丁香挥发油β－环糊精包合物制备工艺

高咏，王志剑

1．辽宁省沈阳市食品药品检验所，辽宁沈阳110013;2．辽宁省沈阳市和平区西塔社区卫生服务中心，辽宁沈阳110002

丁香挥发油β－环糊精包合物制备工艺

高咏1，王志剑2

1．辽宁省沈阳市食品药品检验所，辽宁沈阳110013;2．辽宁省沈阳市和平区西塔社区卫生服务中心，辽宁沈阳110002

目的:优选丁香挥发油β－环糊精包合物的最佳制备工艺。方法:采用正交设计方法，考察丁香挥发油(g)与β－环糊精(g)的比例、包合温度及时间对丁香酚包合率及包合物收得率的影响，采用气相色谱法测定丁香酚的含量。结果:确定最佳工艺为丁香挥发油(g)与β－环糊精(g)的比例是1∶8，温度40℃，时间2.5h。结论:此法准确、可靠，为丁香制备工艺和质量评价提供了一定的科学依据。

丁香挥发油;丁香酚;正交试验

丁香为桃金娘科植物丁香(Eugenia caryophyllata Thunb．)的干燥花蕾。味辛、性温，归脾、胃、肺、肾经。具有温中降逆，补肾助阳的功效，用于治疗脾胃虚寒，呃逆呕吐，食少吐泻，肾虚阳痿［1］。研究表明，丁香的主要化学成分为挥发油，其挥发油中主要含丁香酚(80%～87%)，β－丁香烯(9.12%)，乙酰丁香酚(7.33%)。丁香酚有较强的药理活性，具有抑菌、麻醉、解热、抗氧化、抗肿瘤、促进透皮吸收、祛蚊等多种药理活性［2，3］。但丁香酚的稳定性较差，易在制剂生产和贮藏过程中散失，影响药效。为提高其稳定性，减少散失，可以采用β－环糊精进行包合。本实验采用正交试验设计方法考察了不同因素对丁香酚包合率及包合物收得率的影响，优选出丁香挥发油β－环糊精包合物的制备工艺。

1 仪器与材料

GC－2014C型气相色谱仪(日本岛津公司)，磁力搅拌器(上海雷磁新泾仪器有限公司)、DRP－9082型电热恒温培养箱(上海森信实验仪器有限公司)、ER－182A全自动电子天平(十万分之一，日本A＆D公司)、丁香酚(中国药品生物制品检定所)，丁香挥发油(自制)，其它试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 正交试验采用L9(3)4正交设计法进行试验获得最佳的包合工艺。分别对丁香挥发油(g)与β－环糊精(g)的比例、包合温度及包合时间3个因素进行考察，每个影响因素选取3个水平，因素水平表见表1;按L9(3)4正交表进行实验，见表2。

表1 因素水平表

按上述比例取β－环糊精，加水制成浓度为4%β－环糊精溶液，置于磁力搅拌器上(300r/min)，缓慢滴加挥发油(2倍无水乙醇稀释)，在不同温度下搅拌至规定时间，4℃冷藏24h，减压过滤，分别用蒸馏水和无水乙醇洗涤滤层，分别洗涤3次，每次10mL，将滤层和滤纸一同取出，60℃干燥至恒重，即得白色粉末状β－环糊精包合物。

2.2 样品测定方法按因素水平表安排的正交试验称取干燥包合物0.1g，精密称定，精密加入正己烷20ml，称定重量，超声处理15min，放置至室温，再称定重量，用正己烷补足减少的重量，摇匀，虑过，取续滤液作为供试品溶液，采用上述条件注入气相色谱仪进行分析。

2.3 丁香酚测定方法采用气相色谱法。色谱条件:色谱柱(2m×2mm)，以聚乙二醇20000(PEG－20M)为固定相，涂布浓度为10%;检测器:F1D;柱温:190℃;检测器温度:230℃;进样口温度:230℃;N2流速40ml/min，H2流速40.0ml/min，Air流速:400ml/min;进样量:1μL。

2.4 计算方法由于丁香酚包合率、包合物收率对实验结果都有显著的影响，故采用加权综合评分法进行比较。对各指标的数据进行归一化，其中丁香酚包合率、包合物产率的权重系数根据重要性程度分别确定为0.7和0.3。按下面两个公式计算，考察结果见表2，方差分析结果见表3。

表2 L9(34)正交试验表

表3 方差分析表

从表2、表3结果分析可以看出，三因素的影响大小依次为A＞B＞C，A因素影响具有显著性。综合分析各个因素，确定最佳工艺为丁香挥发油(g)与β－环糊精(g)的比例是1∶8，温度40℃，时间2.5h。

2.5 验证性实验取丁香挥发油，按最佳工艺A2B3C2方法进行验证性实验，丁香酚包合率为88.5%，包合物收率为88.6%。结果表明，优选出的工艺方法重现性较好，工艺条件稳定。

3 讨论

方差分析显示，丁香挥发油与β－环糊精比例对包合工艺影响较大，具有显著性差异，而包合温度、包合时间对包合工艺影响较小。在最佳工艺条件下，丁香挥发油被β－环糊精包合后形成白色粉末状包合物，与外界环境隔离，有效防止了丁香挥发油的挥发或氧化变性，增加了其稳定性，同时可以改善药物的溶解性，提高生物利用度，液体药物固体粉末化，便于制剂制备。

目前在中药挥发油或脂肪油包合物制备工艺研究中，对包合率的考察大多以包合物中提取的总油量为考察指标［4，5］，缺乏对油中有效成分包合率的考察。本实验采用气相色谱法测定丁香挥发油β－环糊精包合物中丁香酚的含量，并以丁香酚的包合率为主要考察指标确定最佳包合工艺，方法科学、快速，测定结果准确可靠。

［1］中华人民共和国药典(一部)［S］．北京:化学工业出版社，2010:4－4．

［2］常新全，丁丽霞．中药活性成分分析手册(上)［M］．北京:北京学苑出版社，2002．

［3］彭宅彪，张琼光，代虹健，等．丁香酚的药理学研究进展［J］．时珍国医国药，2006，17(10)．

［4］葛亮，王昕宇，姚蓝．丁香挥发油β－环糊精包合工艺研究［J］．西北药学杂志，2010，25(3):210－211．

［5］邱娇英，周文兰．丁香挥发油的提取与β－环糊精包合工艺研究［J］．中医药导报，2008，14(12):67－69．

R284.2

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1007－8517(2012)11－0023－02

2012.04.11)