女贞子水煎剂对性未成熟雌性小鼠主要脏器系数的影响*

孙曙光，李玉洁，张明昊

河南中医学院基础医学院实验教学中心 郑州 450008

女贞子是传统的扶正固本药物，为木犀科植物女贞的成熟果实干燥而成[1-2]。研究[3-4]发现，女贞子有调节免疫功能、抗菌、抗炎、抗肿瘤、保肝、降血糖、降血脂及抗衰老等多种药理作用，临床上可用于肝肾阴虚、眩晕耳鸣、咽干鼻燥、腰膝酸痛及月经量多等多种疾病的治疗。目前，以女贞子为主要处方组成的方剂具有补益肝肾、滋阴止血等功效，能够缓解久病虚损、气阴不足，促进手术、放、化疗后机体正常功能的恢复，在临床上被广泛采用[5-6]。女贞子是植物雌激素含量较高的几种中药之一。作者采用经典的体内实验方法，分析给予不同剂量女贞子水煎剂的性未成熟雌性小鼠体内主要脏器系数的变化，为中药产品及保健食品的开发提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物 21 d龄昆明种雌性小鼠60只，体质量9～12 g，购自河南省实验动物中心。实验期间饲喂于河南中医学院动物实验中心，一级环境条件下饲养，温度(25±1)℃，控光(12 h明暗相间)，自由饮水、进食。

1.2 药物与试剂 女贞子购自郑州市张仲景大药房(产自河南)，实验前用自来水浸泡30 min后煎煮3次，混匀并浓缩至0.88 kg/L。阳性药物己烯雌酚购自上海通用药业股份有限公司(批号009003)，实验前用吐温与蒸馏水配成乳浊液。

1.3 实验分组 小鼠适应性饲养2 d，随机分为5组，每组12只，分别为阴性对照组、阳性对照组和女贞子低、中、高剂量组。阳性对照组给予己烯雌酚乳浊液(35 mg/kg)，阴性对照组给予等体积的蒸馏水，女贞子低、中、高剂量组分别给予 4.4、6.6和8.8 g/kg(按人给药量的20倍、30倍、40倍计算)，以蒸馏水稀释。均灌胃给药，1次/d，连续给药8 d。

1.4 脏器取材与称量 小鼠给药8 d后称质量，颈椎脱臼处死，立即剖取子宫、胸腺、心脏、脾脏、肾脏及肾上腺，除去上述器官周围的脂肪结缔组织，吸尽脏器表面血液，用电子天平称量。计算各脏器质量占体质量的百分比，即脏器系数[7]。

1.5 统计学处理 采用SPSS 17.0进行分析，应用单因素方差分析和LSD-t检验分析各组间主要脏器系数的差异，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 一般状态观察结果 阴性对照组小鼠状态良好，反应灵敏，皮毛有光泽;阳性对照组小鼠反应略显迟钝;女贞子低剂量组小鼠反应略显迟钝，但状态比阳性组稍好;女贞子中、高剂量组动物状态良好，无死亡现象。

2.2 5组小鼠主要脏器系数比较 见表1。

表1 5组小鼠主要脏器系数的比较 %

3 讨论

植物雌激素可以与哺乳类动物及人体雌激素受体相结合并将其激活，在体内发挥双向调节作用[8]。长期以来，许多中草药及其复方被广泛应用于妇科病的治疗和保健，其中所含的植物雌激素的药效作用不容忽视[9-11]。为了尽量减少内源性雌激素分泌对实验结果产生的影响，作者选用了性未成熟雌性小鼠作为样本，并以己烯雌酚作为阳性对照药，以使检测到的脏器系数更为准确。该实验选用蒸馏水作为阴性对照品，主要是考虑实验药物女贞子煎剂为水煎剂，而实验过程中将吐温加入到阳性对照药中主要是为了增加其水溶性，便于实验给药。以往的研究[12]显示，吐温毒性小，亲水性强，低剂量时对小鼠体质量及脏器系数无明显影响。人口服吐温4.5 ～6.0 g/d，连续28 d，甚至4 a之久亦无病态反应[13]。实验中阳性对照组和女贞子低剂量组小鼠出现了反应迟钝的现象，导致这种现象的原因尚不清楚，有待深入研究。该实验结果显示女贞子中、高剂量组子宫系数与阴性对照组相比明显增高，且随给药剂量的增大而增强，但女贞子低、中、高剂量组小鼠子宫系数都明显低于阳性对照组，提示女贞子的植物雌激素样调节作用在一定范围内随剂量的增大而增强。

胸腺是机体的重要淋巴器官，能够分泌胸腺激素及激素类物质，其功能与免疫密切相关;脾脏是机体最大的免疫器官，占全身淋巴组织总量的25%，含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞，是机体细胞免疫和体液免疫的中心[14]。该实验结果显示，阳性对照组小鼠胸腺、脾脏系数与阴性对照组相比分别有降低和升高的趋势，但差异无统计学意义，提示阳性药物对小鼠免疫系统有一定的影响，但对胸腺和脾脏的作用不一样，原因尚不清楚，有待研究。女贞子低、中剂量组小鼠胸腺系数与阳性对照组相比差异有统计学意义;女贞子高剂量组小鼠胸腺系数与阴、阳性对照组相比差异无统计学意义;女贞子低剂量组小鼠胸腺系数较阴性对照组增高，提示女贞子能够在一定剂量范围内影响小鼠机体的免疫功能，其作用可能随给药量变化而变化。

为了进一步考察女贞子在发挥药理作用的同时是否还表现出一定的毒副作用，作者还记录了各剂量组小鼠的肾脏、肾上腺、心脏、肝脏等脏器系数，结果显示女贞子高剂量组小鼠心脏系数与阴性对照组相比明显降低，提示女贞子随给药量的增大对性未成熟小鼠的心脏会产生一定的影响，这种影响可能与女贞子的毒副作用有关，具体作用还有待进一步的研究证实。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(第一部)[M].2005年版.北京:化学工业出版社，2005:229

[2]戚世媛，熊正英.女贞子提取物对大鼠骨骼肌抗氧化作用和运动能力的影响[J].西安交通大学学报:医学版，2011，32(2):187

[3]罗世炜.女贞子的研究与开发[J].农村经济与科技，2010，21(5):140

[4]金芝贵，金剑，肖忠革，等.女贞子的药理作用及其临床应用进展[J].药学服务与研究，2011，11(3):189

[5]Collins BM，Mclachlan JA，Arnold SF.The estrogenic and antiestrogenic activities of phytechemicals with the human estrogen receptor expressed in yeast[J].Steroids，1997，62(4):365

[6]Tinwell H，Ashby J.Sensitivity of the immature rat uterotrophic assay to mixtures of estrogens[J].Environ Health Perspect，2004，112(5):575

[7]章金涛，朱奎成，杜春燕，等.豫医卷毛大鼠与SD大鼠主要脏器系数及生长发育情况比较[J].郑州大学学报:医学版，2007，42(4):634

[8]郝庆秀，王继峰，牛建昭，等.熟地等4味中药的植物雌激素作用的实验研究[J].中国中医杂志，2009，34(5):620

[9]陈春，张淑丽.红花等10种中药的雌激素活性研究分析[J].中医中药，2011，9(14):296

[10]王玉梅，陈前锋，杨莉娟，等.女贞子对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响[J].天然产物研究与开发，2011，23(2):232

[11]王大伟，牛建昭，王继峰，等.中药植物雌激素受体调节剂筛选研究中的问题与对策[J].中草药，2009，40(5):825

[12]张述禹，刘惠惠，云彩麟.吐温-80的药理与应用[J].中国医院药学杂志，1992，12(10):459

[13]马鸿雁，丛英，张明令，等.中药注射剂中吐温80用量解析[J].亚太传统医药，2010，6(8):17

[14]高美华.医学免疫学[M].北京:人民军医出版社，1999:74