反相高效液相色谱法测定香砂养胃丸中辛弗林含量

窦金凤

(江苏省镇江市药品检验所，江苏 镇江 212003)

香砂养胃丸由木香、砂仁、陈皮、茯苓、枳实等14味中药组方，收载于 2010年版《中国药典(一部)》[1]，具有温中和胃之功效，用于胃阳不足、湿阻气滞所致的胃痛、痞满。原标准只规定测定厚朴的含量，而对方中主药陈皮却没有鉴别，枳实只有薄层鉴别，均没有含量测定，不能全面控制药品的质量。笔者采用高效液相色谱法对处方中的陈皮[2]、枳实[3]所含辛弗林进行了含量测定，进一步提高了药品标准，现报道如下。

1 仪器与试药

SK250LH型超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司);BP211D型电子天平(赛多利士);Agilent1100型高效液相色谱仪，G1314A型VWD检测器(美国安捷伦公司)。辛弗林对照品 (中国药品生物制品检定所，批号为110727－200306);乙腈为色谱纯;水为二次重蒸水;香砂养胃丸(河南宛西制药有限公司，批号分别为 100801，20100934，070301)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:Kromasil C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流动相:乙腈－甲醇－0.1%冰醋酸溶液(每1 000 mL含磷酸二氢钾0.6 g，十二烷基磺酸钠 1.0 g，15 ∶30 ∶55);流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;进样量:20 μL;检测波长:224 nm;理论塔板数:7 491。

2.2 溶液制备

精密称取辛弗林对照品10.15 mg，置 100 mL量瓶中，加50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成对照品贮备液(每1 mL含辛弗林101.5 μg)。再精密量取对照品贮备液2 mL，置20 mL量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液(每1 mL含辛弗林20.3 μg)。取本品粉末约1 g，精密称定，置25 mL量瓶中，加50%甲醇适量，超声30 min，冷却至室温，用50%甲醇定容，摇匀，过滤，精取续滤液10 mL，浓缩至1 mL，加于聚酰胺柱(30 ～60 目，2 g，内径 1.5 cm)上，用水 20 mL 洗脱，收集洗脱液至20mL量瓶中，用水至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

2.3 方法学考察

空白干扰试验:按处方比例称取除陈皮、枳实外的其他几味药，按处方制备工艺制备阴性样品，照供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液，依法测定。结果在主成分出峰处无干扰(图1)。

线性关系考察:分别精密量取对照品贮备液 (101.5 μg/mL)1，2，3，4，5 mL 置 20 mL 容量瓶中，定容，摇匀，在上述色谱条件下进样分析，以峰面积(Y)为纵坐标、相应质量浓度(X)为横坐标绘制标准曲线，得回归方程 Y=74.189 X+3.438 8，r=0.999 9(n=5)。结果表明，辛弗林质量浓度线性范围为5.08～25.38μg/mL。

精密度试验:取同一对照品溶液，重复进样5次，记录峰面积，RSD 为 0.5%(n=5)。

重复性试验:取同一批样品5份，依法测定辛弗林的含量，其平均含量为 0.569 mg/g，RSD 为 0.6%(n=5)。

稳定性试验:在本试验条件下，将供试品溶液室温放置10 h，每隔一段时间进样20 μL记录峰面积。结果辛弗林峰面积平均值为 860.2，RSD 分别 0.5%。

加样回收试验:取6份已知含量的样品(批号为100801)约0.5 g，精密称定，精密加入辛弗林对照品贮备液 (101.5 μg/mL)2.2，2.8，3.4 mL，照样品含量测定法测定。结果见表 1。

2.4 样品含量测定

图1 高效液相色谱图

表1 辛弗林加样回收试验结果(n=6)

取供试品溶液和对照品溶液，各进样20 μL，读取峰面积值，按外标法计算含量。结果批号分别为100801，20100934，070301的样品中辛弗林含量分别为 0.569，0.481，0.401 mg/g。

3 讨论

通过试验得知，辛弗林在224 nm波长处有较大吸收，其他成分在该波长处无干扰，因此可选择此波长作为检测波长。

试验过程中曾尝试甲醇－水(1 000 mL中加入磷酸二氢钾0.6 g，十二烷基磺酸钠 1.0 g，冰醋酸 1 mL，50 ∶50)、甲醇 －0.02% 磷酸溶液(65 ∶35)、甲醇 － 水(62 ∶38，内含 0.1% 十二烷基磺酸钠及0.1%磷酸)为流动相，经比较得知，选用乙腈－甲醇－0.1%冰醋酸溶液(每1 000 mL含磷酸二氢钾0.6 g，十二烷基磺酸钠 1.0 g，15 ∶30 ∶55)，比例最佳，峰形及柱效较好。

通过试验，确定了香砂养胃丸中辛弗林的含量测定方法，测定结果可靠，方法简便，为香砂养胃丸的质量控制提供了依据。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社，2010:876，230 －231.

[2]赵 宇，谢培山，卢平华，等.枳实、枳壳、青皮和陈皮等药材中辛弗林含量测定研究[J].世界科学技术－中医药现代化，2006，8(4):45.

[3]许 妍，付辉政.RP－HPLC法测定枳实中辛弗林的含量[J].药品评价，2005，2(6):436 －437.