藏药材冬葵果的质量标准研究

翟随民 谢平 白央 次德吉

西藏自治区食品药品检验所，西藏 拉萨 850000

藏药材冬葵果的质量标准研究

翟随民 谢平 白央 次德吉

西藏自治区食品药品检验所，西藏 拉萨 850000

目的:对具有清热利尿、消肿效果的藏药材冬葵果(藏语名称:玛宁江巴)进行质量标准研究。方法:采用基源考证、药材显微鉴别和薄层色谱鉴别方法。结果:冬葵果呈扁球状盘形，宿萼钟状，黄绿色或黄棕色，有的微带紫色，种子肾形，棕黄色或黑褐色，气微，昧涩。宿萼表面观下表皮星状，壁稍厚;腺毛头部椭圆形。上表皮单细胞非腺毛细长，弯曲或平直，壁薄或稍厚。上下表皮气孔均为不等式。叶肉薄壁细胞含草酸钙簇晶，棱角较尖。外果皮横切面为一层长方形表皮细胞，壁稍厚，外被角质层。中果皮由类圆形薄壁细胞和一层含草酸钙棱晶的细胞组成，薄壁组织中有大型黏液细胞散在，含晶细胞类圆形，壁厚且木化。中果皮与内果皮间呈环状排列。粉末为灰褐色。外果皮为长方形，外被角质层，中果皮、内果皮为类圆形。花粉粒淡黄色，单个或数个聚合在一起。单个花粉粒顶面观呈网球形，侧面观呈盔形、椭圆形，外壁具刺状突起，萌发孔及孔沟均不明显。建立冬葵果薄层色谱鉴别方法。结论:所确定的鉴别方法可作为冬葵果的鉴别依据。

冬葵果;显微鉴别;薄层鉴别

冬葵果(藏语名称:玛宁江巴)为锦葵科植物中华锦葵Malva veticillata L．var．chinensis(Miller)S．Y．HU或圆叶锦葵Malva rotundifolia L．的干燥成熟果实。夏、秋二季果实成熟时采收，除去杂质，阴干。冬葵果主要化学成分为:苹果酸等［1－4］。该药材是藏药制剂中常用药材，具有清热利尿、消肿的效果。圆叶锦葵药材生于海拔3200～4000米的公路边、山坡草地、村寨旁常见;西藏区内主要产于札达县、江孜县、仁布县、拉萨市、南木林县等地，同时亦分布于我国南北各地;亚洲至欧洲亦有分布。中华锦葵西藏区内主要产于普兰县、申扎县、札达县、莎迦县、林周县、南木林县、聂拉木县、拉萨市、波密县、林芝县、米林县等地。始载于《四部医典》中［3］。《字妥本草》云:“本品生于田地中，叶葱郁，叶柄多数，整株约有一肘长，果实呈轮状。”《晶珠本草》云:“江巴分为三种:破江、莫江、玛宁江巴。本品即为后者，生于地势较低的地方，叶形与其他江巴相似;花粉色，向阳旋转;果实亦与其他江巴相似，呈环形密排。”《甘露本草明镜》云:“为一年生的药用植物，根如圆竹，浅黄色，细而长被有胡须状的稀疏白毛;茎呈浅绿色，细而直立，常有4根左右无分枝的枝条共生于主干上，长短因产地不同而各异;叶深绿色，叶片厚，圆形，叶背被有稀疏的白毛，叶缘处具五个浅裂，叶柄长，单独互生;花粉红色，花体小，具五瓣，于叶柄基部生出;果实浅绿色，呈环形密排，边缘有薄膜包裹。”藏医多以破江和玛宁江巴入药，而很少以莫江人药。据查，玛宁江巴为锦葵科植物冬葵。目前，未见该药材鉴别的相关报道，因此，建立该药材的鉴别，通过研究为药材的开发利用和临床应用提供相关科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

冬葵果药材来源于西藏自治区藏药厂、西藏自治区雄巴拉曲藏药厂、西藏自治区藏医学院藏药厂、西藏自治区藏医学院藏药研究所。以上四个单位提供的冬葵果药材，经本所格桑索朗副主任药师鉴定，均为冬葵果正品。

1.2 仪器与主要试剂

1.2.1 仪器系统显微镜(型号:BX51日本奥林巴斯);电子天平(型号:AE200瑞士梅特勒);电热恒温干燥箱(型号:GZX–DH.500–BS–Ⅱ上海跃进医疗器械厂);三用紫外分析仪(型号:ZF－2上海市安亭电子仪器厂);数控超声波清洗器(型号:KQ－500D昆山市超声波仪器厂)。

1.2.2 主要试剂乙醇(AR)、环己烷(AR)、乙酸乙酯(AR)、丙酮(AR)、羧甲基纤维素钠(CR)、硅胶G(CR)、苯(AR)、石油醚(30－60℃)(AR)、石油醚(60－90℃)(AR)、冰乙酸(AR)、硫酸(AR)、香草醛等。试验用水均为纯化水，符合《分析实验室用水规格和试验方法》(GB/T6682－2008)及《中国药典》2010年版二部纯化水的要求。

2 性状

冬葵果呈扁球状盘形，直径4～7mm。外被膜质宿萼，宿萼钟状，黄绿色或黄棕色，有的微带紫色，先端5齿裂，裂片内卷，其外有条状披针形的小苞片3片。果梗细短。果实由分果瓣10～12枚组成，在圆锥形中轴周围排成1轮，分果类扁圆形，直径1．4～2.5mm。表面黄白色或黄棕色，具隆起的环向细脉纹。种子肾形、棕黄色或黑褐色。气微、昧涩。

3 显微特征鉴别

3.1 冬葵果宿萼表面观下表皮星状毛由2～8个(多由4～8个)细胞组成，单个细胞长50～1140μm，直径约75μm，壁稍厚;腺毛头部椭圆形，5～7个细胞，直径25～38μm。上表皮单细胞非腺毛细长，弯曲或平直，长约至1190μm，壁薄或稍厚。上下表皮气孔均为不等式。叶肉薄壁细胞含草酸钙簇晶，直径6～25μm，棱角较尖。

3.2 冬葵果果皮横切面外果皮为一层长方形表皮细胞，壁稍厚，外被角质层。中果皮由2～3层类圆形薄壁细胞和一层含草酸钙棱晶的细胞组成。薄壁组织中有大型黏液细胞散在。含晶细胞类圆形，壁厚且木化。中果皮与内果皮间有10余束纤维束，呈环状排列。内果皮为一列径向延长的石细胞，呈栅栏状，侧壁及内壁甚厚，木化。见图1，2。

图1 冬葵果种子横切面显微照片

图2 冬葵果种子横切面显微照片

3.3 冬葵果粉末为灰褐色。外果皮为长方形，外被角质层，中果皮、内果皮为类圆形。腺毛，星状毛由2～6个(多由4～6个)细胞组成，单个细胞长50～1140μm，直径约75μm，壁稍厚;无柄腺毛头部椭圆形有5～7个细胞，花粉粒淡黄色，单个或数个聚合在一起。单个花粉粒顶面观呈网球形，侧面观呈盔形、椭圆形，直径约为60～110μm，外壁具刺状突起，萌发孔及孔沟均不明显，含草酸钙方晶。见图3。

图3 冬葵果粉末显微照片

4 薄层色谱鉴别

取冬葵果细粉1.0g，加石油醚(60－90℃)10ml，超声处理30分钟，过滤，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液;另取冬葵果对照药材，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI B试验)，吸取上述两种溶液各10μl，点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以苯－乙酸乙酯(8.5:1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以30%硫酸乙醇溶液，置105℃加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

5 小结

通过实验表明，冬葵果宿萼表面观下表皮星状毛壁稍厚，腺毛头部椭圆形，;上表皮单细胞非腺毛细长，弯曲或平直，壁薄或稍厚。上下表皮气孔均为不等式。叶肉薄壁细胞含草酸钙簇晶。外果皮横切面为一层长方形表皮细胞，壁稍厚，外被角质层。中果皮由类圆形薄壁细胞和一层含草酸钙棱晶的细胞组成，薄壁组织中有大型黏液细胞散在，含晶细胞类圆形，壁厚且木化。中果皮与内果皮间呈环状排列。内果皮为径向延长的石细胞，呈栅栏状，侧壁及内壁甚厚，木化。粉末为灰褐色，外果皮为长方形，外被角质层，中果皮、内果皮为类圆形。花粉粒淡黄色，单个或数个聚合在一起。单个花粉粒顶面观呈网球形，侧面观呈盔形、椭圆形，外壁具刺状突起，萌发孔及孔沟均不明显，含草酸钙方晶。薄层色谱斑点分离清晰，无拖尾现象，专属性强、重现性好。见图4。

图4 冬葵果薄层色谱检视图

6 讨论

薄层色谱点样量的选择在试验过程中，分别选取1μl、2μl、5μl、10μl及20μl进行点样量选筛，试验表明，冬葵果药材薄层点样量为10μl时，能明显检出有效斑点。

薄层色谱展开剂的选择试验过程中，分别以石油醚(30－60℃)－乙酸乙酯(8∶1)、石油醚(30－60℃)－乙酸乙酯(9:1)、乙醚、苯－乙酸乙酯(8.5∶1.5)等为展开剂，其中，以苯－乙酸乙酯(8.5∶1.5)为展开剂，展开得到的薄层色谱图分离度较好，其主斑点Rf值分别为:0.57、0.61、0.90。

薄层色谱显色剂的选择试验过程中，以30%硫酸乙醇溶液为显色剂，置105℃加热至斑点清晰，灵敏度较好。

本项研究建立的鉴别方法简便、重现性好，可用于冬葵果药材的质量控制，能够为该药材的进一步的开发利用和临床应用提供相关科学依据。

［1］ 国家药典委员会编．中华人民共和国药典(一部)［M］．北京:中国医药科技出版社，2010．

［2］ 王曙．常用藏药理化鉴别与含量测定［M］．四川科学技术出版社，2002．

［3］ 国家中医药管理局《中华本草》编委会．中华本草藏药卷［M］．上海科学技术出版社，2002．

［4］ 青海省药品检验所、青海省藏医药研究所．中国藏药(第一卷)［M］．上海科学技术出版社，1996．

［5］ 王宝琴．中成药质量标准与标准物质研究［M］．中国医药科技出版社，1994．

［6］ 宇妥·元丹贡布．四部医典［M］．陕西师范大学出版社．

［7］ 帝玛尔·丹增彭措．晶珠本草［M］．西藏药王山藏文木刻版．

R284.1

A

1007－8517(2012)15－0015－02

2012.05.26)