HPLC法测定盐酸左西替利嗪分散片的含量及有关物质

罗静波

·实验研究·

HPLC法测定盐酸左西替利嗪分散片的含量及有关物质

罗静波

目的使用HPLC法测定盐酸左西替利嗪分散片的含量及有关物质。方法HypersilBDS C18色谱柱(150 mm×4.6 mm，um)，流动相每升为0.02 mol磷酸二氢铵(用磷酸调PH-3.2):乙腈(60: 40)加入0.5%三乙胺，流速每分钟约为0.8 mL，进样量20uL，检测波长230nm。结果盐酸左西替利嗪质量浓度在0.08～0.12 g/L内与峰面积线性关系良好(r=0.9992)，平均回收率为99.8%，RSD= 0.56%(n=9)。结论HPLC法的操作方法简单，结果准确可靠，重现性好，灵敏度高。

HPLC法;盐酸左西替利嗪分散片;含量;有关物质

盐酸左西替利嗪片是新一代非镇静的抗组胺药物，是西替利嗪的R-异构体，具有受体选择性强、作用靶位明确、代谢迅速、不良反应较少等特点，主要用于治疗变应性鼻炎［1］。本文主要针对盐酸左西替利嗪分散的成分和相关物质进行HPLC法测定。

1 资料与方法

1.1 一般资料 Waters515 hPLC仪;HypersilBDSC18色谱柱; PHS-3 c型酸度计(上海雷韵试验仪器制造有限公司);电子天平(德国赛多利斯集团);盐酸左西替利嗪对照品(批号010220，5 m l/片)和盐酸左西替利嗪分散片(批号:010307、010306、010305，5 mg/片)均由成都英创科技发展有限公司提供;乙腈(批号:000115101，天津市四友生物医学技术有限公司);重蒸水(第三军医大学薪桥医院药学部自制);磷酸二氢铵(批号:20010112，中国成都化学试剂厂);乳糖(批号: 99072601，哈尔滨制药总厂);淀粉(批号:00080502，山东聊城阿华只要有限公司);微晶纤维素(批号:991025，江苏常熟市用药辅料厂);硬脂酸镁(批号:00052401，天津市天大化工实验厂)。其他试剂为分析纯。

1.2 检测方法

1.2.1 色谱条件 HypersilBDS C18色谱柱(150 mm×4.6 mm，um)，流动相每升为0.02 mol磷酸二氢铵(用磷酸调PH-3.2):乙腈(60∶40)加入0.5%三乙胺，流速每分钟约为0.8 ml，进样量20μl，检测波长230 nm。

1.2.2 溶液配制 ①制备供试品溶液:取盐酸左西替利嗪分散片样品10片，将其研碎并磨成粉末状后，取100 ml的容器将药物样品放入，再加入40 ml水，对其进行10 min的超声处理，之后让温度下降至室温，并加水稀释将其摇晃均匀，使用0.45 um的微孔滤膜过滤取得滤液。②制备空白溶液:盐酸左西替利嗪分散片的构成主要是由淀粉、乳糖、硬脂酸镁、微晶纤维素等。按照①的制备方法将其制作成空白的溶液。③制备对照品溶液:用精密仪器测定盐酸左西替利嗪分散片药物5 mg，按照①的制备方法将其制成对照品溶液，放置在100 ml的容器中，并依法操作。

1.2.3 系统适用性试验 取出制备好的空白溶液、对照品溶液和供试品溶液，按照1.2.1的色谱条件取得色谱件，研究结果表明，样品保留在5 min处没有见到其他早知干扰，理论塔板数为2000以上。

1.2.4 线性关系考察 称取盐酸左西替利嗪分散片，要求其干燥并恒温，25 mg放置在100 ml的量瓶中，加入流动相溶液将其溶解，并加水稀释将其摇晃均匀，放置作为备用液。将备用液去25 m l放置瓶中，家如流动相稀释摇匀，分别将浓度调为10μg/ml、30μg/m l、50μg/ml、70μg/ml、100μg/ml的对照品溶液，按照1.2.1的色谱条件记录峰面积，以浓度X为横坐标，峰面积A为纵坐标进行线性回归分析，制出回归曲线，其方程式为:r=0.9997，A=671421X-14428，线性范围在10 um/ml-100 um/m l。

1.2.5 稳定性试验 选取相同的供试品溶液，于0 h、4 h、8 h、12 h，按1.2.1色谱调节操作，每个样品均策动五次，并记录峰面积和色谱。研究结果显示，供试品溶液12 h内的RSD为0.53%，稳定性好，并满足试验的要求。

1.2.6 回收率实验 称取等重的盐酸做西替利嗪分散片对照品，将其放入容量为50 m l的瓶子中，并将适量的辅料加入其中，加入适量的水直至刻度，摇晃均匀后，便可得到高浓度92.27μg/ml溶液，中浓度65.09μg/ml溶液及低浓度11.02 μg/m l溶液。将其过滤后取所得到的过滤液，按上述的色谱条件进样，对样品的锋面值进行记录，以标准曲线方程对其浓度进行计算。详情见表1。

2 讨论

HPLC法测定准确、灵敏度较高、简便易行，可以有效控制产品的质量。流动相选择的方面是通过对溶液中容易发生离子化的样品分离，使用调节流动相的pH值方法。因为盐酸左西替利嗪分散片具有叔胺的结构，和固定相表面没有被硅烷化游离硅醇基间，发生形成氢键或者离子交换，西替利嗪色谱峰出现了拖尾，时间保留较长，分离较不理想。流动相加入有一定比例的有机胺调节剂，即可竞争掩蔽或抑制固定相表面游离的硅醇基活性，则碱性药物易于改善峰形、出峰。经过优化的考察，HPLC法流动相是采用0.02 mol/L的磷酸二氢铵:乙晴(60:40)，缩短保留时间，有良好的峰形，获得较好的重现性。

［1］ 陈继川，姬长友，等.盐酸左西替利嗪对124例变应性鼻炎的前瞻性临床研究．重庆医学，2006，35(4):364-366．

［2］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)．北京:化学工业出版社，2005．

410005长沙市第一医院药剂科

表1 盐酸做西替利嗪分散片回收实验效果比较(n=3)

加入量(mg) 测得量(mg) 回收率(mg)x(%) RSD(%) 40.2 40.4 100.4 39.4 39.3 91.1 40.3 40.0 99.2 50.1 50.3 100.3 99.7 0.55 50.3 50.0 99.5 50.6 50.2 99.1 60.0 60.2 100.2 59.3 58.9 99.2 60.2 60.3 100.1

1.2.7 精密度试验 分别配置浓度为100.0μg/ml、50.0 μg/ml、10.0μg/ml高中低三种浓度的样品溶液，在1 d内连续测定3次，1周内连续测定3次，并计算3种浓度的日内RSD值分别是2.12%、0.42%、0.45%(n=3)，周内的RSD值分别是2.40%、2.62%、1.88%(n=3)。试验结果精密度较好。

1.2.8 样品含量的测定 取盐酸左西替利嗪分散片样品20片，将其研碎并磨成粉末状后，取50 m l的容器将药物样品放入，加入流动相溶液将其溶解，并加水稀释将其摇晃均匀过滤，取20um滤液注入色谱仪。并记录色谱;另取盐酸左西替利嗪分散片对照品适量，加入流动相溶液将其溶解，将其浓度稀释成0.10 g/L，按照外标法以峰面积计算样品含量，有关物质和样品含量测定结果如下:批号010305，其含量99.12%，有关物质为0.36%;批号010306，其含量100.26%，有关物质为0.41%;批号010307，其含量99.34%，有关物质为0.33%;

1.2.9 有关物质的检查 采用不加校正因子的主成分自身对照法［2］。取本品细粉适量(约相当于盐酸左西替利嗪5 mg)，加流动相制成约0.2 g/L的溶液，滤过，取续滤液作为供试品溶液;将供试品容液用流动相稀释100倍，为1%对照液。取对照溶液20μl进样，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10%;再精密量取供试品溶液20μl进样，记录色谱图至主成分色谱峰保留时间的3倍。扣除溶剂峰和辅料峰，量取色谱图上除去盐酸左西替利嗪峰外各杂志峰的总和与对照品主峰峰面积比较，计算杂志含量，见表2。由此可见三批样品的杂质含量均小于1%。