丙型肝炎核心抗原检测的临床意义

鲜玉萍，杨红英（成都市第六人民医院检验科 610051）

丙型肝炎核心抗原检测的临床意义

鲜玉萍，杨红英（成都市第六人民医院检验科 610051）

目的应用酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测丙型肝炎病毒核心抗原（HCV－cAg）和抗体（HCVAb），了解丙型肝炎病毒核心抗原检测的意义。方法 采用HCV－cAg试剂盒及HCV－Ab试剂盒，对200例来自手术前筛查的血清样本和36例丙型肝炎或疑似丙型肝炎患者的血清样本进行HCV－cAg和HCV－Ab检测，阳性者用反转录聚合酶链反应（RT－PCR）检测HCV－RNA证实。结果200例术前筛查样本 HCV－Ab均为阴性，HCV－cAg阳性3例，其中HCV－RNA阳性1例；36例丙型肝炎或疑似丙型肝炎患者HCV－Ab全部阳性，其中检出HCV－cAg阳性21例，HCV－RNA阳性24例。HCV－cAg与 HCV－RNA符合率为87.5%（21/24）。结论 HCV－cAg检出时间早于HCV－Ab，对临床样本同时进行丙型肝炎病毒核心抗原和抗体的ELISA检测，能够明显提高丙型肝炎诊断符合率。

丙型肝炎病毒抗体； 丙型肝炎病毒核心抗原； 反转录聚合酶链反应

我国的丙型肝炎病毒（HCV）感染率大约为3.2%，而多数HCV感染都是无症状性的，少数引起急性肝炎的患者，其症状也比甲型和乙型急性肝炎的症状轻。但感染HCV后形成慢性感染的概率很高，且有相当比例患者会发展成肝硬化、肝癌。为此，较早检出HCV感染，及时有效地阻断HCV传播非常重要。丙型肝炎标志物包括丙型肝炎病毒核心抗原（HCV－cAg）和抗体（HCV－Ab）及HCV－RNA。本文应用酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测 HCV－cAg和 HCV－Ab，并对 HCV－cAg阳性的标本进行 HCV－RNA证实，以了解 HCV－cAg检测的意义，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 住院患者标本来自2012年2月本院入院手术前进行病毒筛查的血液标本，随机抽取200例，采用双盲法同时检测HCV－Ab和HCV－cAg。2011年4月至2012年4月本科HCV－Ab检测阳性的血液标本36例，分离血清并置－20℃冰箱保存。

1.2 方法与试剂

1.2.1 HCV－Ab检测采用郑州安图生物公司生产的 HCVAb ELISA试剂盒。按说明书上的方法操作，阳性结果经二次复检。

1.2.2 HCV－cAg检测采用山东莱博公司商业化的 HCV－cAg ELISA试剂盒，按说明书上的方法操作，阳性结果经二次复检。

1.2.3 HCV－RNA检测采用中山大学达安基因股份有限公司生产的丙型肝炎病毒RNA聚合酶链反应（PCR）检测试剂盒，按说明书上的方法操作。

2 结 果

2.1 HCV－Ab、HCV－cAg、RT－RNA检测结果见表1。

2.2200例住院术前筛查患者标本HCV－Ab检测均为阴性，HCV－cAg阳性3例，占1.5%，其中 HCV－RNA阳性1例。

表1 HCV－Ab、HCV－cAg、RT－RNA检测结果（n）

2.336例HCV－Ab阳性的样本检出HCV－cAg阳性21例，HCV－cAg与 HCV－Ab阳性符合率为58.3%（21/36）；HCV－RNA与 HCV－Ab阳性符合率为66.7%（24/36）；HCV－cAg与HCV－RNA阳性符合率为87.5%（21/24）。

3 讨 论

HCV感染通常是持续性的终生感染，抗体检测是一个非常有效的方法。但因感染HCV后，抗HCV出现较慢，一般情况下，抗体的血清学转换可以延迟到暴露后几个月才发生[1]；此时可发生抗HCV的假阴性（也就是说在抗体可检出之前或在血清学转换之中即所谓的“窗口期”），故在早期诊断丙型肝炎感染上有困难。

反转录聚合酶链反应（RT－PCR）是一个很敏感的方法。HCV－RNA可以在暴露后的1～2周被检出[2]。另外，在一些HCV感染后恢复期的人群中，抗HCV可能会逐渐降低到检测限之下[3]；或免疫功能低下的HCV感染者，抗HCV会持续阴性，这时，HCV－RNA的检测是感染的惟一证据。故使用RT－PCR技术检测HCV－RNA是判断感染最有效的方法。但其技术复杂，环境、条件要求较高，不易被多数实验室接受和推广。HCV－cAg几乎与HCV－RNA同时出现，采用单克隆抗体制备的ELISA试剂盒检测 HCV核心抗原，经 HCV－RNA PCR法复核，符合率大于85%[4]；另有报道，HCV－cAg检测可以较 HCV－Ab检出时间提早23～46d[5]，且ELISA法较PCR法简便、快速，现有能开展ELISA检测的实验室无需增加特殊设备，均可检测。本次结果在被测的36例HCV－Ab阳性样本中HCV－cAg阳性21例，HCV－RNA阳性24例，符合率为87.5%（21/24），与文献报道一致。因此，在不具备RNA检测条件的实验室开展HCV－cAg检测是很好的筛查方法[6]。

36例HCV－Ab阳性仅检出21例 HCV－cAg阳性，HCV－cAg检出率低的原因，可能一是由于有抗体的存在，干扰了抗原的检测或样本中的HCV抗体可能与用于核心抗原检测的单克隆抗体竞争结合抗原而造成HCV－cAg的假阴性，为避免这种干扰，需对单克隆抗体作进一步筛选或作丙型肝炎核心总抗原检测。二是由于 HCV－Ab是丙型肝炎总抗体，单纯HCV－Ab阳性说明现症患者或既往感染患者，恢复期患者血清中HCV－Ab也阳性。本研究200例HCV－Ab检测阴性的临床样本中，检出 HCV－cAg阳性3例，经 HCV－RNA确认其中有1例阳性。表明“窗口期”的患者因测不出HCV－Ab易被漏诊。仅用 HCV－Ab检测将有可能存在0.5%（1/200）漏诊的风险，就这0.5%也是不容忽视的，尤其是对手术前HCV筛查的患者，涉及术中感染责任、用血安全等问题，HCV－cAg检测在一定程度上降低了这些风险。因此，认为HCV－cAg检测可作为HCV抗体检测的补充试剂联合应用临床，但其敏感性和特异性有待提高。

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10.3969/j.issn.1672－9455.2012.18.033

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1672－9455（2012）18－2320－02

2012－05－25）