菟仙海蚣胶囊治疗少精、弱精症的临床与实验研究

徐瑛瑛 马红 张银川 张春霞 刘喜平

菟仙海蚣胶囊治疗少精、弱精症的临床与实验研究

徐瑛瑛 马红 张银川 张春霞 刘喜平

目的观察菟仙海蚣胶囊治疗少精、弱精症的疗效并探讨其作用机理。方法170例患者随机分为两组，治疗组口服菟仙海蚣胶囊，对照组口服五子衍宗丸治疗。观察两组疗效，并通过动物实验观察菟仙海蚣胶囊对该模型大鼠睾丸及附睾指数、精子数量等指标的影响。结果治疗组疗程疗效优于对照组(P＜0.01)。实验表明菟仙海蚣胶囊各剂量组均可提高模型大鼠附睾指数(P＜0.01或P＜0.05)、增加精子数量和精子活率(P＜0.01或P＜0.05)、升高血清中的FSH及LH含量(P＜0.05)。结论菟仙海蚣胶囊疗效明显，其作用机理可能与提高附睾指数、促进FSH、LH及TS的分泌有关。

不育;男性;少精子症;菟仙海蚣胶囊

笔者于2009年1月至2011年3月对应用菟仙海蚣胶囊的110例少精、弱精患者进行了临床观察，同时对菟仙海蚣胶囊进行了动物试验研究，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本组170例均为我院门诊患者，所有病例的诊断均参照《WHO人类精液及精子-宫颈精液相互作用实验室检验手册》［1］(4版)制定的精液数量参考值。纳入与排除标准为，凡年龄在23～40岁，结婚同居2年以上，性生活正常，夫妻双方未采取任何避孕措施，女方正常，男方精子检查符合诊断标准，无严重躯体性疾病和其他生殖系统器质性病变及感染性疾病者纳入观察对象;未按规定用药、无法判断疗效或资料不全，影响疗效或安全性者，均不纳入标准。将临床确诊的170例患者采用数字表法随机分为2组。治疗组110例，年龄23～40岁，平均(30.0±20.0)岁，病程2～10年，平均(5.0±1.4)年。少精症12例，少精弱精症79例;弱精症19例。对照组60例，年龄23～40岁，平均(29.0±1.80)岁;病程2～9年，平均(4.0±1.40)年;少精症6例，少精弱精症44例，弱精症10例。2组年龄、病程、精液常规及合并症等经统计学处理，差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法 治疗组口服菟仙海蚣胶囊(由菟丝子 、仙灵脾、海马、蜈蚣等组成，定西市妇幼保健院制剂，专利号201010125047，每粒 0.25 g，每克含生药 3.14 g)。4 粒/次，3次/d，温开水送服;对照组口服五子衍宗丸(北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂，国药准字Z11020188):10粒/次，3次/d。疗程均为3个月。

1.3 注意事项 ①治疗期间停止其他任何药物，嘱患者禁烟酒、忌高温作业及热水泡浴，并嘱患者配偶帮助患者减轻压力、增强信心。②肝肾功能不全者禁用，有过敏体质或对鱼虾有过敏者慎用。

1.4 检测方法 受检者禁欲4～7 d后到本院取精室，以手淫体外排精方式采集精液于专用干燥消毒杯内，置于25～37℃水浴箱内，一小时内液化后，由检验科采用WLJY-9000型伟力彩色精子质量检测系统检查，l周后复查1次，取两次精液分析结果的平均值。

1.5 统计学方法 SPSS 17.0统计软件包，计数资料用χ2检验Ridit分析，计量资料数据用均数±标准差(±s)表示，显著性检验t检验。

1.6 结果

1.6.1 疗效标准 根据WHO《不育夫妇标准检查与诊断手册》［2］并参照《中药新药临床研究指导原则》［3］中有关疗效标准进行评定。临床治愈:少精症治疗后精子密度≥20×109/L，弱精症精子活动力a级加b级≥50%或a级≥25%，成活率1 h≥60%;或治疗后女方怀孕。显效:少精症治疗后精子密度提升≥50%，弱精症精子活动力a级加b级提升≥25%或a级提升≥12.5%，成活率1 h提升≥50%，但未达到正常指标。有效:少精症治疗后精子密度提升≥15%，弱精症治疗后精子活力a加b级或a级提升≥5%，成活率1 h提升≥15%;无效:治疗后精子密度、成活率＜15%及精子活力提升＜5%或无变化。

1.6.2 两组疗效比较 治疗组110例，临床治愈56例（50.90%），显效33例(30.00%)，有效13例(11.81%)，无效8例(7.27%)，临床治愈率50.90%，总效率92.73%;对照组60例，临床治愈13例（21.67%），显效17例(28.33%)，有效10例(16.67%)，无效 20例(33.33%)，临床治愈率21.67%，总效率66.67%。2组比较差异均有统计学意义(P＜0.01)，提示治疗组疗效优与对照组。

2 实验研究

2.1 材料与方法

2.1.1 动物 SD大鼠，SPF级，雄性，体重280～320 g，由甘肃中医学院科研实验中心提供，动物实验设施使用证SYXK(甘)2004～0006，实验动物质量合格证号SCXK(甘)2004～0006，发证单位甘肃省科技厅;动物分笼饲养，食固体SPF级饲料，由北京市科奥协力饲料有限公司提供，合格证号:京动许字(2000)第015号。

3 讨论

菟仙海蚣胶囊中菟丝子具有补肾养肝，益精固涩的作用，为君药，仙灵脾补肾壮阳，仙茅补肾阳并能助脾胃运化，增进食欲，二药为臣药。现代研究表明［5］，补肾壮阳药有类激素样作用，含锌量最高，能促进睾丸发育，兴奋性机能，促进精液分泌和精子质量，对改善睾丸曲细精管及间质细胞的损害均有一定效果。海马，具有补肾壮阳，散结消肿，调和气血的功能，为佐药;蜈蚣，熄风止痉，解毒散结，通络止痛，为使药。全方配伍具有滋肝补肾，益精壮阳，活血通络，疏通精道，健脾暖胃之效，使精出有源、精行通畅。

动物实验证明，菟仙海蚣胶囊大剂量能够明显增加生精障碍模型大鼠的精子活率和精子数量数，与模型组比较差异均有统计学意义，且中、小剂量也能明显升高该模型的精子活率。

从本实验研究结果得知:模型组大鼠的FSH、LH、TS均较空白对照组为低，表明在本实验中腺嘌呤能够抑制以上激素的分泌或合成，其中菟仙海蚣胶囊大剂量能够明显升高该模型大鼠血清中的FSH及LH含量，在促进生精、提高精液质量等方面显示出良好的疗效。

［1］世界卫生组织．WHO人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册.第4版.北京:人民卫生出版社，2001:5．

［2］世界卫生组织.不育夫妇标准检查与诊断手册.北京:科学出版社，1994:19．

［3］中华人民共和国卫生部.中药新药临床研究指导原则第1辑，1993:192．

［4］杨阿民，李曰庆，李海松，等.补肾生精丸对腺嘌呤所致生精细胞损伤模型大鼠的干预作用.北京中医药大学学报(中医临床版)，2006，13(3):1-3．

［5］王琦.中医生殖医学的历史现状与展望.中国性科学，2005，14(4):3-7．

743000 甘肃省定西市妇幼保健院(徐瑛瑛 张银川张春霞);定西市安定区疾控中心(马红);甘肃中医学院(刘喜平)

2.1.2 药品、试剂与仪器 菟仙海蚣胶囊由菟丝子、淫羊藿、海马等五味药物按一定比例组成，(定西市妇幼保健院制剂，专利号201010125047.2)，0.25 g/粒，每克含生药 3.14 g，实验时用生理盐水配成相应浓度的溶液。五子衍宗丸(北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂，国药准字Z11020188);羧甲基纤维素钠(河北省文安县盛源纤维素厂，批号20090227);腺嘌呤(洛阳德胜化工有限公司，批号20080911);促卵泡激素FSH、促黄体生成素LH、睾酮T放免试剂盒(北京福瑞生物工程公司，批号:20090612)。仪器:伟力精子检测系统(WL-9000型，北京伟力新世纪科技发展有限公司);全自动生化分析仪(ALCYON300美国雅培);全封闭组织脱水机(Tissue-Tek®VIPTM5Jr，日本樱花);显微镜(BH-2，日本OLYMPUS);旋转蒸发仪(R-200，瑞士BUCHI);电子天平(BL150，北京Sartorius)。

2.1.3 动物分组与给药方法 参考文献［4］的方法，3个月龄SD雄性大鼠，280～320 g，72只，自由进食饮水，适应3～4 d后，将其随机分为6组，即空白组、模型组、五子衍宗丸对照组，大剂量组、中剂量组和小剂量组，每组12只，分笼饲养，每笼6只。空白对照组每天灌胃0.5%羧甲基纤维素钠10 μl/g;模型对照组灌胃0.5%羧甲基纤维素钠5 μl/g，40 min后灌胃5%的腺嘌呤混悬溶液(250 μg/g)5 μl/g;五子衍宗丸组灌胃0.5%羧甲基纤维素钠5 μl/g，40 min后灌胃24%的五子衍宗丸溶液5 μl/g;菟仙海蚣胶囊大剂量组每天灌胃中药浸膏5.4 g生药/kg，40 min后灌胃5%的腺嘌呤混悬溶液(250 μg/g)5 μl/g;中剂量组每天灌胃中药浸膏2.7 g生药/kg，40 min后灌胃5%的腺嘌呤混悬溶液(250 mg/kg)5 μl/g;小剂量组每天灌胃中药浸膏1.35 g生药/kg，40 min后灌胃5%的腺嘌呤混悬溶液(250 μg/g)5 μl/g。1次/d，实验总持续时间均为40d，实验期间每7 d称体质量1次，调整给药量，每天每100 g体质量大鼠的给药总量为1 ml。

2.1.4 检测指标 ①各组大鼠睾丸、附睾指数及精子数量、精子活率的变。②对生精细胞损伤模型大鼠生殖内分泌激素FSH、LH及T的影响。

2.2 结果

2.2.1 各组大鼠睾丸、附睾指数及精子数量、精子活率的变化结果见表1。模型组睾丸指数与空白组比较无显著性差异(P＞0.05)，附睾指数较空白组明显降低(P＜0.01)，精子活率和精子数量均明显降低(P＜0.01);菟仙海蚣胶囊各剂量组及阳性对照组睾丸指数无明显变化、但可提高附睾指数(P＜0.01或P＜0.05)、各剂量组均可增加精子数量和精子活率(P＜0.01或P＜0.05)。

2.2.2 模型大鼠生殖内分泌激素的影响 结果见表2。模型组大鼠的FSH、LH、TS均较空白对照组为低(P＜0.01)，表明在本实验中腺嘌呤能够抑制以上激素的分泌或合成，其中菟仙海蚣胶囊大剂量能够明显升高该模型大鼠血清中的FSH及LH含量(P＜0.05)。

表1 各组大鼠睾丸、附睾指数及精子数量、精子活率的变化(x ± s，n=12)

注:与空白组比较▲P＜0.05，▲▲P＜0.01，与模型组比较※P＜0.05，※※P＜0.01

组别 剂量(g/kg) 睾丸指数(g/kg) 附睾指数(g/kg) 精子数量(109L) 精子活率(%)正常对照组0.65±0.036 0.28±0.022 20.59±1.77 92.9±2.9模型对照组 0.25 0.62±0.038 0.20±0.021▲▲12.65±1.53▲▲72.7±6.5▲▲五子衍宗组 1.20 0.61±0.025 0.25±0.027※13.80±1.90 78.6±5.7※菟仙海蚣大 5.40 0.63±0.028 0.29±0.019※※19.63±1.83※※90.0±6.8※※菟仙海蚣中 2.70 0.63±0.041 0.27±0.032※※16.89±2.11※※89.7±5.3※※菟仙海蚣小 1.35 0.62±0.027 0.26±0.028※15.73±2.23※78.4±6.1-※

表2 菟仙海蚣胶囊对模型大鼠生精细胞损伤模型大鼠内分泌激素的影响(±s)

注:与空白组比较▲P＜0.05，▲▲P＜0.01，与模型组比较※P＜0.05，※※P＜0.01

组别 剂量(g/kg) 例数 TS(nmol/L) LH(mIU/L) FSH(mIU/L)12 9.43±1.44 1.15±0.19 1.52±0.12模型组 0.25 11 7.66±1.55▲▲0.73±0.13▲▲1.04±0.13▲▲五子衍宗丸组 1.2 12 8.78±1.39※0.83±0.16※1.36±10.21※※大剂量组 5.4 12 9.03±1.16※0.87±0.14※1.05±0.20中剂量组 2.7 12 7.05±0.88 0.74±0.13 1.05±0.13小剂量组空白组-1.35 12 7.12±0.92 0.75±0.21 1.04±0.11