康艾注射液对代偿期肝硬化患者多种细胞因子的影响

孙 彤 陈凯红 裴 豪 胡敏涛

1.无锡市第五人民医院传染科 (江苏无锡，214005) 2.无锡市第五人民医院检验科

我们研究了康艾注射液对代偿期乙型肝炎肝硬化患者血清白细胞介素 (IL)-10、IL-12、IL-18、干扰素-γ (IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响，以探讨康艾注射液对患者免疫功能的调节作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2008年3月至2011年10月在无锡第五人民医院传染科住院的乙型肝炎肝硬化代偿期患者60例，病例诊断符合2000年9月西安中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会联合修订的诊断标准［1］。随机分成两组，各30例。康艾组男22例，女8例，年龄32～63(45.10±7.81)岁。对照组男21例，女9例，年龄30～62(44.87±7.72)岁。健康人组20例为2008年5月至2011年10月于本院体检科体检的健康人群，年龄27～61(44.90±9.54)岁。

1.2 治疗方法 对照组患者口服拉米夫定 (0.1g/次，1次/d)及阿德福韦酯胶囊 (10mg/次，1次/d)，两种药物均应用24周以上。另选用甘草酸制剂、还原型谷胱甘肽，苦黄注射液等。治疗组患者在上述治疗基础上，加用康艾注射液40ml加入10%葡萄糖注射液中静脉点滴，1次/d，疗程两周。

表1 两组患者治疗前后血清5项指标结果比较(±s，pg/ml)

表1 两组患者治疗前后血清5项指标结果比较(±s，pg/ml)

与上治疗时间段比较，#P＜0.05，##P＜0.01;两组不同时段比较，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;与健康对照组比较，△△P＜0.01

组别 TNF-α IFN-γIL-10 IL-12 IL-18艾康组(n=30)治疗前 55.81±11.67△△ 60.01±12.47△△ 42.09±10.73△△ 121.57±26.49△△ 261.403 ±20.31△△治疗1 周时 68.09 ±19.65△△## 78.10 ±12.48△△## 36.02 ±9.78△△# 163.87 ±38.44△△## 273.63 ±22.10△△##治疗两周时 46.36 ±12.26 88.91 ±11.41 30.26 ±8.81 183.59 ±42.21△△ 324.22 ±19.23△△对照组(n=30)治疗前 56.86±11.83△△ 60.47±12.72△△ 43.12 ±15.45 123.72±19.92△△ 220.01 ±12.23△△治疗1 周时 78.23 ±15.05△△##＊＊ 70.46 ±11.87△△##＊＊ 40.13 ±13.92△△ 142.08 ±23.03△△##＊＊ 257.98 ±13.59△△##＊＊治疗两周时 54.54 ±12.81△△##* 77.40 ±13.90△△#＊＊ 36.16 ±9.51△△＊ 159.59 ±14.09##＊＊ 310.84 ±34.27##*健康人组(n=20) 36.47 ±12.45 41.71 ±14.91 18.30 ±6.71 74.89 ±20.27 121.48 ±29.12

1.3 观察指标 所有受试者均于治疗前、治疗1周及治疗两周时采集外周静脉血10 ml，尽快分离血清并分装，-70℃冰箱储存备检。细胞因子测定采用双抗体夹心ELISA法，用全自动酶标分析仪读取450nm A值，并根据标准曲线计算TNF-α、IFN-γ、IL-10、IL-12、IL-18浓度 (pg/ml)，具体步骤按说明书严格操作。HBV-M采用时间分辨荧光定量分析法，试剂盒购自上海科华公司。HBV DNA定量检测采用TAG-MAN荧光定量PCR法，试剂盒购自上海科华公司。

1.4统计学方法 用SPSS 15.0进行统计学分析。计量资料用±s表示，采用F检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

两组患者治疗前后血清5项指标检测结果见表1。

两组患者 TNF-α、IFN-γ、IL-10、IL-12、IL-18的水平于治疗前比较均无显著性意义 (P＞0.05)，且均明显高于健康对照组 (P＜0.01);治疗后两组患者TNF-α的水平于治疗1周时达到峰后下降，治疗1周与治疗前、治疗两周与治疗1周时比较，均差异有显著性意义 (P＜0.05);康艾组治疗两周时TNF-α的水平降至低于治疗前的水平 (P＜0.05);对照组治疗后TNF-α水平稍低于治疗前，但前后比较无统计学意义 (P＞0.05);组间比较，康艾组治疗1周及两周时的TNF-α水平均低于对照组 (P＜0.05);两组患者IL-10水平治疗后持续下降，康艾组治疗前、中、后比较，差异均有显著性意义 (P＜0.05);对照组IL-10仅治疗后与治疗前比较差异有统计学意义 (P＜0.05);组间对比，治疗两周时康艾组IL-10水平低于对照组 (P＜0.05)。两组患者 IFN-γ、IL-12、IL-18水平均于治疗后迅速上升，两组治疗前、中、后三者之间比较差异均有显著性意义 (P＜0.05);组间对比则康艾组治疗1周及治疗两周时的水平均明显高于对照组 (P＜0.05)。

2.2 毒副反应 两组患者在治疗期间均未出现明显毒副反应。

3 讨论

康艾注射液是由人参、黄芪、苦参经现代科学工艺提取有效成份精制而成的新型中药复方制剂，具有扶正固本、补中益气、解毒散结之功效。人参提取物含有多种皂苷及人参多糖，人参皂苷能增强T细胞及B细胞功能，诱导IL-2、干扰素产生及增强LAK细胞及NK细胞活性［2］。黄芪在《神农本草经》中被列为上品，为补药之长，具有“益气补虚，扶正固本”之功效。黄芪含有多种氨基酸、微量元素 (硒、锰、锌、锗)、总黄酮 (TFA)、黄芪多糖及黄芪总苷等多种有效成分［3］，黄芪多糖能提高网状内皮系统吞噬功能，增强T细胞、NK细胞、LAK细胞、IL-2活性［4］。苦参素提取物的主要成份为氧化苦参碱，氧化苦参碱能稳定细胞膜、激活细胞膜腺苷酸环化酶，诱导产生肝细胞微粒体药物代谢酶、清除自由基［5］。

IFN-γ被认为是与肝炎病情程度相关性最好的细胞因子［6］，IFN-γ主要是由Th(辅助性T细胞)1类细胞产生的一种重要的细胞因子，可以抑制病毒复制，直接增强NK细胞杀伤病毒感染的细胞，促进细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)介导的病毒感染细胞的杀伤［7，8］。IL-10是炎症过程的一种负性调控因子，属于Th2细胞因子，内源性IL-10能减少肝细胞的炎性反应及减少中性粒细胞与肝窦内皮细胞粘附，降低局部炎症因子活性，限制其对肝脏的毒性，减轻肝脏损害，IL-10还可通过调节粘附因子的表达，主要是通过降低它们的含量而间接保护肝脏［9］。TNF-α具有多种生物学效应，适量TNF-α可调整机体的免疫及代谢作用，增强人体对入侵病毒等的抵抗力，对维持机体内部环境的稳定状态及抵制各种致病因子具有重要意义，而超值浓度的TNF-α可直接杀伤正常肝细胞和HBV感染的肝细胞，TNF-α通过损伤血管内皮细胞，促进白细胞与血管内皮细胞的吸附，引起肝脏炎症反应与肝细胞及肝脏的损害。TNF-α还可通过激活磷脂酶A产生脂类介质使正常肝细胞破坏，加重肝组织损伤［10］。IL-18具有促进Th1等T细胞、NK细胞、B细胞、Mφ等免疫细胞产生IFN-γ，增强淋巴细胞的细胞毒性和NK细胞、NK-T细胞的杀伤活性，增强 CTL、NK等效应细胞FasL表达，提高对 Fas阳性靶(肝)细胞的杀伤作用，促进NK细胞分泌穿孔素介导对靶(肝)细胞的杀伤［11］。IL-12在功能上与IL-18相似，亦可诱导Th1等细胞产生IFN-γ［11］，可独立地作用于 NK和 CTL细胞，倡导细胞毒肝脏炎性反应，而且还具有增强IL-18的炎性作用的功能［12］。

本研究结果显示：康艾组IFN-γ、IL-12、IL-18水平均高于对照组，表明康艾组患者之Th1应答强于对照组;而Th2特异性细胞因子IL-10于治疗后均持续下降，表明Th2应答呈减弱倾向，治疗两周时康艾组水平低于对照组，提示对照组之Th2应答强于康艾组。因艾康组Th1应答优于对照组，而Th2应答弱于对照组，有助于艾康组患者病情更早康复或阻止其病情继续加重，此结果与潘宇［13］的研究相符。

总之，在代偿期肝硬化患者中应用康艾注射液，可以促进Th1应答，促进炎症消退，使患者尽早康复或阻止病情进一步加重。

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