血细胞分析仪法和温氏法测定红细胞比容的比较

闫国庆，沈爱蓉，李宏伟，王桂祥

(1、北京市顺义区空港医院，北京101318；2、北京市延庆县永宁社区卫生服务中心，北京102104)

血细胞分析仪法和温氏法测定红细胞比容的比较

闫国庆1，沈爱蓉1，李宏伟2，王桂祥1

(1、北京市顺义区空港医院，北京101318；2、北京市延庆县永宁社区卫生服务中心，北京102104)

红细胞压积；血细胞分析仪；温氏法；

红细胞比容(HCT)是血液中红细胞所占全血体积的百分比，是计算血液指数中的平均红细胞体积(MCV)和平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)不可缺少的数值，也是临床医生计算血容量的核心数据之一[1-4]。所以在临床上血细胞比容对贫血的诊断分类、脱水患者的补液、大出血中的输血、患者的用药、愈后判断和血液黏度等多方面都有着重要的意义。随着我国医学事业的迅猛发展，测定红细胞比容的温氏法(Wintrobe)在临床检验中，逐渐被操作简单便捷的仪器测定法所取代。由于两种方法的原理不同，通过统计学计算，测定结果存在差异。本文作者分别使用上述两种实验方法测定健康人群和贫血患者的红细胞比容，对上述问题进行探讨。

1 材料与方法

1.1 临床资料在2012年5月至10月，我地区村民健康体检中，选择20岁至50岁无疾患的健康体检者60例和同期门诊住院的贫血患者(血红蛋白小于110 g/L)30例，作为本文的实验对象。

1.2 仪器与试剂日本SYSMEX XS-800i全自动血液分析仪及相配套的试剂。温氏红细胞比容管、细长毛细滴管，白杨医用低速离心机。

1.3 红细胞压积测定方法清晨空腹抽取静脉血2ml与EDTA-K20.2ml混匀。仪器法使用SYSMEX XS-800i全自动血液分析仪，所用试剂均为执信医疗北京公司的配套产品，指控品为4oC Plus，按照仪器与试剂说明书规范操作，每份样品重复测3次取平均值。温氏法用细长毛细滴管吸取混匀抗凝血液，插入温氏红细胞比容管内，慢慢将血液注入至10处，防止气泡产生，3000r/min离心30 min读取红细胞层柱的高度，再离心10 min直到红细胞不再沉降为止[5]。

1.4 参考区间男：0.40～0.50L/L(40%～50%)；女：0.37～0.45L/L(37%～45%)。

1.5 统计分析红细胞压积检测的实验数据用均数±标准差(x±s)表示，采用SPSS15.0统计软件进行数据分析，利用配对t检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 健康人与贫血病人两法检测结果见表1。

表1 仪器法和温氏法血HCT统计结果比较

健康人及贫血病人两法均有显著差异，P＜0.01。健康人两法检测结果：仪器法为0.44±0.03，温氏法为0.46±0.04，贫血病人两法检测结果：仪器法0.35±0.03，温氏法0.37±0.03，温氏法比仪器法测定结果偏高。

3 讨论

本实验比较的两法于两个实验组中均有显著性差异，健康人两法检测结果均在男性0.40－0.50L/L(40%～50%)，女性0.37～0.45L/L(37%～45%)的正常范围内；贫血病人两法检测结果均在男性＜0.40L/L，女性＜0.37L/L，说明两法在检测方法上的差异不会影响贫血的诊断。仪器法比温氏法的检测结果偏低，此现象在贫血组中更明显，在健康人仪器法比温氏法平均低3.17%，在贫血组仪器法比温氏法低5.75%，说明仪器法与温氏法所测结果差值随着HCT值降低而加大。温氏法测定结果偏高的原因在于红细胞对血浆的捕获效应使血浆造成陷留，有实验证明离心后红细胞间仍有2%～3%血浆存在[6]，不能完全排除残留血浆的影响。而当红细胞变形能力下降时，血浆残留会增多，因此健康

人用温氏法测定红细胞压积时影响因素较小，差异程度较低。仪器法在测定HCT时，是根据平均红细胞压积(MCV)及红细胞数量得出的计算值，因此凡是能影响质量控制及平均红细胞压积测定的影响因素，均影响红细胞压积的测定[7]。同时为避免影响血细胞体积的测定，在选择抗凝剂时，应选择溶解度高、溶解快的EDTA-K2[8]，采用推荐浓度( 150g/L)的EDTA-K20.02ml干燥抗凝管严格抗凝2ml全血，充分混匀后再进行测定。冷凝集、严重红白细胞增多、红细胞碎片等等，也影响仪器法对红细胞压积的测定，但减少了红细胞变形能力的影响。

其次测定红细胞比容两种实验方法的原理是不同的，仪器法是红细胞通过仪器细孔时，引起测定电压变化，经过红细胞计数的累加计算，此地其红细胞比容的数值。单个红细胞体积的大小，也会影响到上述电压的强弱，所以仪器法测定红细胞比容也适用于不同类型贫血患者的血红细胞比容测定。温氏法测定红细胞比容是长时间的(一般为40～50 min)离心，将红细胞沉降到温氏管的底部，形成红细胞层，通过温氏管的刻度，报告其红细胞比容的测定数值。但由于红细胞对血浆的捕捉效应，使血浆在红细胞层中造成陷留，使温氏法的红细胞比容数值是真值加上红细胞捕捉血浆量之和。所以本文的两组实验数据温氏法的均值略高于仪器法的均值。统计学计算显示有较大的差异。由于仪器法测定标本红细胞比容的数值更接近于真值，且操作便捷，试验耗时较小，故仪器法的测定在临床得到了普遍应用。

[1]梁勤.SYSMEXXT-1800i全自动血细胞分析仪应用体会[J].实验与检验医学,2010,28(5):533.

[2]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京:东南大学出版社,2006:128-129.

[3]许文荣,王建中.临床血液学与检验[M].第4版.北京:人民卫生出版社,2007:170-171.

[4]王永福,林桂青.妊高症孕妇血脂水平和红细胞压积检查的临床意[J].实验与检验医学,2012,30(3):284-285.

[5]李影林,卢椒文,刘雅琴.临床医学检验手册[M].长春：吉林科学技术出版社,1978:71-72.

[6]王天佑.血液流变学[M].乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社,1992:52～53.

[7]陈淑红,李淑霞.红细胞比积测定方法及结果的比较[J].宁夏医学杂志,2002,24(7):423.

[8]方蓉,黄宇烽,郑钧,等.抗凝剂浓度不同血液的血细胞计数仪分析结果[J].临床检验杂志,2001,19(2):105.

R446.11+1

B

1674-1129(2013)02-0193-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.02.039