调节中关键性的负性铁调节因子,具有抑制肠道铁吸收和可能促进铁在网状内皮系统中滞留等作用[1]。国外大量的研究资料表明炎症介质和Hepcidin共同参与了慢性病贫血的发生和发展[2]。

我们的实验表明，消化道肿瘤贫血患者中，Hepcidin、IL-6、TNF-β、IFN-β、LPS均明显升高，我们推断Hepcidin、IL-6、TNF-β、IFN-β、LPS可能参与到消化道肿瘤患者贫血的发生发展过程中。目前研究表明在其他疾病中亦可观察到类似现象，如阮舒等[3]报道骨髓增生异常综合征患者中Hepcidin明显升高；Hohaus等[4]报道Hepcidin在霍奇金淋巴瘤患者中明显升高，与IL-6显著正相关(P＜0.001)；Ganz等[5]报道Hepcidin在炎症、多发性骨髓瘤和慢性肾性疾病中是明显升高的。

我们进一步的研究发现消化道肿瘤贫血患者Hepcidin与LPS和IL-6均呈正相关关系，也与文献报道相一致，如Hohaus等[4]报道霍奇金淋巴瘤患者中Hepcidin表达与IL-6呈显著的正相关(P＜ 0.001)，Truksa等[6]的实验发现IL-6通过激活信号传导和转录STAT家族的成员调节铁调素。他们的实验表明STAT 3通过与位于铁调素基因近端启动因子的保守的DNA部分结合激活铁调素基因的转录。STAT存在于IL-6依赖性信号传导中。我们的实验表明Hepcidin与TNF-β、IFN-β呈负相关关系，而Lee P[7]等发现给体外培养的肝细胞加入IFN-β能抑制Hepcidin的表达，我们的实验结果与之相一致，目前未见关于Hepcidin与TNF-β之间的关系的相关报道，我们推断TNF-β和IFN-β可能是Hepcidin表达的负调节因子，具体机制有待进一步探讨。

综上所述，可认为消化道肿瘤患者体内有大量的炎症介质，这些炎症介质通过复杂的机制影响下游的Hepcidin的表达，进而参与到贫血的发生机制中。而消化道肿瘤贫血还与慢性失血、造血原料缺乏等因素有关，消化道肿瘤贫血还可能与其他的复杂的分子机制有关。这有待进一步探讨。

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[4]Hohaus S,Massini G,Giachelia M,et a1.Anemia in Hodgkin's lymphoma:the role of interleukin-6 and hepcidin[J].J Clin Oncol, 2010,28(15):2538-2543.

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Expression of Hepcidin and inflammatory mediators in the patients with cancer-related anemia

CHOU Huizhu,PAN Xiangtao,TU Ye,et al.The First People's Hospital of Taicang,Jiangsu Taicang 215400,China

ObjectiveTo study the expression characteristics of Hepcidin,inflammatory mediators(LPS,IL-6,TNF,IFN)in gastrointestinal tumor patients with anemia and explore the relationship between the expression characteristics and anemia.Methods The serum levels of Hepcidin,LPS,IL-6,INF-α,TNF-β,IFN-β and IFN-γ were detected in 31 cases of gastrointestinal tumor patients with anemia and in 30 cases of normal persons by ABC-ELISA.Results①The serum levels of Hepcidin，IL-6，TNF-β，IFN-β and LPS in gastrointestinal tumor patients with anemia were higher than those in control group(53.8±32.4μg/L、20.3± 26.1ng/L、117.4±110.7ng/L、9.8±7.2ng/L and 81.6±46.1μg/L VS 23.1±5.2μg/L、7.9±9.6ng/L、65±23.0ng/L、6.0±2.3ng/L、49.0± 19.0μg/L,P＜0.05).②The serum levels of Hepcidin had positive correlation with IL-6、LPS(r=0.27，P＜0.01、r=0.222，P＜0.05)，negative correlation with TNF-β、IFN-β(r=-0.348，P＜0.001，r=-0.265，P＜0.01)and no correlation with IFN-γ，TNF-α.Conclusion Gastrointestinal tumor patients with anemia have high expression of Hepcidin、IL-6、TNF-β、IFN-β and LPS.Hepcidin has positive correlation with IL-6、LPS.

Hepcidin;LPS;Anemia;IL-6;Cytokines

R735，R446.62，R556.9

A

1674-1129(2013)01-0013-2

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.01.005

基金编号：苏州市2009年科技发展项目(SZD0951)

仇慧珠，女，1981年生，主治医师，肿瘤专业。

潘湘涛，医学博士，研究生导师。