药品杂质检查研究进展*

2013-02-15王丽琴王慧琛

天津药学 2013年6期

王丽琴，赵　喆，王慧琛

(天津市药品检验所，天津　300070)

药品是用于预防、治疗、诊断疾病的特殊商品。药品质量的优劣直接关乎公众的健康和安全。药品不良反应的发生有时与药品中所含有杂质相关，加强药品杂质控制是保证药品质量和用药安全有效的重要体现[1]。随着公众和媒体对药品安全性的日益关注，药品中的杂质已成为药品质量控制中的重要指标[2]。人类对药品纯度的认识是在防治疾病的实践中积累起来的，并随着分离、检测技术的提高而进一步发现药品中存在的新杂质，从而不断提高对药品纯度的要求。目前《中国药典》(ChP)、《欧洲药典》(EP)、《英国药典》(BP)、《美国药典》(USP)均对杂质加以控制。2005年，国家食品药品监督管理局发布了《化学药品杂质研究的技术指导原则》之后，不仅在新药审评过程中，而且在国家药典会组织的历次药品标准提高行动计划中，以及全国评价性抽验工作中，对药品杂质评价予以高度重视，极大地促进了药品质量的提高。

1　药品杂质及来源

1.1药品杂质药品杂质是指药品中所含有的没有治疗作用、可能影响药品的稳定性和疗效，甚至是对人体健康有害的物质，包括有机杂质、无机杂质及残留溶剂[3]，来源于工艺杂质、降解产物、从反应物及试剂中混入的杂质等。以往的质量标准中一般仅在原料药中对药品的杂质加以控制。近年来，随着分析技术的发展，如TLC、HPLC、GC、质谱联用技术的应用，发现制成的制剂也同样存在特殊杂质。因此，对制剂也增加了杂质检查项目。仅《中国药典》2005年版收载的制剂中，制定有关物质检查项的已达175个。随着对药品安全性重视程度的不断提高，《中国药典》2010年版又有565个品种增加了液相色谱法测定有关物质，97个品种增加了残留溶剂检查。

1.2药品杂质来源药品的纯度是反应药品质量的一项重要指标。药品的杂质检查分为一般杂质检查和特殊杂质检查。一般杂质在自然界中分布广，生产和贮存过程中易引入多种药品中，如酸性或碱性物质、氯化物、硫酸盐、重金属、砷盐等无机杂质。另外，生产过程中常使用盐酸、硫酸等，若洗涤精制不到位，在成品中常引入一般杂质。特殊杂质是某种药品生产或贮存过程中易引入的独有的杂质，多指有机杂质，也包括残留溶剂和手性化合物中无特殊毒性的对映体[4]。如咖啡因中的其他生物碱、甲硝唑中的2-甲基-5-硝基咪唑，贮存过程中发生水解反应的普鲁卡因中的对氨基苯甲酸水解产物，解热镇痛药阿司匹林中的水杨酸等。盐酸哌替啶早在1948年已被收入《英国药典》并被广泛应用，直至1970年经气相色谱分离检定，才发现其中还混有两种无效的异构体(Ⅱ)和(Ⅲ)，这些杂质是由于生产工艺条件控制不当而产生的，其杂质含量有时高达20%～30%。

2　杂质检查方法

2.1无机杂质无机杂质的产生与生产工艺有关，直接影响药品的稳定性，而对于无机杂质，各国药典都收载了经典、简便而又行之有效的检测方法，可根据实际情况，采用药典收载的方法进行质量考察及控制。通常一般杂质如氯化物、硫酸盐等，药典中采用与对照液比浊的方法进行限度检查。铅作为重金属的代表，以铅的限量表示重金属限度。如需对某种(些)特定金属离子或上述方法不能检测到的金属离子作限度要求，可采用专属性较强的原子吸收分光光度法或具有一定专属性的经典比色法。检测砷需采用砷盐检查法进行专项考察和控制，各国药典收载的方法已历经多年验证，行之有效，可加以引用。对于药典尚未收载的无机杂质(如磷酸盐、亚磷酸盐、铝离子、铬离子等)的检测，可根据其理化特性，采用具有一定专属性、灵敏度的方法，如离子色谱法、原子吸收分光光度法、比色法等。

2.2有机杂质及残留溶剂有关物质是指在药物制备好贮存过程中,根据药物性质和合成方法可能产生的杂质[5]。有机杂质检查主要包括化学法、光谱法、色谱法等，依据药品结构及降解产物的不同采用不同的检测方法。目前普遍采用的杂质检测方法主要为薄层色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法，此外，毛细管电泳(CE)、超临界流体色谱(SFC)以及联用技术等[6,7]，近年来发展很快，在测定特殊杂质中的应用正逐年增加。在上述方法中，TLC法设备简单，操作简便，快速，优势在于药品的定性鉴别；HPLC或GC法由于分离分析的定量优势，成为新药研发不可缺少的手段。

2.3方法的建立与验证药品中杂质的研究主要基于国际人用药品注册和医药技术协调会议工作程序介绍(ICH)分别于2002年2月及2003年2月颁布的《新原料药的杂质研究指导原则》与《新制剂的杂质研究指导原则》，及国家药监局于2005年颁布的《化学药品杂质研究的技术指导原则》的要求，在药品研究、生产、质量标准起草和修订时参考。杂质研究的总体思路就是要结合药品具体的工艺以及产品的特点开展研究。首先，要结合具体工艺及产品特点来分析产品中可能产生什么样的杂质，通过杂质谱的分析对产品中杂质的来源及结构情况有较为全面的了解；然后，在杂质谱分析的基础上，有针对性地选择合适的分析方法，以确保杂质的有效检出及控制；最后，需综合药学、药理毒理及临床研究结果确定合理的杂质限度，从而保证药品的质量及安全性。杂质检测方法的建立与验证主要包括专属性试验、检测限试验、溶液稳定性试验，耐用性试验等内容，如为定量检测杂质，还需进行包括线性、回收率、精密度等试验，从不同的角度、层面验证分析方法的可行性，从而保证药品中的杂质能够有效地检测。另外，杂质检查分析方法的建立，还应考虑普遍适用性，所用的仪器和试材应容易获得，确保质量标准的可行性。

2.4杂质分析方法的应用刘伟强[8]建立了高效液相色谱法测定克林霉素磷酸酯注射液有关物质的方法。采用HPLC对克林霉素磷酸酯注射液有关物质的测定进行方法学研究。

田贵容[9]等采用SephadexG10凝胶柱，建立了测定磺苄西林钠中高分子杂质的方法，测得磺苄西林钠中高分子杂质含量小于0.12%。

金薇[10]建立重酒石酸去甲肾上腺素有关物质的高效液相色谱-电化学检测方法(HPLC-ECD)，结果去甲肾上腺素、肾上腺素、去甲肾上腺酮、多巴胺和 2-氯-1-(3，4-二羟基苯基) 乙酮检测限分别为0.07、0.07、0.08、0.1和 0.2 ng ,4 种有关物质的平均加样回收率为 97.2%、100.4%、98.2%和103.1%；RSD 为 1.6%、1.5%、1、3%和2.8% (n=6)。

王颖[11]建立了离子对反相液相色谱(IP-RPLC) 分析流感泰得有关物质的方法，并将其与离子交换色谱(IEC) 和毛细管凝胶电泳(CGE) 法的分析结果进行比较。

魏宁漪[12]建立了检测大蒜素原料药有关物质的气质联用方法，并对大蒜素的稳定性进行研究，确定了大蒜素原料中的主要杂质为一硫二丙烯、二硫二丙烯和四硫二丙烯，2批样品总杂质分别为 7.20% 和10.11%，可用于大蒜素中有关物质的定性定量检测和稳定性研究。

刘振[13]采用HPLC-ELSD法，建立了1-脱氧野尻霉素、葡萄糖和葡萄糖胺的杂质的分析方法，1-脱氧野尻霉素、葡萄糖和葡萄糖胺的最低检测浓度分别为0.0045、 0.0040和0.0039 mg/ml，RSD均小于10%。

刘长海[14]采用毛细管电泳法检查左旋麻黄碱中对映异构体杂质，麻黄碱及伪麻黄碱对映体得到良好分离,并满足进行左旋麻黄碱中对映异构体杂质检查所需要的条件。

张璐等[15]采用HPLC和LC-MSn分析葛根素及其注射剂中的有关物质，可有效分离主成分葛根素与有关物质,对有关物质能进行初步鉴定。该研究采用HPLC对葛根素原料药和葛根素注射剂中的有关物质进行了系统考察,采用LC-MSn技术对葛根素及其注射剂中有关物质的结构进行了初步鉴定。结果葛根素及其注射剂中存在5种主要有关物质,其中2种为相对分子质量432的同分异构体,推测可能为3＇-羟基葛根素和染料木素-8-C-葡萄糖苷。

原欢欢[16]采用 RP-HPLC法同时测定梓葛冻干粉针中梓醇和葛根素含量并考察其有关物质，梓醇和葛根素回收率分别为 100.45% 和 98.17%， RSD 均小于 2%，为梓葛冻干粉针质量标准的制定提供参考。

药品中的杂质是影响药品质量的重要因素，应尽可能确定药品中杂质的来源、性质、检测方法及其限量，同时不断改进药品的生产工艺，降低药品的杂质含量，并制定相应的法规标准，从各个环节保证和提高药品的质量。近年来此项工作虽有了长足的进步，但仍然是我国药品研究工作的薄弱环节，为尽快地缩小和消除与欧美国家先进水平的差距，提高药品的质量，药品研发和生产者应共同努力，对药品中的杂质进行规范地研究，将其控制在安全、合理的限度范围内，以保证药品质量，减少药品不良反应的发生，确保人民的用药安全。

1王胜浩,林芳,左军斌.有关物质检查方法的研究进展[J].浙江省医学科学院学报,2001, 12(3)：37

2胡昌勤.化学药品杂质控制的现状与展望[J].中国科学，2010，40(6)：679

3金祥飞,沈卫阳.药品中有关物质的色谱法分析研究近况[J].药学进展,2009,33(12):543

4肖莹,倪坤仪.新药中特殊杂质的分析研究进展[J].中国新药杂志,2002,11(5):364

5宋丽,臧志和，廖洪利，等.药品中有关物质检查方法研究进展[J].西南国防医药，2007，2(3)：202

6于清峰,倪坤仪,王志群，等.药品中有关物质的色谱法分析[J].药学进展,2000,24(5)：270

7宋丽. 药物中特殊杂质检查方法的研究进展及评价[J].成都医学院学报，2007,2(3):202

8刘伟强.克林霉素磷酸酯注射液杂质检查方法的研究[J].中国现代药品应用，2011，15(5):136

9田贵容,吕露阳,方梅,等. SephadexG10凝胶色谱法测定磺苄西林钠中的高分子杂质[J].华西药学杂志, 2007, 22(6): 699

10金薇，彭兴盛，陈阳,等.HPLC-ECD 测定重酒石酸去甲肾上腺素的有关物质[J].药物分析杂志, 2011，31(8):1485

11王颖,鲁丹丹,张玉林,等. 离子对反相液相色谱法分析硫代寡核苷酸药物流感泰得的有关物质[J].分析化学,2011,39(12):1811

12魏宁漪，吴建敏，张启明. GC-MS法测定大蒜素有关物质和稳定性研究[J].药物分析杂志,2011，31(9):1699