薄层扫描法测定咽速康气雾剂中胆酸的含量

黄荣增，苏 超，张丽君 (湖北中医药大学药学院，湖北 武汉 430065)

孟军华 (武汉市第三医院药剂科，湖北 武汉 430060)

苏明武 (湖北中医药大学药学院，湖北 武汉 430065)

薄层扫描法测定咽速康气雾剂中胆酸的含量

黄荣增，苏 超，张丽君 (湖北中医药大学药学院，湖北 武汉 430065)

孟军华 (武汉市第三医院药剂科，湖北 武汉 430060)

苏明武 (湖北中医药大学药学院，湖北 武汉 430065)

目的：建立咽速康气雾剂中胆酸的含量测定方法。方法：采用双波长反射法锯齿形薄层扫描法(λs=385nm)测定胆酸的含量。结果：胆酸在1.16～5.80μg范围内线性关系良好(r=0.9993)，胆酸的平均加样回收率为98.67%(RSD=1.5%)。结论：该方法准确可靠，重现性好，为咽速康气雾剂的质量控制和评价提供了依据。

咽速康气雾剂；薄层扫描；胆酸；质量标准

六神丸是我国传统的咽喉良药，由于中药传统丸剂具有服用量较大、生产流程长、易受微生物污染、质量难以控制等诸多缺点，因此我们在六神丸的基础上将其改进成定位、速效、更安全的新型气雾剂。我们参照文献[1-4]，采用双波长反射法锯齿形薄层扫描法测定制剂中胆酸的含量，为控制该制剂质量提供可靠的实验依据。

1 仪器与试药

CS-9000双波长飞点扫描仪(日本岛津);硅胶G(青岛海洋化工厂)；胆酸(供含量测定用，中国药品生物检定所，批号10078-0013)；咽速康气雾剂(自制制剂)；其它试剂均为分析纯。

2 实验方法与结果

2.1薄层与扫描条件

硅胶G板(规格200mm×200mm，厚度为0.3mm)，展开剂为氯仿-乙酸乙酯-甲醇-冰乙酸(11∶5∶2∶2)，显色剂为30%硫酸乙醇溶液。于105℃烘至斑点清晰，干燥冷却，上盖玻璃板密封。扫描波长λs=385nm，λR=700nm，反射法锯齿扫描，SX=3。

2.2对照品、供试品、阴性对照溶液的制备

2.2.1对照品溶液的制备 取经五氧化二磷减压干燥至恒重的胆酸对照品约1mg，精密称定，置2ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得(每1ml中含胆酸0.58mg)。

2.2.2供试品溶液的制备 取本品，除去帽盖，冷却至5℃，在铝盖上钻一小孔，插入连有干燥橡皮管的注射针头(勿与药液面接触)，橡皮管另一端放入水中，待抛射剂缓缓排出后，除去铝盖，精密量取药液10ml，置圆底烧瓶内，挥干乙醇，加20%氢氧化钠溶液40ml，加热回流2h，放冷，加盐酸20ml，摇匀，放冷，转移至分液漏斗中，加乙酸乙酯振摇提取4次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇10ml使溶解，作为供试品溶液。

2.2.3阴性对照溶液的制备 按处方比例和工艺，制成不含人工牛黄的阴性样品溶液，按供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。

2.3线性关系考察

吸取胆酸对照品溶液2、4、6、8、10、12μl点样，展开，显色，测定各斑点峰面积，以各点样量斑点峰面积积分值对点样量进行线性回归，得回归方程y=0.0001x-0.0291，r=0.9993，表明胆酸在1.16～5.80μg范围内线性关系良好。鉴于标准曲线不过原点，采用随行标准外标两点法进行含量测定。

2.4精密度试验

吸取胆酸对照品溶液5μl，在同一块硅胶G薄层板上，点5个斑点，按上述薄层色谱和扫描条件，测定胆酸峰面积积分值，结果RSD为2.7%。

2.5重复性试验

取本品(批号100401)，除去帽盖，冷却至5℃，在铝盖上钻一小孔，插入连有干燥橡皮管的注射针头(勿与药液面接触)，橡皮管另一端放入水中，待抛射剂缓缓排出后，除去铝盖，精密量取药液10ml，5份，照上述供试品制备方法制备供试品溶液，精密吸取供试品溶液3μl、对照品溶液3、6μl点在同一块硅胶G薄层板上，按上述薄层色谱和扫描条件测定，计算样品中胆酸含量平均值为 0.7289mg/ml。试验结果表明，测定结果的重复性良好，RSD为2.8%。

2.6稳定性试验

取供试品溶液3μl点于薄层板上，按上述薄层色谱和扫描条件，间隔30min测定一次，共4次，结果表明，120min内色谱斑点峰面积积分值基本不变，RSD为1.5%。

2.7加样回收率试验

取本品(批号100401)，除去帽盖，冷却至5℃，在铝盖上钻一小孔，插入连有干燥橡皮管的注射针头(勿与药液面接触)，橡皮管另一端放入水中，待抛射剂缓缓排出后，除去铝盖，精密量取药液(含量为0.7289mg/ml)5ml，5份，置圆底烧瓶内，分别精密加入一定量的胆酸对照品，照供试品溶液制备方法制备, 按上述薄层色谱和扫描条件测定。结果(见表1)表明本法回收率为98.67%，RSD为1.5%。

表1 加样回收试验结果

2.8含量测定

表2 5批咽速康气雾剂胆酸含量测定结果

取本品(批号为100401、100402、100403、100501、100502)，照上述供试品溶液制备方法分别制备供试品溶液，按上述薄层色谱和扫描条件测定，测得峰面积积分值，计算含量，结果见表2。

3 讨 论

胆酸是方中人工牛黄所含的主要有效成分，我们以胆酸为指标，进行了薄层扫描测定方法的研究。参考有关文献，对多种薄层色谱和扫描条件进行了考察，经试验研究选择氯仿-乙酸乙酯-甲醇-冰乙酸(11∶5∶2∶2)作为展开剂，30%硫酸乙醇溶液作为显色剂。于105℃烘至斑点清晰，干燥冷却，上盖玻璃板密封。扫描波长λs=385nm，λR=700nm，反射法锯齿扫描，SX=3。该方法简便、准确、选择性好、阴性无干扰，可作为该制剂的含量测定方法。

胆酸对照品易吸水,使用前应减压干燥至恒重；胆酸多以其盐存在于人工牛黄及其制剂中,故在供试品溶液制备时,加入20%氢氧化钠溶液加热回流,目的是促使其水解完全,加盐酸酸化使萃取完全。

[1]卫生部.中国药典(一部)[S].2005.

[2] 傅军，周漩，高晓霞，等.薄层扫描法测定珍黄液中胆酸的含量[J]. 中国实验方剂学杂志， 2006，12(3)：25-26.

[3]杨洪武，王峥，辛敏通，等.薄层扫描法测定人工牛黄及其制剂中胆酸的含量[J]. 中成药，2003，25(4)：290-293.

[4]叶蓓蓓，潘莉，王栋，等.薄层扫描法同时测定人工牛黄中胆酸及猪去氧胆酸的含量[J]. 药物分析杂志，2010，30(4)：706-709.

[编辑] 一 凡

10.3969/j.issn.1673-1409(R).2012.01.032

R917

A

1673-1409(2012)01-R057-02

2011 12 08

黄荣增(1972)，男，湖北黄梅人，讲师，博士，主要从事中药复方物质基础及作用机理研究；通讯作者：苏明武，EmAil：sumingwu@126.Com。