Sysmex XE-2100D血细胞分析仪白细胞分类和手工分类的比较

简正伟，石淙，张长林，江梅，万腊根

(南昌大学第一附属医院检验科，江西南昌330006)

·实验研究·

Sysmex XE-2100D血细胞分析仪白细胞分类和手工分类的比较

简正伟，石淙，张长林，江梅，万腊根

(南昌大学第一附属医院检验科，江西南昌330006)

目的探讨Sysmex XE-2100D血细胞分析仪白细胞分类和手工分类结果的差异，以验证该仪器白细胞分类结果的准确性。方法取Sysmex XE-2100D血细胞分析仪检测后未触犯推片规则的20份病人标本，重复检测2次。对每份标本分别制作2张血涂片，由两位有经验的检验人员进行人工分类，每张涂片分类200个细胞。比较仪器分类的平均值是否在手工分类结果99%可信区间内，在可信区间内为合格。结果Sysmex XE-2100D进行中性粒细胞(N%)、淋巴细胞(L%)、单核细胞(M%)分类时合格率均为90%；进行嗜酸性粒细胞(E%)和嗜碱性粒细胞(B%)分类时其合格率分别为95%和75%。结论Sysmex XE-2100D血细胞分析仪进行白细胞分类准确性较高，对于未触犯推片规则的分类结果可以直接发报告。

Sysmex XE-2100D血细胞分析仪；白细胞分类；手工法；比较

随着检验技术的飞速发展，越来越多的检验仪器运用于临床，新的仪器设备极大地提高了临床标本的检测速度，减轻了检验人员的工作量，提高了工作效率。测定结果的准确性对临床的辅助诊断以及对病情的连续监测起着至关重要的作用。为了验证本科室在用的Sysmex XE-2100D血细胞分析仪白细胞分类的结果准确性，我们对Sysmex XE-2100D血细胞分析仪白细胞分类与手工分类进行比较，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 主要仪器与试剂

1.1.1 日本希森美康公司生产的Sysmex XE-2100D血细胞分析仪及其配套校正品、质控品和试剂。

1.1.2 瑞氏-吉姆萨染色液为珠海贝索生物科技有限公司生产。

1.1.3 日本奥林帕斯公司生产的OLYMPUS CH-21光学显微镜。

1.2 样本随机抽取Sysmex XE-2100D血细胞分析仪检测后未触犯推片规则的20份病人标本。

1.3 方法

1.3.1 血细胞分析仪分类严格按照Sysmex XE-2100D血细胞分析仪作业指导书操作，对随机抽取的20份病人标本重复检测2次，分别记录两次分

类的检测结果，取二者平均值用于后续分析，样本检测在1h之内完成。

1.3.2 手工分类法仪器分类结束后，立即由两位经验丰富的检验人员，按照《全国临床检验操作规程》[1]的要求，充分混匀样品管，各取10μl血制成头、体、尾分明的血片2张用瑞氏-吉姆萨染色液进行染色。采用双盲法，每个检验人员各分类一张涂片，每张涂片分类200个细胞。

1.3.3 判断合格标准参考CLSI的H20-A的标准计算手工分类结果百分率的标准误S(x)p，再计算出某一参数百分率的99%的可信限[2]。手工分类结果百分率的标准误：S(x)p=[p×q/n]1/2。某一参数百分率的99%的可信限：p±2.56[p×q/n]1/2。

将Sysmex XE-2100D分类结果平均值与手工分类结果99%的可信限进行比较，小于99%可信范围上限而大于99%可信范围下限的判定为合格，超出此范围的判定为不合格。合格率=合格数÷总的标本数。

1.4 统计学方法运用EXECL软件进行数据分析。

2 结果

2.1 Sysmex XE-2100D血细胞分析仪中性粒细胞分类和手工分类的结果比较见表1。

2.2 其他分类结果合格率依照上述方法，Sysmex XE-2100D血细胞分析仪淋巴细胞(L%)、单核细胞(M%)分类结果合格率均为90%；嗜酸性粒细胞(E%)分类结果合格率为95%；嗜碱性粒细胞(B%)分类结果合格率为75%。

表1 中性粒细胞分类和手工分类的结果比较

3 讨论

随着检验医学的不断发展，大量的新技术新设备应用于检验科，自动化程度不断提高，越来越多的医院过分的依赖于仪器的检测结果，而忽视了手工形态学检查[3，4]。Sysmex XE-2100D血细胞分析仪采用半导体激光的流式细胞技术结合细胞化学染色荧光技术进行WBC分类。根据由半导体激光处理过的细胞所产生的前向散射光、侧向散射光和侧向荧光信号的不同，把白细胞分为中性粒细胞(N)、淋巴细胞(L)、单核细胞(M)、嗜酸性粒细胞(E)和嗜碱性粒细胞(B)等5类。前向散射光反映细胞的体积；侧向散射光反映细胞的内容物，如核和颗粒等；侧向荧光反映细胞脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的含量。并将X轴表示侧向散射光强度和Y轴侧向荧光强度绘制L、M、E、N+B的散射图，便于直观分析。

手工显微镜白细胞分类是根据血细胞的大小、细胞浆和细胞核的染色情况以及有无核仁和

颗粒等特征进行分类计数，是实验室白细胞分类的参考方法。通过上述比较，我们可以得出结论，Sysmex XE-2100D血细胞分析仪对未触犯推片规则的患者样本中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞分类结果和手工显微镜检有很好的符合性。但是对于嗜碱性粒细胞分类结果有一定误差，可能是因为嗜碱性粒细胞出现在外周血中的数量少，或者是其在血片中分布不均匀。我们手工镜检只分类200个细胞，而仪器分类数量大(大约10000个)，从而使仪器嗜碱性粒细胞分类结果比手工分类结果偏高[5]。对于2例中性粒细胞和淋巴细胞不合格的样本，我们查阅了患者病历，发现两名患者均为呼吸科老年男性患者，分别为恶病质、肺腺癌的病人和慢性呼吸衰竭、慢性阻塞性肺气肿(急性加重)的病人，仪器分类结果和手工镜检结果相比较其中性粒细胞结果偏低，淋巴偏高。可能是因为慢性呼吸病患者组织换气长期处于失代偿状态，引起细胞的形态有所改变，仪器计数把部分变形的中性粒细胞计算成淋巴细胞，造成中性粒细胞结果的偏低和淋巴细胞结果的偏高。另外，2例单核细胞不合格的患者均为深度烧伤、低血容量休克的病人，仪器分类结果比手工镜检结果偏高。可能是由于烧伤病人容易继发感染，引起部分中性粒细胞出现中毒颗粒，形态发生改变，把部分形态异常的中性粒细胞误计数为单核细胞。所以，对于烧伤科的病人，如果有单核细胞结果偏高的样本，最好也要进行手工分类，以提高结果的准确性。

综上所述，Sysmex XE-2100D血细胞分析仪对于未触犯推片规则的样本分类结果有较高的准确性，可以用仪器代替手工镜检，直接发报告。但对于分类结果嗜碱性粒细胞偏高较多的样本，建议手工镜检，以提高样本分类结果的可靠性。

[1]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京:东南大学出版社,2006:123.

[2]刘成玉,罗春丽.临床检验基础[M].第5版.人民卫生出版社,2012: 47.

[3]王志东,王亚,李颢.全血涂片染色镜检在临床中的价值及体会[J].国际检验医学杂志,2011,32(15)：1780-1781,1786.

[4]伍柏青,傅新文.当代五分类血细胞分析仪技术原理分析[J].实验与检验医学,2011,29(4):391-394.

[5]Barnes PW,McFadden SL,Machin SJ,et al.The international consensus group for hematology review:suggested criteria for action following automated CBC and WBC differential analysis[J].Lab Hematol,2005,11(2):83-90.

Comparison research on leukocyte differential count between Sysmex XE-2100D hematology analyzer and manual oper-ation

JIAN Zhengwei,SHI Cong,ZHANG Zhanglin,et al.Department of Clinical Laboratory,the First Affiliated Hospital of Nanchang University,Nanchang 330006,China

Abstrac:ObjectiveTo investigate the difference of leukocyte differential count between Sysmex XE-2100D hematology analyzer and manual operation.Methods Blood samples from patients were detected by Sysmex XE-2100D hematology analyzer and 20 samples that did not violate the smear rules were selected.These 20 samples were detected duplicatedly by Sysmex XE-2100D hematology analyzer and 2 blood smears were made for each sample.Two hundred leukocyte cells were differentiated in each smear by 2 professional technicians with manual operation.The leukocyte differential count results were compared between Sysmex XE-2100D hematology analyzer and manual operation by setting the 99%confidence interval as satisfaction standard.Results By using manual operation as reference,the passing rate of Sysmex XE-2100D hematology analyzer on neutrophil,lymphocyte,monocyte,acidophilic granulocyte and basophile granulocyte differential count was 90%,90%,90%,95%and 75%respectively.Conclusion Sysmex XE-2100D hematology analyzer has fine accuracy on leukocyte differential count.The results of leukocyte differential count detected with Sysmex XE-2100D hematology analyzer without violating the smear rules can be reported directly.

Sysmex XE-2100D hematology analyzer;Leukocyte differential count;Manual operation;Comparison

R446.11+1

A

1674-1129(2013)01-0018-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.01.007

江西省科技支撑计划项目，编号：20121BBG70049

简正伟，主管技师，主要研究方向分子诊断学和临床血液学检验。

万腊根，主任医师、教授，研究生导师。