心脑宁片对东莨菪碱所致小鼠记忆障碍模型的影响

吕宏迪，郝少君，张中华，张正臣

心脑宁片由人参、当归、川芎等组成，具有活血化瘀，益气安神，用于治疗冠心病，脑血栓形成等，亦可用于治疗记忆力减退，抗衰老等。为探究其增强记忆力的作用，笔者进行了心脑宁片对东莨菪碱所致小鼠记忆障碍模型影响的实验研究。

1 材料与方法

1.1 药品 心脑宁片由解放军第371医院制剂室提供，批号20110606；吡拉西坦片，上海信谊药厂有限公司生产，批号110606；金纳多片，德国威玛舒培博士药厂生产，批号20090808；亚硝酸钠，天津市化学试剂三厂生产，批号20080908；氢溴酸东莨菪碱注射液，上海禾丰制药有限公司生产，批号110701；羧甲基纤维素钠，天津恒兴化学试剂制造有限公司，批号20090723；生理盐水，河南华利制药股份有限公司生产，批号11041806。

1.2 动物 小鼠，清洁级，河北省实验动物中心提供，合格证号1112078。

1.3 仪器 YLS-2T型小鼠跳台记录仪，山东省医学科学院设备站生产；BA-200小鼠避暗仪，成都泰盟科技有限公司；万用电表 （沪）制01040006上海精益仪表厂。

1.4 方法

1.4.1 对小鼠获得性记忆障碍模型的影响（跳台法） 取体重18～21 g小鼠，筛选小鼠双前肢脚掌皮肤电阻在150～200 kΩ的小鼠70只，雌雄各半，随机分为7组，其中1组为空白对照组，6组造东莨菪碱记忆获得障碍模型。造模型6组小鼠分别灌服大、中、小剂量心脑宁片混悬液（2.2、1.12、0.56 g/kg，用 0.5%CMC 配成 0.11、0.056、0.028 g/ml，0.2 ml/10 g），吡拉西坦混悬液（1.2 g/kg，用 0.5%CMC 配成 0.06 g/ml，0.2 ml/10 g），金纳多混悬液（60 mg/kg，用 0.5%CMC 配成 3 mg/ml，0.2 ml/10g）和同体积的0.5%CMC；空白对照组灌同体积0.5%CMC。给药1次/d，连续给药 7 d，于第 6天给药后 1 h后，造模型6组小鼠均腹腔注射5 mg/kg的东莨菪碱，空白对照组腹腔注射同体积的生理盐水，10 min后将小鼠放入跳台仪的小盒内进行训练。训练时先让小鼠在跳台仪小盒内适应3 min，再接通36 V电源（0.25 mA电流），小鼠受到电击后正常反应是跳回跳台上躲避电击。以小鼠双足同时按触铜栅为触电，视为错误反应，训练5 min。第7天（24 h后）给药1 h，重新测试小鼠记忆情况，观察并记录小鼠首次从跳台上跳下的潜伏期及5 min内错误次数。

1.4.2 对小鼠获得性记忆障碍模型的影响（避暗法） 取体重18～21 g小鼠，筛选小鼠双前肢脚掌皮肤电阻在150～200 kΩ，放入避暗法测定盒（不通电）40 s内进入暗室的小鼠70只，雌雄各半，随机分为7组，其中1组为空白对照组，6组造东莨菪碱记忆获得障碍模型。造模型6组小鼠分别灌服大、中、小剂量心脑宁片混悬液 （2.2、1.12、0.56 g/kg，用0.5%CMC 配成 0.11、0.056、0.028 g/ml，0.2 ml/10 g）， 吡拉西坦混悬液（1.2 g/kg，用 0.5%CMC 配成 0.06 g/ml，0.2 ml/10g），金纳多混悬液（60mg/kg，用 0.5%CMC 配成 3mg/ml，0.2ml/10g）和同体积的0.5%CMC；空白对照组灌同体积0.5%CMC。给药1次/d，连续给药7 d，于第6天给药后1 h后，造模型6组小鼠均腹腔注射5 mg/kg的东莨菪碱，空白对照组腹腔注射同体积的生理盐水，10 min后将小鼠头部背向洞口放入明室，同时开始计时，保持通电5 min，进行电击记忆训练。第7天（24 h后）给药1 h，重新测试，记录小鼠自放入明室到首次进入暗室的时间（潜伏期）和5 min内小鼠进入暗室的次数（受电击次数），5 min内未进入暗室的小鼠潜伏期按300 s计。

表1 心脑宁对东莨菪碱所致小鼠记忆障碍模型作用（跳台法，±s，n=10）

表1 心脑宁对东莨菪碱所致小鼠记忆障碍模型作用（跳台法，±s，n=10）

与模型组比，*P<0.05；与模型组比，#P<0.01

组别 剂量（g/kg） 潜伏期（s） 错误次数（次）空白对照组 146.0±57.0# 2±1#模型组 39.0±13.6 4.3±2吡拉西担组 1.2 82.7±18.6# 2.4±1.2*金纳多组 0.06 79.9±27.9# 2.4±1.1*大剂量心脑宁片组 2.2 78.2±30.6# 2.8±1.4中剂量心脑宁片组 1.12 80.7±31.3# 2.6±1.2*小剂量心脑宁片组 0.56 82.5±20.0# 2.4±1*

2 结果

2.1 对获得性记忆障碍的影响 （跳台法） 从表1可看出，与空白对照组比，模型组小鼠首次出现错误的潜伏期显著缩短（P<0.01）、5 min 内出现的错误次数显著增加（P<0.01），说明造小鼠记忆获得障碍模型成功。与模型组比，大、中、小剂量心脑宁片组、吡拉西担组和金纳多组均可显著延长小鼠首次出现错误的潜伏期（P<0.01），中、小剂量心脑宁片组、吡拉西担组和金纳多组均可显著减少小鼠5 min内出现的错误次数（P<0.01）；以中、小剂量心脑宁片组对东莨菪碱所致小鼠记忆获得障碍模型的改善作用为好。

2.2 对获得性记忆障碍的影响 （避暗法） 从表2可看出，与空白对照组比，模型组小鼠首次出现错误的潜伏期显著缩短（P<0.01）、5 min 内出现的错误次数显著增加（P<0.01），说明造小鼠记忆获得障碍模型成功。与模型组比，大、中剂量心脑宁片组和吡拉西担组均可显著延长小鼠首次进入暗室的潜伏期（P<0.01），大剂量心脑宁片组和吡拉西担组可显著减少小鼠5 min内进入暗室的次数（P<0.01）；以大、中剂量心脑宁片组对东莨菪碱所致小鼠记忆获得障碍模型的改善作用为好。

表2 心脑宁对东莨菪碱所致小鼠记忆障碍模型作用（避暗法±s，n=10）

表2 心脑宁对东莨菪碱所致小鼠记忆障碍模型作用（避暗法±s，n=10）

与模型组比，*P<0.05；与模型组比，#P<0.01

组别 剂量（g/kg） 潜伏期（s） 错误次数（次）空白对照组 53.6±46# 2.9±1.1#模型组 20.2±12 7.3±4.3吡拉西担组 1.2 51.5±28# 3.6±2*金纳多组 0.06 38±25.6 4.7±3.3大剂量心脑宁片组 2.2 49.3±29.3# 4.0±1.8*中剂量心脑宁片组 1.12 47.9±19.2# 4.6±2.3小剂量心脑宁片组 0.56 47.3±38.2 5.6±2.5

3 讨论

心脑宁片是根据中医理论和现代药理研究成果拟定的院内协定处方。方中以人参为君药，《名医别录》：调中，止消渴，通血脉，破坚疾，令人不忘，以其主补五脏，安精神，定魂魄；黄芪，补中益气，为臣药；当归，活血养血；川芎，其性善降结气，以走肝经，气中之血药，通行十二经，具有理气、活血化瘀的作用为佐药。4药合用，集活血化瘀、抗血栓、益气之功于一体，既重视疏通脉管，以改善脏器供血，又注意改善人体整体功能及代谢，达到扶正祛邪之目的。本实验进行了心脑宁片对东莨菪碱所致小鼠记忆障碍模型影响的实验研究，结果显示：造小鼠记忆获得障碍模型成功。与模型组比，大、中、小剂量心脑宁片组、吡拉西担组和金纳多组均可显著延长小鼠首次出现错误的潜伏期（P<0.01），中、小剂量心脑宁片组、吡拉西担组和金纳多组均可显著减少小鼠5 min内出现的错误次数（P<0.01）；以中、小剂量心脑宁片组对东莨菪碱所致小鼠记忆获得障碍模型的改善作用为好。与模型组比，大、中剂量心脑宁片组和吡拉西担组均可显著延长小鼠首次进入暗室的潜伏期（P<0.01），大剂量心脑宁片组和吡拉西担组可显著减少小鼠5 min内进入暗室的次数（P<0.01）；以大、中剂量心脑宁片组对东莨菪碱所致小鼠记忆获得障碍模型的改善作用为好。本研究为其治疗中风患者改善记忆力减退提供了实验依据。

志谢 本实验在河南中医学院苗明三教授指导下完成，特此致谢

[1]苗明三，杨保新，史晶晶.益脑胶囊对东莨菪碱致小鼠记忆获得障碍模型的影响[J].中药药理与临床，2008，24(6):71-72.

[2]周小梅，杨全余，陈秋红.藏药脑血康对小鼠学习记忆的改善作用[J]. 中成药，2007，29(4):578-579.

[3]顾 彬，汪 淼，张文生.强记片对东莨菪碱致小鼠学习记忆障碍的影响及机理研究[J].北京中医药大学学报，2008，31(9):616-618.

[4]张红英，张顺兴，秦孝智.水芹提取物对小鼠学习记忆促进作用的影响[J].时珍国医国药，2006，17(6):914-915.

[5]周小梅，杨全余，陈秋红.藏药脑血康对小鼠学习记忆的改善作用[J]. 中成药，2007，29(4):578-579.

[6]叶翠飞，魏海峰，张 丽，等.何首乌提取物二苯乙烯苷对东莨菪碱致学习记忆障碍模型小鼠的影响[J].中国药房，2004，15(11):658-660.

[7]侯 悦，吴春福，何 祥，等.氯氮平、奥氮平对小鼠在避暗实验中学习记忆获得、巩固和再现过程的影响[J].中国临床康复，2006，10(38):61-64.

[8]张红英，张顺兴，秦孝智.水芹提取物对小鼠学习记忆促进作用的影响[J].时珍国医国药，2006，17(6):914-915.

[9]朱未名，胡海燕.安神益智方对老年痴呆症模型小鼠学习记忆能力及脑组织内自由基代谢的影响研究[J].中华中医药学刊，2007，25(6):1230-1232.

[10]董文心，阮克锋，顾丰华，等.归苓片改善动物学习记忆功能的研究[J]. 中草药，2006，37(12):1831-1835.

[11]陈红燕，刘思源，袁丽娟，等.复方枣仁水提物对小鼠学习记忆的影响研究[J].中国药业，2011，20(16):29-31.

[12]郭 丽，苗明三，杨保新.益脑胶囊对记忆巩固性障碍小鼠模型的影响[J].医药论坛杂志，2006，27(19):19-23.

[13]瞿礼萍，曾 南，卢陆飞，等.逍遥散对小鼠学习记忆能力的影响[J].中药药理与临床，2008，24(6):1-3.

[14]张 季，张丹参，严春临，等.蒺藜皂苷对小鼠记忆障碍的影响[J].中药药理与临床，2007，23(3):47-49.

[15]瞿礼萍，曾 南，卢陆飞，等.逍遥散对小鼠学习记忆能力的影响[J].中药药理与临床，2008，24(6):1-3.