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苁蓉冲剂对白细胞减少症模型小鼠白细胞介素-6的影响*

2012-12-05杨丽张永梅乔姝胡同平张利霞李得春彭忠忠杨玉梅

中国医学创新 2012年35期
关键词:冲剂肉苁蓉空白对照

杨丽 张永梅 乔姝 胡同平 张利霞 李得春 彭忠忠 杨玉梅

苁蓉冲剂是由肉苁蓉、海马、淫羊藿、黄芪、干姜、菟丝子等组成的纯中药制剂,是一老中医临床用于健脾益气、补肾壮阳、强身壮体的经验处方[1]。为探讨苁蓉冲剂对免疫功能的作用,本实验根据使用环磷酰胺后白细胞减少的机理,研究苁蓉冲剂对于白细胞减少症模型小鼠机体免疫力的作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 研究对象 健康昆明种小鼠:体重18~22 g,雌雄各半,购自内蒙古大学实验动物中心,许可证号SCXK(蒙)2002-0001。

1.1.2 药品和试剂 苁蓉冲剂 (包头市药物研究所,批号050616),注射环磷酰胺(200 mg/支,江苏恒瑞医药股份有限公司,批号:10102921)。

1.1.3 仪器 sysmex KX-21全自动血液分析仪检测(日本东亚医用电子株式会社)、酶标仪(芬兰雷勃公司)。

1.2 方法

1.2.1 模型制备 将150只小鼠采用随机化原则分成5组,每组30只:即空白对照组、模型组、苁蓉冲剂大剂量组(2.8 g/kg)、苁蓉冲剂中剂量组 (1.4 g/kg)和苁蓉冲剂小剂量组 (0.7 g/kg)。除空白对照组外,其余小鼠都进行腹腔注射环磷酰胺50 g/kg,1次/d,共7 d,建立化疗白细胞减少症模型(标准:白细胞下降至2.0×109~4.0×109/L)[2]。

1.2.2 药物干预 建模成功后即日起持续灌胃给药,1次/d,0.2 ml/10 g,连续灌胃15 d。空白对照组和模型组给等容量体积生理盐水。

1.2.3 检测IL-6水平及WBC计数 分别于造模前和造模后5、10、15 d 取静脉血,WBC计数使用sysmex KX-21全自动血液分析仪检测,细胞因子IL-6按试剂盒(上海鑫乐试剂有限公司)操作说明采用酶联免疫吸附试验进行检测。

1.3 统计学处理 采用SPSS 17.0统计软件对数据进行统计分析,计量资料以(±s)表示,采用独立样本t检验,P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 苁蓉冲剂对白细胞减低症模型小鼠白细胞计数的影响 建模前各组小鼠白细胞计数无明显差异(P>0.05)。正常对照组与模型组比较,白细胞计数明显降低,与建模后5 d比较有极显著差异(P<0.01), 与建模后10、15 d比较有显著差异(P<0.05),表明制备白细胞减低症模型成功。与模型组比较,苁蓉冲剂给药后5、10 d各剂量组外周血白细胞数量比模型对照组有所增高,但差异无统计学意义(P>0.05),使用苁蓉冲剂15 d大剂量组与模型组白细胞计数比较差异有统计学意义(P<0.01),中、小剂量组与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

2.2 苁蓉冲剂对小鼠IL-6的影响 与空白对照组比较,模型组中IL-6水平降低(P<0.01);苁蓉冲剂 3个剂量组与模型组比较,建模后5、 10、15 d IL-6水平明显增高(P<0.01),且表现出剂量间的依赖关系。见表2。

3 讨论

白细胞减少症按中医辨证属于“虚劳、血虚症” 范围,与心、肝、脾、肾阳气精血不足相关。苁蓉冲剂正是采用肉苁蓉、海马、淫羊藿、黄芪等纯中药制剂为主选药合成,是临床上用于健脾益气、补肾壮阳、强身壮体的经验处方。

IL-6是一种主要由免疫活性细胞分泌的多功能因子,在活化的B细胞产生免疫球蛋白中起重要作用,不仅具有免疫调节及抗肿瘤作用[3],且能促进细胞的增殖分化,诱导肝细胞急性期蛋白的合成。因此选择IL-6免疫活性因子作为本次实验的检测指标。本实验对于注射环磷酰胺的小鼠制造白细胞减少症模型后,对其给予不同剂量的苁蓉冲剂于给药后5、10、15 d分别检测IL-6水平及WBC计数,结果显示造模成功后IL-6水平及WBC计数与空白对照组比较明显降低(P<0.05),苁蓉冲剂治疗后IL-6水平及WBC计数显著升高(P<0.05),说明苁蓉冲剂诱导小鼠细胞因子IL-6的释放,同时使用苁蓉冲剂治疗后第5、10、15天的IL-6水平及WBC计数依次增高,且使用后15 d大剂量组与模型组白细胞计数比较有极显著差异(P<0.01),说明苁蓉冲剂对白细胞减少症有较好的治疗效果,且随使用剂量的增加WBC计数增高。有研究表明,苁蓉冲剂中肉苁蓉能兴奋垂体,有类似肾上腺皮质激素样的作用,能调节机体免疫功能,同时可加强小鼠巨噬细胞的吞噬能力,其多糖可调节小鼠淋巴细胞免疫功能[4-6]。本实验结果正印证了这一点。同时苁蓉冲剂中主要成分肉苁蓉对半乳糖致衰老模型小鼠具有抗衰老作用,提高模型小鼠淋巴细胞转化能力、腹腔巨噬细胞吞噬功能,可明显增强模型小鼠的免疫功能[7-8]。因此认为苁蓉冲剂作用机制可能与提高免疫力有关。

表1 苁蓉冲剂对白细胞减低症模型小鼠白细胞计数的影响(±s) ×109/L

表1 苁蓉冲剂对白细胞减低症模型小鼠白细胞计数的影响(±s) ×109/L

*与正常组比较,P<0.05;**与正常组比较,P<0.01;#与模型组比较,P<0.05,##与模型组比较,P<0.01

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表2 苁蓉冲剂对白细胞减低症模型小鼠IL-6的影响(±s) pg/ml

表2 苁蓉冲剂对白细胞减低症模型小鼠IL-6的影响(±s) pg/ml

*与正常组比较,P<0.05;#与模型组比较,P<0.05;△与模型组比较,P<0.01

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综上表明,苁蓉冲剂对白细胞减少症模型小鼠免疫力低下有较好的治疗效果,其机制可能与提高免疫力有关。苁蓉冲剂具有补肾壮阳、提高免疫功能的作用,但对白细胞减少症免疫功能的影响目前国内外尚未见报道。本次将苁蓉冲剂与白细胞减少症模型小鼠免疫功能联系起来,对提高民族药物的临床使用价值具有重要意义。

[1]刘铮然,张东,武海军,等.苁蓉冲剂对小鼠免疫功能的影响[J].中国民族医药杂志,2010,16(1):43-44.

[2]马骏,刘兴国,张朋,等.升白胶囊对环磷酰胺所致小鼠白细胞减少症影响的研究[J].甘肃中医学院学报,2010,27(2):20-22.

[3]Mule J J, Mc Int osh J k, Jabon D M, et al.Antitum or ac2tivity of recombinant interleukin-6 in mice [J]. J ExpMed,1990,171(45):629.

[4]曾群力,郑一凡,吕志良.肉苁蓉多糖的免疫活性作用及机制[J].浙江大学学报 (医学版),2002,31(4):248-251 .

[5]杨冬梅,贾敏,周玲玲,等.茂枣颗粒对小鼠免疫功能的影响[J].中国中医急症,2006,15(10):1136-1137.

[6]徐辉,魏晓东,欧芹,等.肉苁蓉醇溶成分对致衰大鼠肝线粒体的保护作用 [J].黑龙江医药科学,2007,30(1):10-11.

[7]杨错,邢立国,刘玉兰.柴胡乳剂对小鼠免疫功能的影响[J].沈阳药科大学学报,2006,23(3):169-171.

[8]李淑莲,付克,刘赛妹.柴羊清肝胶囊对小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的影响[J].中医药信息,2009,26(1):88.

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