血清GP73联合AFP和CA199检测在肝癌诊断中的临床意义

赵运胜 张丽娜 李洪臣 崔辰莹 吴 侠

原发性肝癌（primary hepatic cancer，PHC）是目前世界上致死率最高的恶性肿瘤之一，在全世界范围内的发病率有逐年上升的趋势［1］。早期诊断PHC是治疗和延长PHC患者生存期的最主要策略。血清AFP（alpha-fetoprotein）是目前检测PHC最常用的肿瘤标志物，但其灵敏度和特异性都不够满意［2］。

血清蛋白GP73（serum Glogi glycoprotein 73）有望成为早期诊断PHC及预后的新标志物［3-4］。GP73是定位于高尔基体的一种Ⅱ型跨膜蛋白，分子量为73 kD，由胞内、跨膜和胞外3个区域构成，其N-末端为胞外段，是与其他蛋白相互作用的主要功能区。其编码基因位于第9号染色体，全长3 042 bp。GP73主要表达于人类多种组织的上皮细胞，正常肝脏组织表达甚微，但肝细胞受到病毒感染或肝癌时明显高表达［5-6］。早在2005年，Block等就提出，在肝癌患者血清中，GP73水平显著升高［7］。且有文献报道GP73检测肝癌的敏感度可达69%，特异性可达90%［8］，但也有个别报道GP73的灵敏度和特异性与AFP相当甚至低于AFP［9-10］。

肝癌诊断的每一种血清标志物在诊断价值上可能都有其自身的价值但也都有一定的局限性。已有研究提议将GP73与其他常用肿瘤标志物联合检测，以提高原发性肝癌诊断的意义［11-12］，但这种联合检测的价值还需临床数据的证实。因此，本文探讨了GP73及其联合AFP和CA199检测在肝癌诊断中的意义。

1 材料与方法

1.1 研究对象

选取我院2011年4至9月的住院、门诊和体检人员共计130例，其中经过病理检验明确的PHC患者50例（男38岁，女12岁），年龄32～81岁，平均57岁；肝炎患者20例（男11岁，女9岁），年龄36～57岁，平均48岁；肝硬化患者20例（男15岁，女5岁），年龄41～81岁，平均55岁；其他消化系统恶性肿瘤患者20例（男14岁，女6岁），年龄47～78岁，平均69岁；健康对照者20例（男10岁，女10岁），年龄21～45岁，平均34岁。

1.2 主要仪器

CODA全自动酶标仪和罗氏2010电化学发光仪。

1.3 试剂

GP73测定试剂盒购自上海瑞奇科技有限公司；AFP和CA199测定试剂盒购自上海罗氏诊断产品有限公司。

1.4 标本采集

受检者均采集空腹静脉血3 mL，用促凝管采血后将分离的血清储存于-80℃冰箱待测。

1.5 检测方法

GP73测定采用酶联免疫定量方法检测，按说明书操作；AFP和CA199检测采用罗氏电化学发光免疫分析系统。

1.6 统计学方法

利用SPSS 13.0统计软件进行统计学分析。检测数据均为偏态分布，采用中位数（四分位数）表示，不同组别间计量资料比较采用Mann-Whitney U非参数检验，计数资料采用χ2检验，GP73、AFP和CA199间的相关性分析采用Spearman非参数检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组血清GP73、AFP和CA199含量检测结果比较

肝癌组GP73含量明显高于其它各组（P均＜0.05），而肝硬化组和其他消化系统恶性肿瘤组的GP73含量也分别明显高于对照组和肝炎组（表1，P＜0.05）。肝癌组血清中AFP含量明显高于其他各组（P均＜0.05），而肝炎组、肝硬化组和其他消化系统肿瘤组血清中AFP含量分别明显高于对照组（表1，P均＜0.05）。肝癌组CA199含量分别明显高于其他四组（P均＜0.05），且肝炎组和肝硬化组明显高于对照组（表1，P＜0.05）。

表1 各组血清GP73、AFP和CA199含量检测结果比较［中位数（四分位数）］Table1 Comparison of serum GP73，AFP，and CA199 levels in every group［median（quartile）］

2.2 ROC曲线分析GP73、AFP和CA199对PHC的鉴别诊断效果

采用ROC曲线分析GP73、AFP和CA199单独用于鉴别诊断肝癌和非肝癌的效果，曲线下面积分别为 0.824、0.668、0.732；各自 95%置信区间分别为0.735～0.912、0.564～0.773、0.641～0.824（图l）。

通过ROC曲线分析将GP73、AFP和CA199鉴别诊断肝癌的临界值分别设定为72.7 μg/L、108.0 μg/L、67.7 U/mL（根据灵敏度+特异性最大的原则设定）。

2.3 血清GP73、AFP和CA199单项及其联合检测对PHC的诊断价值

肝癌组血清GP73和AFP阳性检出结果分别明显高于其他各组（P＜0.05），肝癌组CA199阳性检出结果也明显高于肝炎组、肝硬化组和正常对照组（P＜0.05），但和其他消化系统肿瘤组无明显差异（P＞0.05，表2）。

图l GP73、AFP和CA199鉴别诊断PHC的ROC曲线分析Figure1 ROC curve analysis of GP73，AFP，and CA199 for the diagnosis of PHC

单项检测中，GP73的灵敏度、特异性和准确率都最高。联合检测中，GP73/AFP/CA199平行实验灵敏度最高，GP73+AFP+CA199系列实验特异性最高，GP73/AFP平行实验准确率最高（表3）。

2.4 血清GP73与AFP和CA199之间的相关性分析

GP73与AFP，GP73与CA199，AFP和CA199的相关系数分别为-0.035，0.007，0.136，P均＞0.05，三个指标之间并无相关性。

表2 各组血清GP73、AFP和CA199阳性检出率比较Table2 Comparison of the positive rate in every group about GP73，AFP，and CA199

表3 血清GP73、AFP和CA199单项及联检对PHC的诊断价值比较Table3 Comparison of the diagnosis value about single and combined examination of GP73，AFP，and CA199 for PHC

3 讨论

PHC治疗效果取决于早期诊断。GP73是新近发现的PHC血清标志物之一［3-4，13］。本文结果显示肝癌患者GP73含量明显高于非肝癌患者，肝硬化和其他消化系统肿瘤患者血清中GP73含量与对照组和肝炎组相比也有所升高。之前也曾有过文献报道随着肝脏疾病的进展，GP73会升高［14］，肝硬化和肝癌患者中GP73水平明显高于肝炎患者和正常人［15］。另外，将其各组的阳性检查率做比较，发现肝癌组的阳性检出率明显高于其它各组。ROC曲线下面积分析GP73最大，单项检测中其灵敏度和特异性也最高。因此，本文结果支持血清GP73含量对检测肝癌的临床意义。

本文数据表明血清中AFP含量在PHC、肝炎组，肝硬化组和其他消化系统肿瘤组均明显高于对照组，文献报道AFP在肝癌、胃癌、肺癌、胰腺癌、胆道肿瘤和睾丸肿瘤等多种临床疾病的患者血清中升高［16］，这些都说明AFP诊断PHC的特异性不够。但本文数据也说明肝癌组AFP升高的阳性检出率仍然明显高于其他各组，说明AFP对于肝癌的鉴别诊断仍有临床价值。另外，肝癌组血清中CA199含量分别明显高于其它各组，肝癌组CA199的阳性检出率明显高于肝炎组、肝硬化组和对照组，而和其他消化系统恶性肿瘤组差异不明显，这些说明CA199是诊断消化系统恶性肿瘤通用标志物之一。相应地，GP73和其他指标联合检测可能提高肝癌检出灵敏度。

本文结果表明，GP73和其它标志物联合检测可提高诊断PHC的灵敏度和特异性，GP73+AFP+CA199同时阳性诊断PHC的特异性达100%，可作为确诊PHC的较好组合标志物。选用上述三种标志物任一阳性诊断PHC敏感度升高，GP73/AFP/CA199灵敏度达92%，可作为排除肝癌的较好的判断方法。GP73/AFP在所有两指标组合中灵敏度最高，诊断效果也最好。因此，在平时的临床工作中，可以根据不同的诊断目的选择不同的项目组合。

总体而言，本文结果表明血清GP73单独诊断PHC的灵敏度和特异性都优于单用AFP和CA199；其联合AFP和CA199同步阳性检测可提高对PHC诊断的可靠性。

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