HPLC法测定蒙药麻黄-4汤散剂中盐酸麻黄碱的含量

章金凤

（内蒙古乌兰察布市第二医院，内蒙古 集宁 012000）

麻黄-4汤由麻黄、山奈、川椒、甘草4味药组成[1]。具祛风散寒，燥“协日乌素”等功效。用于风寒腰腿痛、风湿病等病症。为了保证药品的安全有效，参照文献方法[2]，对处方中麻黄进行了含量测定研究。

1 仪器与试药

1.1 仪器：岛津LC-20A SPD-M20A型检测器，LCsolution色谱工作站。岛津LC-2550型紫外分光光度计。

1.2 试剂与试药：盐酸麻黄碱对照品(CE),中国药品生物制品检定所提供；甲醇为色谱纯，水为高纯水，其它试剂均为分析纯。

2 实验方法与结果

2.1 色谱条件：色谱柱：Diamonsil C18柱（250×4.6mm 5μm）；流动相：乙腈-0.1%磷酸（5：95）；柱温：30℃；检测波长：207nm；理论板数：麻黄碱峰计不得低于6000。

2.2 对照品溶液的制备：精密称取CE2 mg，置50mL量瓶中，加50%甲醇使溶解，再加磷酸5滴，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。（每1mL中含CE40μg）

2.3 供试品溶液的制备：精密量取本品2g，置中性氧化铝柱（100～200目，8g，内径1cm）上，用50%甲醇洗脱，收集洗脱液约45mL，置50mL量瓶中，加磷酸5滴，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得 。

2.4 阴性对照试验:取按处方比例并以相同工艺制备的缺麻黄的阴性对照，按2.3供试品溶液制备法制得阴性对照溶液。在上述色谱条件下，分别精密吸取阴性对照溶液、2.3对照品溶液、2.3供试品溶液各10μL，分别注入液相色谱仪，测得结果为：阴性对照色谱图中在与麻黄对照品以及供试品色谱相对应的保留时间处无色谱峰出现，说明处方中其它药材对麻黄的测定不产生干扰。

2.5 线性关系考察：精密称取CE5.004mg，置50mL量瓶中，加50%甲醇使溶解，滴加磷酸5滴并用50%甲醇稀释至刻度，摇匀（0.100 mg·mL-1），精密吸取 1、2、4、6、8 、10（mL）分别置 10mL 量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，各取10μL进样，按上述色谱条件测定,以峰面积对进样量进行回归分析，结果：CE在0.10008μg～1.0008μg范围内呈的线性关系。回归方程：Y=1546361X+17818，r=0.9997

2.6 稳定性试验：精密吸取同一份供试品溶液10μL，分别于0、2、4、8、24(h)进样测定，结果CE面积积分值在24h内的基本稳定不变。

2.7 重复性试验：取同一批号（批号20060401）供试品6份，各精密量取2g，分别按2.3方法制备供试品溶液,并按确定的色谱条件操作，测得每份供试品含量，求得平均含量1.010mg·mL-1(25.25mg·g-1)，RSD 为 1.58%，表明重现性良好。

2.8 加样回收试验：取供试品(批号20060401，含量1.010mg·mL-19份，精密量取1mL，其中三份各精密加入CE对照品50%甲醇溶液（浓度为0.4779 mg·mL-1）1mL、其次三份各精密加入CE 50%甲醇溶液（浓度为0.4779 mg·mL-1）2mL、最后三份各精密加入CE50%甲醇溶液（浓度为1.4763 mg·mL-1）1mL，分别按含量测定项下方法操作，测定每份含量，计算回收率，结果见表1。

2.9 样品含量测定：取 5 批(批号：051101、051002、051203、060401、060402)供试品,按2.3方法制备供试品溶液,并按确定的色谱条件测定含量，5批样品的测定结果：21.75、20.25、26.25、25.25、28.25（mg·g-1）,平均含量为24.35（mg·g-1）。

3 讨 论

本文对处方中麻黄所含有效成分CE进行含量测定研究，经方法学考察和5批样品的测定结果表明，阴性对照试验无干扰，具较强的专属性。供试品中，CE与其它成分均达到较好的分离作为麻黄-4汤散剂的含量控制标准。

表1 CE加样回收试验结果

根据样品中CE的性质，参照文献[2]方法，直接将样品置中性氧化铝柱上，用50%甲醇45mL洗脱，加少量磷酸，用50%甲醇定容，制备供试品溶液。为保证被测成分洗脱完全，考察了同一批号供试品，用50%甲醇洗脱，收集洗脱液45ml后，再继续收集洗脱液10mL进行测定，结果在与对照品相同的保留时间处基本无吸收，表明45mL洗脱液可以将麻黄碱洗脱干净。

[1]辽宁省阜新卫生局.蒙医药方剂汇编[M].辽宁人民出版社,1976.

[2]国家药典委员会.中国药典一部·2005版[S].化学工业出版社,224.峰型较好，并具较适合的保留时间。该方法准确、灵敏、简便，可