慢性乙肝病毒感染者血清血管内皮生长因子的研究

宋向芹 司秀文 张 芳 赵延婷

滨州医学院附属医院检验科 (山东滨州，256603)

慢性乙型肝炎 (CHB)是由乙型肝炎病毒 (HBV)感染而引起的一种传染性疾病。我国是HBV感染高发地区，其中一部分患者逐渐发展为肝纤维化，25%～40%的肝纤维化患者最终发展为肝硬化乃至肝癌。肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝癌的形成是一个多因素多细胞参与的复杂过程，其涉及多种细胞因子的改变。细胞因子对肝脏疾病的作用越来越受到关注，其血清学标志物可能是HBV病情进展的潜在的标志物［1］。多项研究表明血管内皮生长因子 (Vascular endothelial growth factor，VEGF)在肝脏相关疾病发生发展中起着重要作用［2，3］，但有关VEGF在HBV相关肝病患者血清中的表达变化研究较少。为探讨VEGF在乙型肝炎相关肝病患者血清中的动态变化及其意义，笔者作了相关的研究。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2010年7月-2011年12月，选择正常对照组43例，年龄25～60岁，为我院健康体检合格人员，无心、肺、肝、肾等重要脏器疾病，肝肾功能等血清学指标检查正常。慢性乙型肝炎40例，肝纤维化36例，肝硬化40例，肝细胞癌50例，诊断均符合2010年版中国慢性乙型肝炎的诊断标准［4］。

1.2 主要试剂和方法 抽取住院的各种肝病患者及健康查体者清晨空腹静脉血5ml，分别注入两个促凝试管中，分离血清，避免溶血、脂血标本，1管用于当日测定 AST、ALT、GGT、HBsAg;另一管血清分别按1次用量分装于数支离心管中，编号、密封，冻存于-80℃，集中测定VEGF。血清可溶性VEGF检测采用双抗体夹心ELISA法;血清ALT、AST、GGT采用OLYPUS 2700全自动生化分析仪检测。以上均严格按照标准化操作程序进行。

1.3 统计学方法 应用SPSS.V13.0统计学软件进行统计学处理。计量数据用(±s)表示，两组间比较用t检验，两组数据间相关关系用直线相关分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组人员血清VEGF水平 见表1。

表1 各组人员血清 VEGF水平比较 (±s，ng/L)

表1 各组人员血清 VEGF水平比较 (±s，ng/L)

组间比较，P均＜0.05

组别n VEGF慢性乙型肝炎组40 59.3 ±29.12肝炎肝纤维化组 36 106.5 ±40.7肝炎肝硬化组 40 196.3 ± 50.4肝细胞肝癌组 50 289.4 ±60.3正常对照组43 20.8 ±8.9

2.2 4 组患者VEGF与AST、ALT及GGT的相关性 见表2。

表24 组患者VEGF水平与AST、ALT、GGT相关性比较(±s)

表24 组患者VEGF水平与AST、ALT、GGT相关性比较(±s)

组别n VEGF GGT ALT AST慢性乙型肝炎组 40 59.3±29.1 65.2 ±7.8 272.8 ±80.8 178.9 ±69.8肝炎肝纤维化组 36 106.5±40.7 123.3 ±20.9 255.7 ±52.3 167.9 ±70.9肝炎肝硬化组 40 196.3 ±50.4 234.7 ±40.9 265.7 ±60.8 198.9 ±89.2肝细胞肝癌组 50 289.4 ±60.3 543.8 ±50.6 298.8 ±70.8 197.6 ±98.5

肝细胞癌、肝炎肝硬化、肝纤维化和慢性肝炎患者血清VEGF水平与AST、ALT无相关性，与GGT成正相关 (r=0.337，P ＜0.05)。

2.3 VEGF与GGT联合检测，对肝细胞癌患者诊断的敏感性和特异性 见表3。

表3 VEGF、GGT联合检测对肝细胞癌诊断的灵敏性和特异性 (%)

3 讨论

我国是乙型病毒性肝炎高发地区，部分患者逐渐发展成肝纤维化、肝硬化甚至肝癌，每年死于乙型肝炎相关疾病者多达35万人，乙型肝炎相关疾病已成为我国一个重要的公共健康问题。

VEGF是目前所知最重要的直接作用于血管内皮细胞的生长因子，可特异性地促进内皮细胞分裂、增殖和移动，增加血管通透性，在血管形成中起重要作用［5］。由于VEGF在原位诱导血管生成，正常人循环中的VEGF浓度比较低，而在与血管内皮细胞增殖相关的生理与病理过程中，VEGF浓度可明显升高［6］。乙型肝炎相关肝病进展过程中有肝细胞的损害和再生，而肝再生与VEGF的作用密切相关，肝再生包括内皮细胞增生、新生血管的生成、肝细胞的增殖、肝窦的重构等复杂过程，理论上认为VEGF会有波动，故研究患者血清VEGF水平能否敏感地反映肝细胞损伤、坏死和再生程度等具有重要的意义。

目前对于VEGF在肝病中的研究多采用肝组织免疫组化法，而对于血液中的VEGF与慢性肝病关系的研究报道较少，同时VEGF在慢性肝病中的研究结果不尽相同［7～9］。ALT、AST、GGT是较灵敏的肝功能指标［10］，是判断肝内炎性反映活动度的可靠指标［11］。因此，检测血液中的VEGF及VEGF、ALT、AST和GGT的联合检测对于进一步探讨血液中的VEGF在慢性肝病中的作用具有很高的临床应用价值。本研究通过检测慢性乙型肝炎、肝纤维化、肝硬化和肝细胞癌组患者血清VEGF水平，并与正常对照组进行比较，各组的VEGF水平高于正常对照组，差异有统计学意义 (P＜0.05)，且随着病情的进展，VEGF呈上升趋势。慢性乙型肝炎向肝纤维化、肝硬化、肝细胞癌发展时，VEGF可能参与了整个发展过程。似乎预示从病毒感染到组织的过度增生到肿瘤形成，血管形成可能起某种推动作用。本研究结果表明VEGF能够作为慢性肝病患者动态监测的指标，已有研究证实VEGF可以作为肝细胞癌的一种分子标志物［12，13］。本文研究表明：VEGF水平与ALT、AST无明显相关性;与GGT成正相关。VEGF与GGT联合检测，可以进一步提高对肝细胞癌患者诊断的灵敏度和特异性。

总之，VEGF与乙型肝炎的发病、肝细胞再生、肝组织病变等密切相关，在肝内血管构建中有重要的作用。检测血清中VEGF含量为临床观察乙肝患者发病程度、判断疗效提供了新的工具。由于本研究采用血清标本，用夹心ELISA法测定VEGF浓度，与免疫组化法研究组织中的VEGF表达率相比，检测血清VEGF不需用手术标本，取血方便，损伤小，又可反复检测，在用于慢性乙型肝炎疾病动态进展监测方面有一定的价值。

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