紫外分光光度法测定野木瓜片含量

2012-09-18黄秀展潘民儒李荣德

中国医药指南 2012年13期

黄秀展潘民儒李荣德

（贵港市冠峰制药有限公司，广西贵港 537100）

野木瓜片为野木瓜经加工得的浸膏片，收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第十四册，具有祛风止痛、舒筋活络之功效。用于风邪阻络型三叉神经痛，坐骨神经痛，风湿关节痛。野木瓜主要含有黄酮类、酚类和皂甙类成分[1]，其单一成分文献报道少。原标准中尚未收载含量测定方法，虽文献中曾有报导其绿原酸的含量测定[2]，但因黄酮类成分是野木瓜的主要成分之一，因此控制黄酮类成分含量也是必要的。文献报道有关测定总黄酮类化合物的方法有：紫外分光光度法[3,4]、薄层层析-比色法[5,6]、硝酸铝显色法[7-9]等，本法选择硝酸铝显色法，参考中国药典2000年版收载品种排石颗粒、《卫生部药品标准》中成药方剂第20册野木瓜注射液的方法，以芦丁为标准进行研究，结果表明，本法简单、准确、重现性好。

表1 稳定性试验结果（n=8）

1 仪器与试剂

UV-2100型紫外可见分光光度计（日本岛津），BP-110S电子天平（德国Sartorius公司），超声仪（上海必能信：SB•5•200；电压：220V；频率：50Hz）。

芦丁对照品由中国药品生物制品检定所提供，野木瓜片由贵港市冠峰制药有限公司提供。甲醇等其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 测定溶液的制备

2.1.1 芦丁对照品溶液的制备

精密称取经120℃干燥至恒重的芦丁对照品20mg，置100mL量瓶中，加50%甲醇适量，振摇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得（每1mL含芦丁0.2mg）。

2.1.2 供试品溶液的制备

取野木瓜片20片，除去糖衣，精密称定，研细，取约2g，精密称定，置锥形瓶中，精密加甲醇100mL，称定重量，超声处理（200W，频率50Hz）30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。

2.1.3 阴性溶液的制备

按照制剂处方（不加野木瓜药材）按供试品溶液制备的方法，制成阴性溶液。

2.2 测定波长选择

取上述芦丁对照溶液、供试品溶液及辅料溶液各1mL，分别置10mL量瓶中，加50%甲醇至5mL，加5%亚硝酸钠溶液0.3mL，摇匀，放置6分钟，加10%硝酸铝溶液0.3mL，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液4mL，再加50%甲醇至刻度，摇匀。以相应的溶液为空白，在UV-2100型紫外可见分光光度计上，于400～600nm波长范围内测定吸收曲线。结果见图1，表明芦丁经过显色后，在510nm波长处有最大吸收，与多数文献报道[10]一致，野木瓜片样品经过显色后，亦在510nm波长处有最大吸收，辅料几乎无吸收，对测定无干扰。

图1 阴性（A）、对照品（B）、供试品（C）

2.3 标准曲线的制备

精密量取芦丁对照品溶液1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL，分别置10mL量瓶中，各照2.2自“加50%甲醇至5mL”起，以相应的溶液为空白，在510nm处测定吸收度，以吸收度（A）为纵坐标，浓度C（mg/mL）为横坐标，计算其回归方程（n=5）：A=8.0149C＋0.0987，r=0.9995，结果表明：芦丁在0.0202～0.1010mg范围内呈现良好的线性关系。

2.4 加样回收率试验

已知样品（批号：20040801）其含量为8.62mg／片，精密称取该样品5份，每份约1g，分别精密加入芦丁对照品溶液（1.02mg/mL）20mL，置锥形瓶中，精密加甲醇100mL，按2.1.2供试品溶液的制备方法制备，并照2.2自“加50%甲醇至5mL”起，以相应的溶液为空白，在510nm处测定吸收度，计算回收率，结果平均回收率为99.1%，RSD为2.07%（n=5）。