入境宠物犬狂犬病疫苗免疫效果分析及检疫对策

施勇 苏宝良 顾顺樟 徐国权

(上海机场出入境检验检疫局 上海 201202)

1 前言

随着我国的不断开放，国际交流的不断增多，入境宠物也呈现出逐年增多的趋势。由于宠物和人类的亲密接触，加之多来自不同的国家和地区，疫情复杂，尤其是狂犬病，被我国列入进境动物二类传染病。狂犬病是由狂犬病病毒引起的人和动物的一种急性接触性传染病。人和动物受到狂犬病病毒感染后，其潜伏期有长有短，短者一周左右，长者可达3年以上，大多数为1－2个月左右，其症状是神经兴奋和意识障碍，继之局部或全身麻痹而死亡危害甚大［1］，检疫监管稍有不当就可能造成疫病传入，给我国人民的健康及农牧业生产安全带来隐患。

图1 狂犬病毒粒子结构图

狂犬病毒粒子呈子弹形(图1)，表面糖蛋白以10 nm的突起覆盖病毒包膜，核蛋白包裹着病毒RNA，形成核糖核衣壳，以螺旋形缠绕在中心。磷蛋白和转录酶蛋白与核糖核衣壳联合，组成RNA依赖的RNA聚合酶［2］。糖蛋白构成病毒表面突起，是狂犬病毒与细胞受体相结合的部位，也是有效的保护性抗原，能诱导产生中和抗体并刺激细胞免疫。

上海机场检验检疫局在国内率先对入境宠物实施强制性隔离措施，与机场海关联合设立了入境宠物集中监管区，对空港口岸以分运行李形式入境的宠物实施集中监管，采取先实施隔离监管、后办理检疫及通关手续的模式［3］，报检时须提交输出国官方出具的检疫证书和狂犬病疫苗接种证书，这一模式加快了通关速度，大大降低了在口岸现场的检疫风险。在隔离检疫期间，目前采用胶体金标记法定性检测狂犬病毒，并没有要求检测接种狂犬病疫苗后血清中抗狂犬病抗体的水平，但是相关调查资料显示即使注射了狂犬病毒疫苗，仍有4%左右的犬带毒，而WHO狂犬病专家委员会认定接种狂犬病疫苗后犬血清中抗狂犬病病毒抗体滴度大于或等于0.5IU/mL时，接种犬才具有保护性［4］，凡免疫后抗体水平没达到要求的，应按免疫方案及时补种。这一监管空白带来的安全隐患可想而知，可能会严重威胁着人类的健康。

为了进一步加强上海口岸入境宠物犬的检疫管理，防止狂犬病等疫情传入我国，本文针对入境犬自身的因素，从年龄、体型大小、品种等影响狂犬病疫苗免疫效果方面进行了具体的分析，并提出了相应的对策，希望能够起到抛砖引玉的作用。

2 影响因素

2.1 年龄

犬按照年龄一般可分为幼年犬(1岁以下)、成年犬(1－7岁)、老年犬(7岁以上)，接种狂犬病疫苗后，幼年犬和老年犬产生的抗狂犬病病毒抗体水平要比成年犬低［5］。幼年犬的免疫系统还未发育成熟，而老年犬随着免疫功能趋于低下，这可能是两组犬免疫反应较低的主要原因，成年犬免疫细胞成熟且可能有相应的记忆性B细胞，产生的免疫应答也是最强的。

幼犬体内的母源抗体也是一个重要因素。母源抗体对保护幼犬避免早期感染疾病具有极其重要的意义，但也是干扰疫苗免疫最常见的因素。在母源抗体效价较高时进行疫苗免疫，它可中和疫苗(尤其是弱毒疫苗)而干扰免疫应答，导致犬的免疫失败。

其次一般幼犬注苗前都首先进行驱虫，驱虫剂量如果过大，往往会造成免疫抑制。

2.2 体型大小

犬按照体型一般可分为小型犬(体高不足25cm)、中小型犬(体高不足40cm)、中型犬(身高在41－60cm)、中大型犬(身高在60－70cm)、大型犬(身高在71cm以上)五组，接种狂犬病疫苗后小型犬和中小型犬产生的抗狂犬病病毒抗体水平比其他组低［6］，其他组随着体型的增大而抗体水平也增加。

某些狂犬病疫苗是按照体重计算剂量的，每瓶的抗原量是根据犬平均体重计算的，可能过多的抗原接种量会使小型犬产生一定的免疫抑制。另外，体型越大的犬具有更厚的皮下组织，免疫细胞较丰富，且疫苗接种的部位也更容易确定。

2.3 品种

研究发现犬的品种和抗狂犬病病毒抗体水平的高低并没有特别的相互关系，但是英国研究学者却发现牧羊犬、拉布拉多犬、哈巴犬、巴吉度猎犬、比格犬、威玛猎犬、惠比特犬对狂犬病疫苗的免疫应答却没有预期的高［6］，尤其是作为免疫学实验动物的比格犬。这可能和不同品种犬的主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility complex，MHC)相关，MHC是编码主要组织相容性抗原分子的基因群，控制着机体细胞间的相互识别、调节免疫应答，具有高度多态性。

每一个品种犬的MHC的多态性都不尽相同，其在染色体同一基因座有两种以上基因型，即可能编码二种以上的产物，因此针对疫苗中的狂犬病病毒抗原可能有不同免疫应答的启动和诱导［7］。但是哪一品种犬的MHC对狂犬病疫苗的抗原具有更高的识别、提呈作用还有待于进一步研究。

3 讨论与对策

狂犬病是由狂犬病病毒引起的一种人畜共患病，病死率几乎高达100%，是一种高风险的传染性疫病。进境宠物接种安全有效的狂犬病疫苗是预防犬传染病的最好办法，但是接种后在免疫期内能否抵抗强毒攻击的依据是疫苗能否刺激犬产生足够的抗体滴度(≥0.5IU/mL)，因此各国对宠物入境的检疫要求都极高。比如日本特别强调出口日本的宠物犬猫必须有经过日本官方认可，并有通过资格考核的检测实验室出具的合格抗狂犬病血清抗体检测报告;欧盟也要求由其认可实验室测定的抗狂犬病血清抗体，且血清抗体测验的结果必须达到要求，由欧盟外第三国提供的官方卫生证明必须附有相关证据及测验结果［8］。而我国只是要求货主或代理提供输出国官方出具的检疫证书和狂犬病疫苗接种证书，隔离场对狂犬病等病毒出具定性检测报告，而对抗狂犬病血清抗体的检测并没有具体的要求，这对宠物狂犬病的防控带来了一定的风险，很有可能经隔离检疫合格的宠物是一只对狂犬病病毒“不设防”的犬。因此，我们建议学习一些发达国家的做法，入境宠物疫苗接种证书上必须要有出境前官方认可实验室出具的抗狂犬病血清抗体的定量检测结果，且抗体水平应大于或等于0.5IU/mL。

所以不能认为只要进境宠物接种狂犬病疫苗就万无一失了［9］。因此，有必要对进境宠物犬进行分类管理和分析，筛选出高风险的犬只，建议加强对幼年犬、老年犬、小型犬且对狂犬病疫苗反应不佳犬种的监管，对这部分犬不仅要进行狂犬病毒的定性检测，还要抽查抗狂犬病毒血清抗体的水平。

加强犬病检测实验室的检测，目前上海口岸对进境宠物狂犬病的检测方法为利用单克隆抗体特异性的胶体金标记法，并没有单独检测抗狂犬病血清抗体，因此无法清楚宠物体内的抗体保护水平。如果要检测抗狂犬病血清抗体，必须要有通过相关资质考核的犬病检测实验室和科技人员。

另外，宠物犬在接种疫苗后一般10－15d才产生血清抗体和免疫力。此前抗体可能未产生或者滴度比较低(即免疫空白期)，此时犬仍有感染传染病的可能，建议应该限制处于免疫空白期的宠物入境。

最后，检验检疫部门应收集国外狂犬病疫苗生产厂商所用抗原蛋白的序列、结构、疫苗株所保护的范围等信息;随时关注全球狂犬病疫情的发展、毒株是否发生变异、疫苗保护能力的变化，真正做到细微处，完善相关的应急处置方案。

［1］ 金宏丽，王化磊，齐瑛琳，等.狂犬病病毒感染免疫反应研究进展［J］.中国病原生物学杂志，2011，6(8):614 －617.

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［3］ 徐国权.上海局探索入境宠物检疫新模式［N］.中国国门时报，2008－4－30.

［4］ Burr PD，Snodgrass D R.Serological response to rabies vaccination for the pet travel scheme［J］.Res Vet Sci，2002，72(1):25.

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［8］ 史卫军，严燕.入境伴侣动物检疫监管存在问题及对策［J］.中国动物检疫，2009，26(9):64 －65.

［9］ Nicholas J，Adam FC，et al.The immune response to rabies virus infection and vaccination［J］.Vaccine，2010，28:3896 –3901.