乳腺癌彩色多普勒血流表现与组织中VEGF-C表达的相关分析

马可心 罗辉

乳腺癌是临床最常见的恶性肿瘤之一，严重危害女性的身心健康。国外研究报道，许多实体瘤中血管生成都比较活跃，并且血管生成的活跃程度与其预后相关[1]，而乳腺癌也属于实体瘤。VEGF-C可通过促进细胞增殖，抑制细胞凋亡及促进肿瘤血管生长等多种机制，参与调节肿瘤发生和发展过程[2]。本研究通过术前观察乳腺癌彩色多普勒血流表现，术后采用免疫组织化学技术检测组织VEGF-C的表达，探讨二者的相关性。

1 资料与方法

1.1 病例来源 病例来源于吉林妇产医院2009年1月～2012年1月住院接受乳腺癌改良根治术或者保乳术的患者。

1.2 一般资料 50例乳腺癌患者年龄30～75岁，平均年龄(53.41±7.19)岁，均为女性单侧患病，且术前均未做过任何化疗或放疗。组织学分级：1级14例、2级20例、3级16例。TNM分期：Ⅰ期16例、Ⅱ期20例、Ⅲ期14例。乳腺癌组织学类型：浸润性导管癌35例、浸润性小叶癌6例、粘液腺癌4例、导管内癌3例、乳头湿疹样癌1例和管内乳头状癌1例。肿块直径1.0～6.2cm。

1.3 血流检测方法

仪器：日立HV7000彩色超声诊断仪，探头频率为5～10MHz。检测方法：受检者取仰卧位，双臂上举，将双侧乳房充分暴露，然后用耦合剂涂抹探头，采用直接扫查法。首先扫查乳房外上象限，探头长轴要与乳腺导管走向一致，然后以乳头为中心顺时针扫查；再将探头长轴与乳腺导管垂直，由乳头开始向周边扫查。常规探测双侧腋窝和胸骨旁淋巴结情况。彩色多普勒血流信号分级判定按Adler分级法[3]：肿块内未发现血流信号为0级；少量血流，可见1～2个点状或短棒状血流为1级；中量血流，可见3～4个点状血管或一个较长的血管，其长度可接近或超过肿块半径为2级；多量血流，可见5个以上点状血管或2个较长的血管为3级。

1.4 VEGF-C检测方法

试剂：兔抗人VEGF-C抗体试剂盒均购于上海丽臣生物科技有限公司，SP检测试剂盒和DAB显色剂均购于福建迈新公司。实验方法：所有乳腺组织石蜡块均制成4μm厚组织切片，免疫组化染色采用SP法，操作步骤按照兔抗人VEGF-C抗体试剂盒说明书进行。在显微镜高倍镜(400X)下对染色后的标本代表性的区域进行拍摄，每张标本拍摄五张照片，使用Image-Pro Plus 6.0软件分别测量胞浆黄染区域累积光密度和面积，计算出平均积分光密度(OD)值。

1.5 统计学方法 采用SPSS 16.0统计软件包进行分析，多样本均数比较采用方差分析检验，以P≤0.05时为差异有统计学意义。

2 结果

本研究结果显示，随着乳腺癌组织中血流信号级别越高，其VEGF-C的表达越强，差异存在统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 乳腺癌组织中血流信号分级与VEGF-C表达OD值的关系

3 讨论

乳腺癌是典型的血管依赖性肿瘤，其新生血管的存在又是彩色多普勒血流显像的病理基础，在超声图像上可宏观显示，可以准确判断、评价其血管生长分布、血流数量、性质、血流动力学参数等信息[4]。近年来，随着科学技术的发展，使得彩色多普勒超声对肿块内血流检测的敏感性显著提高，加上恶性肿瘤的生物特性(生长迅速、血供丰富及血管走行紊乱等)，其血流很易被检出。本研究发现84.00%的患者，肿块中显示血流信号。VEGF-C与VEGFR-3结合，而VEGF-C/VEGF-D/VEGFR-3信号轴是调控肿瘤淋巴管生成的主要信号通路，其通过蛋白激酶C依赖的促分裂原活化蛋白激酶和丝・苏氨酸激酶信号传导通路，从而促进淋巴内皮细胞的存活与增殖[5]；VEGF-C还可诱导内皮细胞分泌多种组织蛋白酶及组织因子，促进新生血管生成，而新生的血管又可作用于癌细胞，导致更多数量的癌细胞增殖，结果导致肿瘤加速生长，血管数量逐渐增加，形成恶性循环[6]。本研究结果显示：不同血流分级的乳腺癌组织中VEGF-C表达不同，血流丰富的2级及3级乳腺癌组织中VEGF-C表达的OD值显著高于0级及1级。结果表明随着血流分级的增加，VEGF-C表达增强，VEGF-C过表达是促使肿瘤性血管生长的重要因子之一，同时，血流分级一定程度上反应了VEGF-C表达程度，侧面反映了肿瘤的生物学特性。张晨瑶等[7]人也报道，乳腺癌术后复发患者术前血清VEGF含量明显高于未转移者其手术前血清VEGF含量，血清VEGF高含量预示着乳腺癌的高侵袭转移能力。近年来，以肿瘤新生血管为靶点进行治疗的研究十分炽热，如应用抗VEGF及其受体的单克隆抗体，可以阻断VEGF诱导的内皮细胞信号传导，抑制肿瘤血管的形成[8]。通过本研究结果，测定乳腺癌的彩色多普勒血流，可以为该治疗方法提供重要的信息，如VEGF-C表达程度，是否适合采用VEGF受体抑制剂治疗等。

综上所述，彩色多普勒超声可以较为准确地显示乳腺癌组织的血供程度，结合VEGF-C的表达，有助于乳腺癌的临床诊断、治疗及预后判断，具有重要的临床意义。

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