慢性心力衰竭患者血管内皮因子和超敏C反应蛋白水平变化及其与心功能分级的关系

冯金花 (青海省人民医院老年病科，青海 西宁 810000)

慢性心力衰竭(CHF)发展过程中，血清中相关细胞因子会有明显改变〔1〕。血管内皮生长因子(VEGF)是重要的血管内皮生长促进因子，在疾病进展中有重要作用〔2〕。超敏C反应蛋白(hs-CRP)是人类肝细胞合成的急性时相蛋白，当机体受到炎症感染或组织损伤时，其在外周血中表达增高〔3〕。本实验拟通过检测CHF患者血清中VEGF和hs-CRP水平，旨在为CHF的诊断及治疗提供帮助。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2009年1月至2011年1月我院确诊为CHF的患者78例为观察组，纳入标准:①符合Framinham关于CHF的诊断标准;②临床资料完整。排除:①近3个月有严重感染;②其他严重内脏器官疾病。其中男40例，女38例，年龄37～79(平均54.5)岁。心功能分级按NYHA分级，其中Ⅱ级20例，Ⅲ级40例，Ⅳ级18例。选择体检证实为正常的成人血清标本70例作为对照组，其中男40例，女30例，年龄36～78(平均54.1)岁，两组性别、年龄等无明显差异，具有可比性。

1.2 VEGF和hs-CRP检测 观察组患者均于确诊后的次日早晨空腹抽取静脉血5 ml，尽快分离血清，对照组抽取空腹静脉血5 ml，样本均放于-20℃冰箱中待检，并于3 d内集中测定。具体方法:加入50 μl标准品或样品于所设定孔中;在每孔中加入100 μl一抗，轻轻摇动微孔板混匀1 min;室温避光孵育30 min;洗板3次，每次加入250 μl洗液，最后一次尽量甩干并在吸水纸上吸干;每孔加入150 μl二抗(避免阳光直射和工作台温度过低，孵育时适当覆盖微孔板);室温避光孵育30 min;洗板3次，每次加入250 μl洗液，最后一次尽量甩干并在吸水纸上吸干;加入100 μl的TMB底物(底物本身无色，出现颜色变化不能使用);室温避光孵育孵育10～15 min，加入100 μl终止液终止反应，在450 nm下读OD值(读数前使用无绒布擦拭微孔底部水分和指模)。

1.3 统计学方法 应用SAS6.12统计软件，两组间比较采用t检验，多组间比较应用方差分析，并用SNK法进行两两比较及线性相关分析。

2 结果

2.1 两组VEGF和hs-CRP表达水平比较 观察组患者血清中 VEGF〔(398.54±45.24)vs(123.24±27.25)mg/L，t=5.75，P=0.019 2〕和 hs-CRP表达〔(4.35±1.25)vs(1.03±0.68)mg/L，t=9.85，P=0.008 3〕明显高于对照组〔(4.35 ±1.25)mg/L〕。

2.2 观察组中不同心功能分级患者血清VEGF和hs-CRP表达 观察组不同心功能分级患者随着心功能分级增加，血清VEGF和hs-CRP表达明显升高(P＜0.01)。见表1。

表1 观察组中不同心功能分级患者血清VEGF和hs-CRP表达(mg/L)

2.3 观察组患者血清中VEGF和hs-CRP表达相关性 观察组患者血清 VEGF和hs-CRP表达呈正相关(r=0.43，P=0.029 1)。

3 讨论

CHF由心肌梗死、心肌纤维化、心肌硬化等引起，临床主要表现为进行性心肌肥大、心功能减退、心律失常及猝死等。早期诊断和治疗对患者有重要的积极意义。其发病机制是多种因素引起心肌细胞和细胞外基质变化，激活神经内分泌和释放多种活性细胞因子，促进心肌重构，加重心肌细胞损害和损伤心肌的功能。传统检测具有一定局限性，近来人们更倾向于关注血清中相关因子的影响及临床价值。hs-CRP主要由炎性因子诱导，激活补体，促进吞噬并具有免疫调控作用。VEGF具有促进内皮细胞增殖分裂、改善内皮细胞功能的作用，在多种疾病中表达升高〔4〕。近来也有学者关注VEGF在心力衰竭患者中表达，并认为其对疾病进展有一定意义〔5〕。

本实验结果提示VEGF和hs-CRP表达与心力衰竭发生发展密切相关，二者具有促进疾病进展的重要作用。心力衰竭发生时，机体内炎性介质表达也升高，而作为促进炎性发生的hs-CRP对炎性介质进展有促进作用，同时炎性介质又可以促进hs-CRP表达，而大量hs-CRP激活后，直接或间接使血管内皮细胞受损，引起心肌细胞供血不足，促使心功能恶化。也有观点认为hs-CRP能与损伤的细胞膜相结合，激活补体，启动凝血系统，促进血栓形成，增加心血管系统风险。有研究证实VEGF可促进心肌侧支循环建立，增加心肌血供，改善心肌缺血。充血性心力衰竭患者由于左室舒缩功能退化，血流动力学发生改变，患者血液处于高凝状态并导致全身器官组织缺血缺氧，而组织缺血、缺氧正是诱导 VEGF高表达的重要因素〔6，7〕。由于NYHA分级与患者预后有关，而且联合检测VEGF和hs-CRP与NYHA分级有关，提示VEGF和hs-CRP表达可能与预后相关。本结果提示VEGF和hs-CRP二者具有正向协同效应，但是关于二者协同机制并不完全清楚，需要基础实验证实。

1 吴再涛，李 玲，马贞枝，等.慢性心力衰竭患者血清CRP水平的变化及临床意义〔J〕.中华全科医学，2010;8(11):1403-4.

2 郭 燕，李 侠，张枫林，等.TNF-α、sTNFR-1、sTNFR-2和 VEGF水平变化对不同程度老年慢性左心衰竭的影响〔J〕.现代中西医结合杂志，2011;20(22):2733-5.

3 万荣文，邓湘辉，管 燕，等.缬沙坦联合培哚普利对慢性心力衰竭患者心功能及血浆BNP、CRP、IL-6的影响〔J〕.现代生物医学进展，2011;11(17):3326-7.

4 朱海霞.慢性心力衰竭患者血清白介素6、高敏C反应蛋白和肿瘤坏死因子α水平的变化及临床意义〔J〕.中国全科医学，2011;14(10B):3362-4.

5 周伟宏.充血性心力衰竭患者血清IGF-1和VEGF浓度的变化及意义〔J〕.中国现代药物应用，2008;2(4):21-4.

6 初红霞，陶志刚，梁荔燕.心力衰竭患者血清血管内皮生长因子和C-反应蛋白的变化及意义〔J〕.中国心血管杂志，2006;11(6):439-42.

7 申屏秋，王卫东，李闽云，等.充血性心力衰竭患者VEGF及P选择素的检测及临床意义〔J〕.武警医学院学报，2003;12(5):347-9.