杨梅中硒含量测定的消化方法

蒋步云，柴振林，吕爱华，尚素微，朱杰丽

(浙江省林产品质量检测站，浙江 杭州 310023)

杨 梅 (Myrica rubra Sieb) 是 杨 梅 科(Myricaceae)杨梅属 (Myrica L.)中的一个种，是我国南方特产果树之一［1］，深受广大消费者的喜爱。杨梅营养价值丰富，且有药用价值，含有碳水化合物、有机酸、蛋白质及多种维生素等成分，具有生津止渴、和胃消食、益肾利尿和解暑止泻之功效，同时也具有抗氧化和抗衰老的作用［2-3］。硒是人体必不可少的微量元素之一，具有抗氧化、保护心血管、解毒、防癌和提高免疫力等作用［4-5］。随着科技的进步，人们生活水平的提高，富硒杨梅开始日益走俏。但何谓富硒，杨梅中硒含量究竟有多少等等都是重点关注的问题，因此，准确、快速地测定杨梅中硒的含量显得尤为重要。

目前，测定硒的方法主要有原子光谱法、吸光光度法、荧光光度法、电化学法及色谱法等，各种联用技术也已经用于硒的测定及形态分析［6］。本实验使用的是氢化物原子荧光光谱法。原子荧光法测定的范围宽，具有方法简单、灵敏度高、准确性好的特点［7］。应用氢化物原子荧光光谱法测定必须对样品进行消解，为提高测定结果的正确性和效率，进行了微波消解法和湿法消解 (电热板加热消解)法对测定结果影响的实验。现将有关结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 仪器

AFS-930 型双道原子荧光光度计 (北京吉天仪器有限公司)，Multiwave3000 微波消解仪 (奥地利安东帕公司)，可控式电炉，硒空心阴极灯等。

1.1.2 试剂

硝酸，高氯酸，盐酸 (优级纯)，过氧化氢(分析纯)，硼氢化钾溶液10 g·L-1，硒标准储备液100 mg·L-1，硒标准使用液0.1 mg·L-1，载流5%盐酸溶液，10 g·L-1铁氰化钾溶液 (掩蔽剂:可明显消除Pb、Cu 的干扰［8］)，标准茶叶对照样 (国家标准物质，样品编号GSB-7)。

1.2 方法

1.2.1 原理

样品经酸加热消化后，在6 mol·L-1盐酸介质中，将试样中的六价硒还原成四价硒，用硼氢化钾作还原剂，将四价硒在盐酸介质中还原成硒化氢，由载气(氩气)带入原子化器中进行原子化，在硒空心阴极灯照射下，基态硒原子被激发至高能态，在去活化回到基态时，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与硒含量成正比。与标准系列比较定值［9］。

1.2.2 样品制备

取杨梅可食用部分打成匀浆后备用，余样放冷柜冰冻储藏。

1.2.3 样品前处理

湿法消解 (电热板加热消解)。参考 GB 5009.93—2010 食品中硒的测定中第1 法 (氢化物原子荧光光谱法)，准确称取处理好的待测试样1～2.000 g 于消化瓶中，加入混合酸 (硝酸∶高氯酸4∶2)10 mL，盖上表面皿冷消化过夜，于次日电炉上加热。当溶液变为澄清透明并伴有白烟时，再继续加热至剩余体积2 mL 左右，不可蒸干。冷却，再加5 mL 6 mol·L-1盐酸，继续加热至溶液变为澄清透明并伴有白烟出现，将六价硒还原成四价硒。冷却，用去离子水定容到25 mL 容量瓶中，待测，同时做试剂空白。

微波消解法。准确称取处理好的待测试样0.5～2.000 g 于微波消解罐内，加混合酸为4 mL硝酸+3 mL 过氧化氢，放置过夜，次日置于微波消解仪器内按设定程序进行消解。当室内温度低于10℃时，应先放于赶酸架上40℃预热10 min 左右，以便微波消解仪能正常启动。程序运行结束后取出反应罐冷却一段时间，放置于赶酸架上120℃赶酸至剩余2 mL 左右时取下，冷却后加入5 mL 6 mol·L-1盐酸溶液，继续放回赶酸架上消化至剩余溶液澄清透明，将六价硒还原成四价硒。取下冷却至室温，0.5%硝酸溶液定容到25 mL 容量瓶中，待测，同时做试剂空白。32 位微波消解仪设置条件经多次试验摸索得到最佳化条件。

1.2.4 测定方法

原子荧光光度计仪器工作条件设置。光电倍增管负高压270 V，屏蔽气流量800 mL·min-1，原子化器温度200℃，读数时间7 s，原子化器高度8 mm，延迟时间1.5 s，灯电流80 mA，测量方式Std.Curve，载气流量400 mL·min-1，读数方式Peak.Area。

标准曲线绘制。取硒标准使用液0.1 mg·L-12.5 mL 到25 mL 容量瓶中，用5%盐酸溶液稀释，加入1 mL 铁氰化钾溶液为掩蔽剂，定容到刻度线，摇匀作为硒的标准工作溶液。仪器设置为自动进样，标准系列分别为1.000，2.000，4.000，6.000 和10.000 μg ·L-1。得出标准系列浓度(x)与荧光强度 (y)的关系式:y=15.225 1x-0.871 1，R2=0.999 8。

样品测定。向2种消化方法 (微波消解法和湿法消解法)消化好后定容到25 mL 容量瓶中的样品溶液内加入1 mL 10 g·L-1铁氰化钾溶液作为掩蔽剂，摇匀，同标准曲线一样上机测定含量。载流为5%盐酸溶液，还原剂为10 g·L-1硼氢化钾溶液。

2 结果与分析

2.1 测定值

标准茶叶对照样GSB-7 经过原子荧光光谱法测定后，2种消化方法对结果的影响见表1。

表1 微波消解法和湿法消解法测定标准茶叶对照样的结果

从表1 可知，微波消解法的测定平均值高于湿法消解法 (电热板加热法)的测定平均值，两者都在标准值范围内。微波消解法的相对标准偏差较低，说明微波消解标样更完全更彻底，硒含量损失较少且平行性良好。

从2种消化方法处理后得到的待测杨梅样品测定结果 (表2)来看，同样可得出微波消解法优于湿法消解法。

表2 微波消解法和湿法消解法测定杨梅样品的结果

2.2 加标回收率

对微波消解法作为消化方法的标准茶叶对照样进行加标回收试验，3个加标浓度得到的回收率为90%～110% (表3)，符合加标回收的要求，说明微波消解法消解杨梅样品是可行有效的。

表3 微波消解法的加标回收率

通过加标回收试验评估样品预处理产生的不确定度。18个加标样品的平均回收率99.33%，标准偏差S 为2.91%，标准不确定度设为U (R)，有U (R)=0.008 774，则其相对标准不确定度为U (R)/R=0.008 833。

2.3 精密度

对微波消解法消化标准茶叶对照样进行11 次精密度试验，相对标准偏差为5.11%，说明其符合要求。

3 小结

在杨梅中硒含量测定的过程中，通过2种消化方法的比较，可以看出微波消解相对于湿法消解，具有消耗样品和试剂少、消解彻底、快速简便、准确度高、精密度好等优点，是一种较理想的前处理方法，且污染少更利于操作者的安全［10-11］。因此，杨梅中硒含量测定的消化方法可采用微波消解法。

［1］谢小波，求盈盈，邱立军，等.碱性土壤对杨梅生长结果的影响［J］.浙江农业学报，2008，20 (4):261-265.

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［3］张泽煌，卢新坤，林旗华，等.10个杨梅品种果实糖和氨基酸含量分析［J］.浙江农业学报，2011，23 (7):18-20.

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