眼睑基底细胞癌组织中基质金属蛋白酶-2和-9表达及其对预后判断的价值

焦胜敏 (廊坊卫生职业学院，河北 廊坊 065001)

眼睑基底细胞癌是眼睑恶性肿瘤中最常见的一种，常见于老年人，虽然发病缓慢，但其生物学行为仍有自身特点〔1〕。基质金属蛋白酶(MMP)-2和-9是MMPs家族重要成员，对细胞外基质(ECM)降解作用明显，对转移有明显促进作用〔2〕。本实验应用免疫组织化学技术检测眼睑基底细胞癌中MMP-2和-9表达，探讨二者在不同临床特征中的表达差别，关注二者相关性，以期为研究肿瘤生物学行为提供帮助。

1 材料与方法

1.1 材料 2007年10月至2008年10月廊坊市人民医院眼睑基底细胞癌手术后蜡块组织86例，其中男46例，女40例，年龄35～80(平均57.9)岁。纳入均符合WHO关于基底细胞癌诊断标准。排除标准:①术前行放、化疗患者;②临床资料不完全的患者。同时选取眼睑松弛症患者60例正常眼睑组织为对照组，其中男35例，女25例。两组患者一般临床特征无明显差别，具有可比性。随访12～60(平均43.2)个月。

1.2 免疫组织化学方法 MMP-2和-9试剂均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。应用免疫组化SP法检测，应用DAB染色。严格按照试剂盒说明书操作，并均由同一病理科技术人员完成，严格质控。

1.3 结果判定标准 MMP-2和-9免疫组化染色结果均由两位病理主治医师共同阅片得出。MMP-2和-9蛋白均以细胞质有棕黄色颗粒为阳性，每张切片观察10个具有代表性的高倍镜视野，计算阳性细胞百分数，取平均数。结果以≥25%为阳性，以＜25%为阴性。

1.4 统计学方法 采用SAS6.12统计软件进行χ2检验和线性相关分析。

2 结果

2.1 两组患者MMP-2和-9蛋白表达 观察组MMP-2〔50(58.14%)〕和-9表达阳性率〔56(65.12%)〕明显高于对照组〔23(38.33%)，18(30.00%)〕(χ2=5.545 7，P=0.018 5;χ2=17.436 3，P ＜0.000 1)。

2.2 MMP-2和-9表达与基底细胞癌临床病理特征的关系基底细胞癌中MMP-2和-9表达阳性率与肿瘤体积、是否复发及K67表达密切相关。见表1。

表1 MMP-2和-9阳性表达与基底细胞癌临床病理特征的关系〔n(%)〕

2.3 基底细胞癌中MMP-2和-9表达的相关性 经线性相关分析显示，基底细胞癌中MMP-2和-9表达呈正相关(r=0.43，P=0.028 1)。

2.4 基底细胞癌中MMP-2和-9表达与预后的关系 经生存分析显示基底细胞癌中MMP-2和-9表达与生存时间相关(P＜0.05)，即基底细胞癌中MMP-2和-9高表达患者预后差。

3 讨论

基底细胞癌治疗以广泛、彻底切除为主，术后加用放疗，一般预后较为理想，但是患者术后转移及复发较多，主要与其恶性生物学行为有关，主要是侵袭和转移〔3〕。基底细胞癌细胞要实现侵袭和转移，必须穿过由ECM和基底膜构成的屏障，肿瘤生长依靠血管生成，而在侵袭和转移过程中，肿瘤细胞必须穿过由ECM和基底膜构成的屏障。当前观察降解ECM的重要成分是MMPs，而在此过程中起作用的是MMPs家族，MMP-2和-9是锌离子依赖的蛋白水解酶，也称明胶酶，可由肿瘤细胞和间质细胞以酶原形式分泌，并经水解后激活，具有较强的降解基底膜成分功能，被认为与肿瘤恶性进程、侵袭和转移密切相关〔4，5〕。刘洁等〔6〕通过免疫组化方法检测基底细胞癌中MMP-9表达，认为MMP-9表达增加和Ⅳ型胶原表达减少，对基底细胞癌侵袭和转移有重要价值。

本实验结果提示MMP-2和-9在眼睑基底细胞癌发生及进展中起重要作用。联合检测肿瘤中MMP-2和-9表达可能对判断眼睑基底细胞癌患者预后有一定意义。本实验结果提示MMP-2和-9在蛋白水平上具有协同正向作用。MMP-2和-9均具有血管新生的作用，且具有同源性，这是二者协同表达的重要内在原因〔7，8〕，当MMPs激活后，通过与细胞膜上特异性受体结合而发挥多种生物学效应，尤其是促进肿瘤发生发展。

1 狄正鸿，崔 乐，周 卓，等.基底细胞癌中MMP-2、TIMP-4表达的研究〔J〕.中国医科大学学报，2008;37(1):100-2.

2 刘爱东.基质金属蛋白酶-9在胃癌中的表达及意义〔J〕.现代中西医结合杂志，2011;20(18):2226-7.

3 Karahan N，Baspinar S，Bozkurt KK，et al.Increased expression of COX-2 in recurrent basal cell carcinoma of the skin:a pilot study〔J〕.Indian J Pathol Microbiol，2011;54(3):526-31.

4 刘爱东，庞久玲，刘士生.胃癌中基质金属蛋白酶-9和CD105表达关系的研究〔J〕.中国老年学杂志，2009;29(4):886-7.

5 Monhian N，Jewett BS，Baker SR，et al.Matrix metalloproteinase expression in normal skin associated with basal cell carcinoma and in distal skin from the same patients〔J〕.Arch Facial Plast Surg，2005;7(4):238-43.

6 刘 洁，魏羽佳，宋守荣.MMP-9和Ⅳ型胶原在皮肤基底细胞癌和鳞状细胞癌中表达情况的初步探讨〔J〕.贵州医药，2010;34(3):202-4.

7 Yucel T，Mutnal A，Fay K，et al.Matrix metalloproteinase expression in basal cell carcinoma:relationship between enzyme profile and collagen fragmentation pattern〔J〕.Exp Mol Pathol，2005;79(2):151-60.

8 Oh ST，Kim HS，Yoo NJ，et al.Increased immunoreactivity of membrane type-1 matrix metalloproteinase(MT1-MMP)and β-catenin in high-risk basal cell carcinoma〔J〕.Br J Dermatol，2011;165(6):1197-204.